一、一起禽结核病的鉴定和处理（论文文献综述）
张建东[1]（2021）在《牛群中禽分枝杆菌流行病学调查及牛结核诊断抗原的研制》文中进行了进一步梳理牛结核病（Bovine Tuberculosis,bTB）主要是由牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis,M.bovis）感染引起的一种人兽共患病。随着我国养牛业迅速发展,牛结核病问题越来越严重,不仅给养牛业带来损失,也危害着人的生命与健康。牛结核病临床检疫方法主要包括γ-干扰素检测（IFN-γ）、结核菌素皮内变态反应（TST）和抗体检测。由于抗体检测主要适于感染晚期的结核牛,临床应用较少。IFN-γ检测与TST用的抗原主要是牛分枝杆菌的蛋白衍生物,与禽分枝杆菌存在交叉反应,造成假阳性,所以需要加入禽分枝杆菌的对照试验。本实验表达纯化牛分枝杆菌的抗原蛋白,并将其融合或混合建立敏感性好、特异性高的牛结核特异性诊断抗原,省略诊断过程中禽分枝杆菌的对照实验,减少检疫步骤与成本,推动牛结核病的检疫净化。通过病原学和血清学方法对我国禽分枝杆菌进行流行病学调查。建立禽结核分枝杆菌,副结核分枝杆菌,人猪型分枝杆菌的荧光定量检测方法,对我国牛场中牛的粪便、鼻拭子和奶样进行病原学检测。对2018到2019年采集的牛血清进行禽结核的IFN-γ检测和副结核抗体检测。用PCR方法从牛分枝杆菌AF2122/97基因组中扩增出ESAT-6、CFP-10、RV3615和RV3020基因片段,构建pET-28a-ESAT-6、pET-28a-CFP-10、pET-28a-RV3615和pET-28a-RV3020重组质粒。设计融合基因ECR（ESAT-6、CFP-10、RV3615）和ECR30（ESAT-6、CFP-10、RV3615、RV3020）,送到公司构建质粒。提取阳性重组质粒,转化感受态细胞,诱导表达,SDS-PAGE分析显示重组蛋白ESAT-6、RV3615、ECR和ECR30以包涵体形式存在,重组蛋白CFP-10和RV3020以可溶形式存在。6个重组蛋白均具有良好的抗原特性,并用Ni-NTA层析柱成功洗脱出6个目的蛋白。筛选出牛结核阳性牛和副结核阳性牛,在IFN-γ检测中,鸡尾酒蛋白抗原1（ESAT-6、CFP-10、RV3615）和融合蛋白ECR敏感性分别为90.1%和85.9%,特异性100%。在SICTT检测中,鸡尾酒蛋白抗原2（ESAT-6、CFP-10、RV3615、RV3020）和融合蛋白ECR30敏感性分别为80%和70%,特异性100%。工作浓度选择中,4个蛋白最优工作浓度均是80μg。在牛结核阳性场随机抽取120头牛进行IFN-γ检测,IFN-γ检测阳性35头,鸡尾酒抗原1阳性33头。在IFN-γ检测中发现有临床标准检测方法无法判断的牛有8头,鸡尾酒抗原1检测结果全是阳性。综上所述,我国牛场普遍存在禽分枝杆菌的感染,严重干扰牛结核检疫,在牛结核的检疫中必须加入禽分枝杆菌的对照试验。本研究所制备蛋白抗原在IFN-γ和SICTT检测中特异性100%;敏感性低于标准检测结果,其在IFN-γ检测中比SICTT的敏感性高,鸡尾酒抗原在IFN-γ检测中敏感性能达到90%,融合蛋白敏感性低于鸡尾酒抗原。牛群中存在牛分枝杆菌与禽分枝杆菌的共同感染,标准检测方法无法区别,本研究所研制蛋白抗原可以排除干扰进行精准诊断。
董元秋[2]（2019）在《越冬白头鹤肠道微生物群落结构组成的时空变化及其影响因素的研究》文中研究说明肠道微生物在机体维持健康中发挥重要的作用,其群落组成受到内源和外源因素的影响。内源因素包括遗传、性别等因素;外源因素包括季节、空间等环境因子。鸟类由于具有飞翔能力,可以大范围、远距离传播和扩散微生物,因此其肠道微生物的研究倍受关注,特别是集群水鸟的肠道微生物研究已经成为关注的热点。迁徙水鸟肠道微生物多样性及其维持机制和功能解释将成为水鸟生态学研究的一个重点领域。本文以长江中下游流域的升金湖和菜子湖的越冬白头鹤（Grus monacha）为对象,采用非损伤技术获得粪便样品,并提取寄主粪便的总DNA,通过高通量测序技术（Illumina HiSeq）平台,进行16S rRNA高变区的PCR扩增测序,并进行生物信息学的分析,研究地理格局、季节动态、环境等因素对寄主肠道微生物群落复合体结构和功能的影响,阐明越冬白头鹤肠道微生物群落的组成特点和功能的响应。并取得以下主要结果:（1）越冬白头鹤肠道微生物优势微生物群落的组成主要由厚壁菌门（Firmicutes）、变形菌门（Proteobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）和放线菌门（Actinobacteria）。升金湖白头鹤肠道微生物群落中厚壁菌门占绝对优势,而菜子湖白头鹤肠道微生物中厚壁菌门和变形菌门的相对丰富度都比较高;升金湖越冬白头鹤肠道中的厚壁菌门的相对丰度随越冬期的推进显着增加,而变形菌门随越冬期的推进显着减少;菜子湖越冬白头鹤肠道中厚壁菌门相对丰度增加时,拟杆菌门的相对丰度相对减少。放线菌门的相对丰度随着越冬期的进行有显着的增加。此外,根据变差分析的结果显示,地理位置的变化对越冬白头鹤肠道微生物群落组成的影响最大,其次是季节变化,最后为食物差异。（2）基于16SrRNA测序数据,通过PICRUSt对微生物功能进行预测,结果表明越冬白头鹤肠道微生物的功能主要与物质和能量代谢有关。在空间水平上,两湖泊间白头鹤肠道微生物预测功能氨基酸代谢和能量代谢相关微生物都有明显差异菜子湖白头鹤肠道微生物预测功能氨基酸代谢明显高于升金湖,而升金湖越冬白头鹤肠道微生物能量代谢功能生物明显的高于菜子湖。在季节变化水平上,升金湖和菜子湖白头鹤肠道微生物基因预测功能随着越冬期的进行没有显着变化。（3）NMDS分析和相似性分析都表示性别的差异对肠道微生物的组成有一定的影响。但是Lefse分析在门水平上不同性别间并未检测到显着性的差异,并且在属的水平上仅有2个属有显着差异,且属的相对丰富度较低（<0.1%）。在雌性体内乳酸菌占有绝对优势,而在雄性体内螺旋杆菌占有绝对优势。（4）越冬白头鹤与同一栖息地的越冬白额雁的肠道微生物的基本组成是由厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门等。通过alpha多样性分析和beta多样性分析,说明了越冬白头鹤和越冬白额雁肠道微生物的结构组成存在显着性的差异,并且越冬白额雁的alpha多样性指数明显的高于越冬白头鹤的alpha多样性指数。两种迁徙鸟类肠道中存在病原菌类,其中人类共感染的肠道微生物包括螺杆菌属（Helicobacter）,梭菌属（Clottridium）,肠球菌属（Enterococus）,分支杆菌属（Mycobacterium）和红球菌属（Rhodoccus）。
王梓[3]（2019）在《鸟分支杆菌侵染牛单核-巨噬细胞mRNA-miRNA表达谱分析及miR-150调控凋亡作用研究》文中研究表明自20世纪80年代以来,由非结核分支杆菌（NTM）引发的疾病病例增长迅速,逐步引发了人们对NTM研究的重视。在这些NTM中,鸟分支杆菌（Mycobacterium avium,M.avium）是全球范围内引起人和动物疾病最常见的病原菌之一。所以准确鉴定鸟分支杆菌亚种,对于评估其致病性和流行病学特征至关重要。M.avium的四个亚种中,副结核亚种（M.avium subsp.paratuberculosis,MAP）对畜牧业威胁最大,其主要引起反刍动物的慢性肉芽肿性肠炎,给肉牛及奶牛养殖带了较大的经济损失。在MAP感染过程中,巨噬细胞发挥着重要作用,MAP可以在巨噬细胞中存活,增殖和传播。目前,有关巨噬细胞在MAP感染后所引起的免疫应答机制尚未完全阐明。因此,本试验以M.avium为研究对象,对M.avium菌株进行亚种鉴定;进而对体外分离的牛单核-巨噬细胞受副结核亚种侵染后的mRNA及miRNA表达谱进行了测序分析,最后对筛选出的miRNA-150靶向PDCD4（程序性细胞坏死因子4）基因调节巨噬细胞的凋亡机制进行了探究。主要研究结果如下:1.M.avium亚种鉴定及比较基因组分析通过对鸟分支杆菌插入序列IS1311,IS900,IS901的检测及高度保守的抗原基因85B单核苷酸多态性分析完成了对菌株HJW和P10的亚种鉴定,其中菌株HJW为森林亚种（M.avium subsp.silvaticum,MAS）,P10为MAP。进而对罕见的森林亚种HJW进行了全基因组测序及分析,获得了0 gap的完整基因组序列,其基因组中包含丰富的遗传信息,包括多个重复序列,基因岛及分支杆菌典型的VII型分泌系统等。结合测序结果,对Genebank中已登录的M.avium全基因组序列进行比较分析,其中系统发育分析表明菌株HJW与另一中国分离株M.avium RCAD0278密切相关,共属同一分支。毒力因子PE/PPE家族分析表明,除PPE41,PPE42基因为副结核分支杆菌特有外,其它基因分布并无明显特异性。2.MAP体外侵染牛单核-巨噬细胞mRNA表达谱分析通过高通量测序技术对MAP侵染后的牛单核-巨噬细胞与未侵染细胞进行了mRNA表达谱分析,共筛选出显着差异表达基因618个,其中上调基因322个,下调基因296个。差异基因可显着富集到145个GO功能组,包括细胞因子活性,趋化因子活性,炎症反应,凋亡过程等多个与巨噬细胞免疫应答反应相关功能组;可显着富集到54个KEGG信号通路,包括NF-κB,MAPK,TOLL样受体,IL-17等多个与激活巨噬细胞免疫应答相关的信号通路。此外,使用qRT-PCR技术对测序结果进行验证,证明了测序结果的准确性。3.MAP体外侵染牛单核-巨噬细胞miRNA表达谱分析通过高通量测序技术对MAP侵染后的牛单核-巨噬细胞与未侵染细胞进行了miRNA表达谱测序分析,共筛选出差异表达miRNA 68个,其中已知牛miRNA40个,其它物种miRNA 21个,预测为novel miRNAs 7个;上调miRNA 37个,下调miRNA 31个。结合mRNA表达谱研究,对已知牛miRNA靶基因进行预测,对具有负调控关系的靶基因进行了功能分析。结果显示,靶基因可富集到多个与激活巨噬细胞免疫应答相关的信号通路,结合miRNA与mRNA表达谱分析,构建了相关信号通路的miRNA-mRNA调控网络。此外,使用茎环法对miRNA测序结果进行qRT-PCR验证,证明了结果的准确性。4.miRNA-150靶向PDCD4基因调控巨噬细胞凋亡作用研究首先,成功构建了PDCD4基因过表达载体并转染到RAW264.7细胞中,通过流式细胞术确认PDCD4基因对巨噬细胞具有促凋亡作用。随后通过双荧光素酶报告试验对miR-150与PDCD4基因的靶向关系进行了确证。进而结合流式细胞术与western blot等方法,对miR-150模拟物（mimics）及抑制物（inhibitor）靶向PDCD4基因调控巨噬细胞凋亡作用进行确证。最后,通过siRNA与miR-150inhibitor共转染细胞后的凋亡检测进一步证明,miRNA-150可以通过靶向PDCD4基因调控巨噬细胞凋亡。综上所述,本研究为阐明MAP的致病机理及其诱导的巨噬细胞免疫应答机制提供了理论基础,同时为miRNA调控巨噬细胞凋亡机制的研究提供了参考依据。
高媛媛[4]（2018）在《陕西靖边县奶牛结核病监测研究》文中进行了进一步梳理牛结核病（Bovine tuberculosis）是由分支杆菌引起的一种严重的人兽共患传染病。结核分支杆菌（Mycobacterium tuberculosis）、禽分支杆菌（M.avium）和牛分支杆菌（M.bovis）是所有分支杆菌中感染性最强的3种病菌,能够分别引起人类、家禽、和牛感染结核病。其中,由结核分支杆菌和牛分支杆菌引发的牛结核病是人兽共患的。牛结核病被世界动物卫生组织列为B类动物疫病,在我国被列为二类动物疫病。为了解陕西靖边县的奶牛结核病流行情况,本试验于2016年6月至2017年10月先后赴靖边县44个养殖牛场和8个行政村进行奶牛结核病的监测研究,采用PPD皮内变态反应和γ-干扰素（IFN-γ）酶联免疫吸附试验（ELISA）检测筛选715头奶牛,采集奶牛全血样品715份。研究结果显示,同时采用皮内变态反应试验（SITT）、比较皮内变态反应试验（SICTT）和γ-干扰素（IFN-γ）酶联免疫吸附试验（IFN-γELISA）对715头奶牛进行检测,SITT、SICTT和IFN-γELISA都检测出4头结核病阳性奶牛,其中SICTT试验共检出PPDB和PPDA结核病阳性分别为3头和1头,SICTT与SITT的PPDB阳性符合率为75%,SICTT与SITT的PPD总阳性符合率为100%。IFN-γELISA试验共检出PPDB和PPDA结核病阳性分别为3头和1头,IFN-γELISA试验与SITT的PPDB阳性符合率为75%,与其PPD总符合率为100%。IFN-γELISA结果显示,检测的靖边县奶牛全部715头中,4头奶牛被检为阳性,平均个体阳性率为0.56%,检测的94个群中,2个群有阳性结果,群阳性率2.13%。
李翠萍[5]（2016）在《结核易感标志物和血清标志物的研究》文中认为结核病,是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）引起并经呼吸道传播的一种慢性传染病,严重的危害人类健康。病原菌主要侵入人体的肺部,以肺结核病（pulmonary tuberculosis,PTB）最为常见。近年来,由于人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）流行、药物的滥用导致MTB耐药的出现,再加上人们对结核菌并没有引起足够重视,使得世界范围内的结核病又死灰复燃。尽管全球通过扩展直接观察与短程治疗战略及投入大量的资金来提高结核病治疗的完成率,但低下的疾病病例检出率仍然是结核病控制的主要障碍,导致结核病成为发病率和死亡率最高的感染性疾病之一。提高病人的检出率并及时治疗病人是有效控制结核病传染源,遏制结核病流行的最重要措施。目前临床上结核病的诊断方法有多种,都由于各种原因都无法满足临床上辅助诊断与指导用药的需要,因此,迫切需要发现新的标志物应用于发现病人和结核病的有效防控。血清中的蛋白具有非常重要的生理功能,主要包括参与人类机体的代谢、免疫、运输、物质交换、信号调节、凝血作用。在病理状态下血清中低丰度蛋白质的组成和数量通常会发生变化,因此这些具有重要生物学功能的表达量很低的蛋白质对于疾病的监测和诊断有着重要的意义。为了发现结核病的血液标志物,首先需要确定结核病人特别是肺结核病病人是否存在血液标志物,因此,本研究第一部分针对近年来结核的易感标志物研究进行系统的文献分析。研究发现,结核的遗传易感性是由多基因所决定的,其中有关人类白细胞抗原（human leucocyte antigen,HLA）等位基因多态性与结核病易感性的相关性备受关注。因此,通过对现有文献的分析从基因水平上确认在血液中可以找到与结核病相关的易感性标志物。基因是遗传信息的携带者,而生命活动的执行者却是蛋白质,与易感性基因标志物相比,蛋白质标志物可能与结核病的相关性更大。相对和绝对定量的同位素标记（isobaric tags for relative and absolute quantitation,i TRAQ）标记的基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-fight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）作为新学科及蛋白组学研究技术平台,为发现肺结核病的血清标志物提供了新思路,蛋白质组学及其相关技术让人类能够熟知细胞和生命有机体在特定时间和空间内所表达的全部蛋白质。因此,本研究的第二和第三部分利用相对定量的蛋白组学技术发现和验证血清蛋白性激素结合球蛋白（sex hormone-binding globulin,SHBG）、微管蛋白α-3E链（Tubulin alpha-3E chain,TBA3E）分别作为肺结核病和耐多药肺结核病的有价值的候选标志物。第一部分结核病易感标志物的关联性分析目的:采用Meta分析的方法对国内外已发表的有关于HLADRB1、HLA-DQ基因多态性与结核病易感性的文献进行综合分析,寻找结核病相关的易感基因。方法:在Pub Med和EMBASE中,应用关键词‘‘Mycobacterium tuberculosis’’、‘‘tuberculosis’’、‘‘MTB”或‘‘TB”、‘‘HLA-DRB1’’、‘‘HLADQA1’’或‘‘HLA-DQB1’’或‘‘human leukocyte antigen’’或‘‘HLA antigen’’、‘‘Polymorphism”、‘‘Polymorphisms”、或‘‘Genetic polymorphism”搜索1980年1月到2014年6月期间发表的相关英文文献。应用Stata版本11.2软件包对纳入的研究结果进行数据分析。结果:最终分别有21篇和12篇关于HLA-DRB1基因和HLA-DQ基因多态性与结核病易感性的关系的文献符合标准并纳入研究。研究结果表明HLA-DRB1*15、DRB1*08:03和DQB1*0601等位基因多态性增加结核病风险（DRB1*15:OR=1.49,95%CI:1.13-1.97,P=0.005;DRB1*08:03:OR=1.90,95%CI:1.25-2.90,P=0.003）,而HLA-DRB1*03、HLA-DRB1*11、DRB1*11:03和DRB1*12:02等位基因多态性降低结核病风险（DRB1*03:OR=0.82,95%CI:0.68-0.99,P=0.049;DRB1*11:OR=0.71,95%CI:0.54-0.93,P=0.013;DRB1*11:03:OR=0.3,95%CI:0.1-0.4,P=0.028;DRB1*12:02::OR=0.62,95%CI:0.39-0.98,P=0.043）。亚组分析结果表明DRB1*03和DRB1*07:01等位基因多态性会降低亚洲人群结核病的发病风险（DRB1*15:OR=0.78,95%CI:0.62-0.99,P=0.037;DRB1*07:01:OR=0.71,95%CI:0.53-0.95,P=0.020）,而DRB1*15、DRB1*08:03和DQB1*0601等位基因多态性增加亚组人群结核病的发病风险（DRB1*15:OR=1.80,95%CI:1.48-2.20,P=0.000;DRB1*08:03:OR=1.91,95%CI:1.25-2.92,P=0.003）。HLA-DQA1等位基因多态性与结核发病风险无明显的关联。结论:HLA-DRB1和HLA-DQB1等位基因多态性与结核病强相关,可能是其易感标志物。HLA-DQA1等位基因多态性与结核发病风险无明显的关联。第二部分基于i TRAQ标记结合MALDI-TOF-MS技术发现肺结核病血清潜在标志物目的:应用相对定量蛋白组学技术筛选肺结核病与对照组血清中的差异表达蛋白并验证潜在标志物,为肺结核病防控提供有价值的血清候选标志物。方法:采用相对和绝对定量的稳定同位素（isobaric tags for relative and absolute quantitation,i TRAQ）标记结合MALDI-TOF-MS技术分析五组样本的血清蛋白组,即7例耐多药肺结核病（multi-drug resistant pulmonary tuberculosis,MDR-PTB）、30例涂阴肺结核病（smear-negative pulmonary tuberculosis,SNP-TB）、10例涂阳肺结核病（smear-positive pulmonary tuberculosis,SPP-TB）、30例健康对照和10例肺炎血清差异表达蛋白;生物信息学分析差异蛋白的功能;对潜在标志物SHBG蛋白表达水平进行系列验证,包括应用免疫组化（Immunohistochemistry,IHC）验证40例肺结核病和10例对照组织,ELISA验证24例健康对照、35例耐多药肺结核病、55例涂阳肺结核病、70例涂阴肺结核病和15例肺炎的血清标本,Western Blot验证30例健康对照、7例耐多药肺结核病、10例涂阳肺结核病、30例涂阴肺结核病和10例肺炎的血清标本。根据ELISA的结果绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）并分析相关指标。研究结果:相对定量蛋白组学共鉴定和筛选出肺结核病血清26个差异表达蛋白（包括16个蛋白上调表达和10个蛋白下调表达）。ELISA方法分析发现SHBG蛋白在肺结核病中表达水平增高（耐多药肺结核病组:181.76±200.09 nmol/L、涂阳肺结核病组:160.43±75.45 nmol/L、涂阴肺结核病组:159.75±75.47 nmol/L、肺炎组:60.63±59.38 nmol/L、健康对照组:33.39±34.24 nmol/L;p<0.0001）,IHC和Western Blot方法的验证结果也表明SHBG蛋白在肺结核病中表达水平增高（p<0.05）,三种验证方法的表达趋势与蛋白组学筛选的结果完全一致。ROC曲线分析发现SHBG蛋白鉴别肺结核病与肺炎、健康对照的准确性、灵敏性、特异性和AUC分别为78.74%、75.6%、91.53%和0.981。结论:建立蛋白组学筛选和鉴定肺结核病血清差异表达蛋白的技术平台;血清SHBG蛋白鉴别肺结核病与肺炎、健康对照的具有较高准确性、灵敏度和特异度;是肺结核病防控有价值的血清候选标志物。第三部分基于i TRAQ标记结合MALDI-TOF-MS技术发现耐多药肺结核病血清潜在标志物目的:应用相对定量蛋白组学技术筛选耐多药肺结核病与对照血清中的差异表达蛋白,进一步应用ELISA和质谱多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）技术验证潜在的标志物。方法:采用i TRAQ标记结合MALDI-TOF-MS技术分析四组血清样本的蛋白,包括7例耐多药肺结核病、30例涂阴肺结核病、30例健康对照组和10例肺炎组,并通过Proteinpilot软件筛选与鉴定耐多药肺结核病相关的差异蛋白;应用生物信息学分析显着差异蛋白的细胞成分、分子功能和生物过程;对潜在标志物TBA3E、纤连蛋白（Fibronectin 1,FN1）和玻连蛋白（Vitronectin,VTN）的表达水平进行验证,ELISA验证19例健康对照、15例肺炎、22例涂阴肺结核病和13例耐多药肺结核病血清标本中TBA3E蛋白表达水平;以及26例健康对照、26例肺炎、25例涂阴肺结核病和27例耐多药肺结核病血清标本中VTN表达水平;MRM技术验证蛋白VTN和FN1在10例健康对照、10例肺炎、10例涂阴肺结核病和10例耐多药肺结核病血清标本表达水平。绘制ROC曲线并分析相关指标。结果:比较涂阴肺结核病、健康对照、肺炎血清蛋白组,在耐多药肺结核病血清中共鉴定和筛选出17个差异表达蛋白（包括9个蛋白上调表达和8个蛋白下调表达）。经ELISA方法分析发现TBA3E蛋白在耐多药肺结核病中表达水平增高（耐多药肺结核病组:311.31±161.73μg/ml、涂阴肺结核病组:6.17±6.29μg/ml、肺炎组:6.38±7.72μg/ml、健康对照组:53.73±20.05μg/ml;p<0.0001）,表达趋势与i TRAQ的结果完全一致。ROC曲线分析发现TBA3E蛋白鉴别耐多药肺结核病与肺炎、健康对照、涂阴肺结核病的准确性、灵敏性、特异性和AUC为91.07%、84.6%、94.6%和0.949。经MRM分析发现蛋白FN1和VTN在耐多药肺结核病中表达水平降低,表达趋势与蛋白组学筛选的结果完全一致,但VTN蛋白的ELISA结果与蛋白组学筛选的结果不一致。结论:TBA3E蛋白鉴别耐多药肺结核病与涂阴肺结核病、肺炎、健康对照的具有较高的准确性、灵敏度和特异度;可能是耐多药肺结核病候选的血清标志物;FN1蛋白和VTN蛋白是否是耐多药肺结核病的潜在生物学标志物需要进一步研究。
齐鸣箫[6]（2015）在《动物源性食品安全法律规制研究》文中指出动物源性食品作为食品的重要组成部分,其在提高人民生活水平、改变人们饮食结构的同时,为农民增收、经济发展、出口创汇奠定了坚实基础。然而,随着经济社会发展,动物源性食品在数量与品种大量丰富的同时,其食品安全质量却愈发堪忧,近年来,随着"瘦肉精"、"毒奶粉"、"红心蛋"等一系列食品安全事件曝光,动物源性食品安全不断挑战着公众的认知底线,在严重威胁、影响人民生命权、健康权的同时,对我国的对外贸易亦产生了不良影响。因此,加强动物源性食品安全法律规制,保障我国动物源性食品安全,不仅是维护人民生命健康权益的迫切需要,更是促进我国畜牧业可持续发展和我国政治经济社会稳定的迫切需要。本文以动物源性食品安全法律规制为研究对象,通过文献研究、规范分析、案例分析等方法,多角度、多方位开展研究:第一部分为引言,主要阐述动物源性食品安全法律规制的背景、目的及意义等;第二部分是对动物源性食品安全法律规制理论的简要探讨,明确了动物源性食品、动物源性食品安全、法律规制等基本概念;第三部分主要论述了我国动物源性食品安全所面临的问题及其影响因素;第四部分分析了我国动物源性食品安全法律规制现状及其存在的问题;第五部分列举了国外先进国家动物源性食品安全法律规制的先进成果;第六部分通过国内外动物源性食品安全法律规制的对比分析,针对我国国情,提出可行性应对对策。希望通过本文的相关研究,能够对推动我国动物源性食品安全法律规制有一定帮助。
孙丹丹,秦玉昌,李军国[7]（2015）在《鸡蛋生产质量安全问题分析及控制研究进展》文中提出鸡蛋是公认的营养食品,鸡蛋安全是全球消费者关注的焦点。文章基于我国蛋鸡养殖企业现状,对鸡蛋存在的质量安全问题及其影响因素进行了分析,并从环境、品种、饲料、饮水以及收集、贮存等方面提出具体的控制措施,以确保从源头上控制鸡蛋质量,提高鸡蛋安全水平。
贾天宇[8]（2013）在《动物疫病风险损害及规避研究》文中研究表明改革开放以来,我国的畜牧产业取得了巨大成就,飞速增长的畜牧产业带动了农村经济的快速发展,动物疫病却成为了制约畜牧业发展的瓶颈。如2004年爆发的高致病性禽流感导致13.25万只禽类发病,因病死亡和政府扑杀的数目分别达到了11.54万只和250.17万只。不仅如此,动物疫病还严重威胁人类的健康,如2013年爆发的H7N9亚型禽流感、2004年和2005年爆发的高致病性禽流感、2003年爆发的SARS等均对我国的人类身体健康带来巨大的威胁。因此,防控动物疫病已经成为保障经济发展和维护人类健康的重要工作。在动物防控管理过程中,养殖户不仅是直接利益相关者,更是防控工作最重要的环节之一,因此本文选择从养殖户角度来研究动物疫病防控管理。在研究中,利用多元线性回归模型,通过对四川省资阳市的实地调研来探索影响养殖户防控强度的因素。首先,在梳理相关理论和国内外文献的基础上,阐述了我国动物疫病流行现状和国内外防控管理现状,为后面的研究打好基础。随后,本文以禽流感为代表研究动物疫病对我国畜牧产业和养殖户的影响。在研究动物疫病对我国畜牧产业影响时,本文利用产量、价格等数据分别测算了爆发于2004年和2005年的禽流感对畜禽产品产量、畜禽产品价格、饲料行业和畜禽产品出口的影响。在研究动物疫病对养殖户的影响时,本文通过构建模型来反映疫情和扑杀政策对养殖户造成的损失。在实证分析方面,通过构建养殖户防控强度的多元线性回归模型,利用四川省资阳的实地调研数据量化分析了影响养殖户防控强度的因素。研究结果表明,性别、职业、养殖年限、养殖收入满意度、生猪销售方式、是否得到养殖贷款、是否参加养殖保险和当地疫病状况是影响养殖户防控强度的主要因素。最后,通过动物疫病影响和养殖户防控强度影响因素分析,提出了完善我国动物疫病防控体系的建议：建立和完善动物疫病防控管理体系；重新设计和完善扑杀补偿政策；提高养殖户的防控积极性和推广养殖保险来提高养殖户抵抗风险的能力。
张曙光[9]（2013）在《两对混合抗原在ELISA诊断结核分枝杆菌感染中的效果鉴定》文中提出结核病是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, Mtb）引起的传染病,严重危害人类健康。近年来结核病和HIV的共感染以及多重耐药结核菌株的出现,使得结核病的防治越来越严峻。结核病的早期诊断对结核病的防治意义重大。所以,找到能够特异性诊断结核病的抗原至关重要,但是单独抗原的效果往往不理想。因此,筛选混合抗原成为提升结核病诊断效果的很好选择。我们进行了ELISA实验,筛选能够提高诊断效果的混合抗原,得到了以下结果：（1）筛选到了混合抗原Rv1040c+Rv2309A和Rv2309A+Rv3872。本研究采集了86份血清（结核病人71份,健康人15份）,分别用单独抗原Rv1040c、Rv2309A和Rv3872以及混合抗原Rv1040c+Rv2309A和Rv2309A+Rv3872进行ELISA检测,结果表明两对混合抗原在灵敏度、特异性和精确性方面都优于单独抗原（Rv1040c+Rv2309A灵敏度80.28%,特异性100%,精确性83.72%；Rv2309A+Rv3872灵敏度74.65%,特异性100%,精确性79.07%）。（2）通过与商业试剂盒TB-DOT和TB-CHECK-1进行对比,我们发现两对混合抗原在灵敏度、特异性和精确性方面都优于TB-DOT（灵敏度61.97%,特异性73.33%,精确性63.95%）,在灵敏度和精确性方面都优于TB-CHECK-1（灵敏度45.07%,精确性54.65%）。综上所述,本研究发现的两对混合抗原Rv1040c+Rv2309A和Rv2309A+Rv3872具有更好的结核病诊断能力,在诊断结核病方面有很好的应用前景。
周峰[10]（2012）在《TLR2基因多态性与牛结核病的易感相关性研究》文中指出牛结核病是由牛分枝杆菌所引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病，可通过病畜传染给人类或其他动物。牛结核病的传染流行严重的影响到畜牧业的持续健康发展，更严重威胁着人类的健康。本课题从分子水平上做牛结核病的相关研究，有助于人们控制和消灭牛结核病，本试验也为以后的相关研究奠定基础。本试验将通过“PPD和ELISA”方法对河南省部分地区（洛阳、宜阳、兰考和南阳）的部分黄牛进行结核病检测，运用“PCR和DNA测序”的方法并结合统计学软件分析，检测黄牛TLR2完整编码区SNP位点与牛结核病发生的关联性，探讨这些SNP影响牛结核病易感性的分子机理。本试验对区分结核易感高风险牛群以及深入理解牛结核的发病机理具有重要意义。同时，也为牛结核病的防制和牛的遗传育种提供新思路。1.运用“PPD和ELISA”方法对黄牛进行结核病检测。对河南部分地区（洛阳市、宜阳县、兰考县以及南阳市）选定的382头黄牛进行结核菌素变态反应（PPD），结果显示，PPD检测出阳性病例11头（其中疑似病例2头），占2.36%。洛阳、宜阳、兰考、南阳这四个地区的检测结果均发现有阳性病例，阳性率分别为1.89%、2.35%、2.65%和2.29%，兰考地区黄牛结核病阳性率最高，为2.65%，洛阳地区黄牛结核病阳性率最低，为1.89%。对这些地区233份黄牛血液样本进行γ干扰素（ELISA）检测，检测出阳性病例3头，占1.29%。对156例黄牛做PPD和ELISA双重检测，结果呈双阳性的病例2头，洛阳和南阳各有一例，占检测总数的1.28%。2.根据GenBank中发表的牛TLR2基因序列设计引物，通过PCR方法对黄牛的TLR2基因进行分段扩增并测序。测序得到包含TLR2完整编码区以及5’端和3’端非编码区的2399bp的全序列。序列分析结果表明，黄牛TLR2基因开放阅读框全长2355bp，共编码784个氨基酸。黄牛的TLR2基因编码区与荷斯坦牛的相比发生了16个碱基突变，其中9个发生在胞外区，2个发生在跨膜区，5个发生在胞内区。与GenBank上已发表的其它动物TLR2基因参考序列进行比较，结果显示黄牛与荷斯坦牛、野牛、水牛、山羊、绵羊、猪、大猩猩和人的同源性分别为99.3%、99.3%、98.0%、96.3%、95.5%、85.4%、83.2%、83.1%。TLR2N’末端存在信号肽且可能在21位氨基酸处存在裂解位点，蛋白分子结构预测TLR2蛋白含1个跨膜结构域。3.结合统计学软件检测60头健康黄牛和26头结核病阳性黄牛TLR2基因多态性和SNP位点与牛结核病发生的关联性，确定黄牛易患结核病的高风险SNP位点及其缺陷基因型。分析结果表明：（1） TLR2在黄牛群中存在多态性位点（SNP）；（2）所研究的SNPs位点中，有6个SNP位点在和正常对照组比较中，具有统计学显着差异，并表现出与牛结核病相关性。这些位点显示了与结核病发生的正向关联，可能为高风险因子，与牛结核病的发病有显着关联。
二、一起禽结核病的鉴定和处理（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、一起禽结核病的鉴定和处理（论文提纲范文）
（1）牛群中禽分枝杆菌流行病学调查及牛结核诊断抗原的研制（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 牛结核病病原学特征 |
| 1.2 牛结核流行情况和危害 |
| 1.3 牛结核的临床症状与病变特征 |
| 1.4 牛结核病的诊断方法 |
| 1.4.1 细菌学方法 |
| 1.4.2 免疫学检测方法 |
| 1.4.3 分子生物学诊断 |
| 1.4.4 病理组织学观察 |
| 1.5 禽分枝杆菌 |
| 1.6 牛分枝杆菌主要诊断抗原 |
| 1.6.1 ESAT-6 家族蛋白 |
| 1.6.2 热休克蛋白(HSPs) |
| 1.6.3 MPB系列蛋白 |
| 1.6.4 Ag85 复合物 |
| 1.6.5 PE/PPE家族 |
| 1.6.6 其他蛋白 |
| 1.7 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 菌种和质粒 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 仪器和器材 |
| 2.1.4 主要试剂配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 牛群中禽分枝杆菌流行病学调查 |
| 2.2.2 检疫抗原的制备 |
| 2.2.3 诊断抗原的田间应用 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 牛群中禽分枝杆菌的流行病学调查结果 |
| 3.1.1 禽结核、副结核和人猪型结核荧光定量标准曲线的建立 |
| 3.1.2 特异性试验结果 |
| 3.1.3 临床样品检测结果 |
| 3.1.4 禽结核IFN-γ检测结果 |
| 3.1.5 副结核抗体检测结果 |
| 3.2 诊断抗原的制备结果 |
| 3.2.1 质粒构建与酶切验证结果 |
| 3.2.2 蛋白诱导表达结果 |
| 3.2.3 Western blot鉴定结果 |
| 3.2.4 蛋白表达纯化结果 |
| 3.2.5 纯化蛋白浓度的测定结果 |
| 3.3 诊断抗原田间应用的结果 |
| 3.3.1 敏感性与特异性实验的结果 |
| 3.3.2 工作浓度的结果 |
| 3.3.3 田间试验的结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 7 致谢 |
| 8 攻读学位期间发表论文情况 |
（2）越冬白头鹤肠道微生物群落结构组成的时空变化及其影响因素的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1 动物肠道微生物的研究的意义 |
| 2 肠道微生物生态的研究进展 |
| 2.1 肠道微生物与周围环境 |
| 2.2 肠道微生物与性别 |
| 2.3 肠道微生物与饮食 |
| 2.4 肠道微生物与动物营养 |
| 2.5 肠道微生物与健康疾病 |
| 3 动物肠道微生物研究方法 |
| 3.1 依赖于培养基的传统培养方法 |
| 3.2 分子生物学技术手段 |
| 4 鸟类肠道微生物生态的研究进展 |
| 4.1 鸟类肠道微生物研宄现状 |
| 4.2 鸟类肠道微生物的组成特征 |
| 4.3 鸟类肠道微生物的功能 |
| 4.4 影响鸟类肠道微生物群落结构的因素 |
| 5 研究目的和意义 |
| 5.1 研究意义 |
| 5.2 研究目的 |
| 5.3 研究内容 |
| 5.4 技术路线 |
| 第2章 研究方法 |
| 1 研究区域概况 |
| 1.1 升金湖自然概况 |
| 1.2 菜子湖自然概况 |
| 2 本研究的肠道微生物寄主鸟种 |
| 2.1 白头鹤 |
| 2.2 白额雁 |
| 第3章 越冬白头鹤肠道微生物群落结构的时空差异 |
| 1 引言 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 越冬期的划分 |
| 2.2 样品采集 |
| 2.3 越冬白头鹤粪便DNA提取 |
| 2.4 物种鉴定 |
| 2.5 细菌16S rRNA的高通量测序 |
| 3 结果 |
| 3.1 越冬白头鹤肠道微生物群落组成 |
| 3.2 越冬白头鹤肠道微生物组成差异 |
| 3.3 越冬白头鹤核心肠道微生物 |
| 3.4 越冬白头鹤肠道微生物影响因素 |
| 3.5 Alpha多样性的差异性 |
| 3.6 预测宏基因组功能的差异 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第4章 白头鹤不同性别个体间肠道微生物组成差异 |
| 1 引言 |
| 2 研究方法 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 雌性和雄性鸟类性别差异对肠道微生物组成的影响 |
| 3.2 雌性鸟类和雄性鸟类Beta多样性的分析 |
| 3.3 雌性鸟类和雄性鸟类Alpha多样性的分析 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第5章 白头鹤与同栖息地白额雁肠道微生物的比较 |
| 1 引言 |
| 2 研究区域和方法 |
| 2.1 样品采集 |
| 2.2 DNA提取及物种鉴定 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 越冬白头鹤和越冬白额雁肠道微生物组成 |
| 3.2 两种鸟类肠道微生物组成结构的差异性 |
| 3.3 两物种间alpha多样性的比较 |
| 3.4 两物种间宏基因预测功能的差异性 |
| 3.5 肠道病原细菌 |
| 3.6 两种鸟类肠道病原菌组成差异性 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论与展望 |
| 结论 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士间已发表论文 |
| 博士期间参加的科研项目 |
| 致谢 |
| 附录 |
（3）鸟分支杆菌侵染牛单核-巨噬细胞mRNA-miRNA表达谱分析及miR-150调控凋亡作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 鸟分支杆菌研究进展 |
| 1.鸟分支杆菌概述 |
| 2 鸟分支杆菌亚种的鉴别 |
| 3 鸟分支杆菌流行现状 |
| 4 副结核病发病过程及致病机制 |
| 第二章 miRNA在牛及巨噬细胞中调控作用的研究进展 |
| 1.牛组织中miRNA的研究 |
| 2.miRNA在巨噬细胞发育和功能中的作用 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 M.avium亚种鉴定及比较基因组分析 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第二章 MAP 体外侵染牛单核-巨噬细胞mRNA 表达谱分析 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 MAP 体外侵染牛单核-巨噬细胞miRNA 表达谱分析 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 miRNA-150靶向PDCD4基因调控巨噬细胞凋亡作用研究 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（4）陕西靖边县奶牛结核病监测研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 牛结核病的危害与防治 |
| 1.1 牛结核病概述 |
| 1.1.1 牛结核病的概念及其分类 |
| 1.1.2 牛结核病流行病学 |
| 1.1.3 国外流行情况 |
| 1.1.4 国内流行情况 |
| 1.1.5 牛结核病的病原 |
| 1.2 牛结核病的危害 |
| 1.3 牛结核病的诊断 |
| 1.3.1 细菌学方法 |
| 1.3.2 免疫学方法 |
| 1.4 牛结核病的治疗与免疫 |
| 1.4.1 牛结核病的治疗 |
| 1.4.2 牛结核病的免疫 |
| 1.5 牛结核病综合防治措施 |
| 1.5.1 加强兽医管理制度建设 |
| 1.5.2 加强兽医防疫的项目建设 |
| 1.5.3 落实好基层兽医岗位制度建设 |
| 1.5.4 要加强防检疫工作 |
| 1.5.5 要加强技术培训和宣传力度 |
| 1.5.6 提高牛群的免疫力定期检疫,积极预防 |
| 1.5.7 积极引进优良牛种 |
| 1.5.8 做好相对应急处治工作 |
| 1.6 研究目的和意义 |
| 试验研究 |
| 第二章 靖边县奶牛结核病监测研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 样品采集 |
| 2.1.3 主要器材和试剂 |
| 2.1.5 药品试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 SITT |
| 2.2.2 SICTT |
| 2.2.3 IFN-γELISA |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 IFN-γELISA检测结果 |
| 2.3.2 不同检测方法比较 |
| 2.3.3 被检牛个体阳性率 |
| 2.3.4 被检牛群体阳性率 |
| 2.3.5 血清学试验与现场调查阳性率对比 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 靖边县奶牛结核病的调查结果及感染趋势 |
| 2.4.2 不同检测方法比较 |
| 2.4.3 发病原因分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）结核易感标志物和血清标志物的研究（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 主要缩略语 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 结核病易感标志物的关联性分析 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 基于i TRAQ标记结合MALDI-TOF-MS技术发现肺结核病血清潜在标志物 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 基于i TRAQ标记结合MALDI-TOF-MS技术发现耐多药肺结核病血清潜在标志物 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（6）动物源性食品安全法律规制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 研究背景、目的及意义 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.3 研究思路及方法 |
| 1.3.1 研究思路 |
| 1.3.2 研究方法 |
| 第二章 动物源性食品安全法律规制概述 |
| 2.1 动物源性食品 |
| 2.1.1 食品的定义和范围 |
| 2.1.2 动物源性食品的定义和范围 |
| 2.2 动物源性食品安全 |
| 2.2.1 食品安全 |
| 2.2.2 动物性食品安全 |
| 2.3 法律规制 |
| 2.3.1 规制 |
| 2.3.2 动物源性食品安全法律规制对象 |
| 2.3.3 法律规制构成要件 |
| 注释 |
| 第三章 我国动物源性食品安全问题及影响因素——以典型案件为例 |
| 3.1 2010-2015年食品安全典型案件回顾 |
| 3.1.1 上海福喜公司高管涉嫌生产、销售伪劣食品案 |
| 3.1.2 食品加工滥用工业原料生产的"毒明胶"案 |
| 3.1.3 皮口镇养殖海参大量添加抗生素案 |
| 3.2 我国动物源性食品安全问题及其影响因素 |
| 3.2.1 动物疫病 |
| 3.2.2 兽药残留及违禁药品使用 |
| 3.2.3 环境污染及有毒有害物质残留 |
| 3.2.4 投喂、屠宰、加工、仓储、运输方式不当 |
| 3.2.5 人为因素 |
| 注释 |
| 第四章 我国动物源性食品安全法律规制现状及其局限性 |
| 4.1 我国动物源性食品安全法律规制现状 |
| 4.1.1 法律法规体系建设情况 |
| 4.1.2 制度体系建设情况 |
| 4.1.3 执行与监督体系建设情况 |
| 4.2 动物源性食品安全法律规制问题 |
| 4.2.1 法律法规体系不完善 |
| 4.2.2 标准体系不健全 |
| 4.2.3 管理部门权责不清问题严重 |
| 4.2.4 执法力量薄弱,监管人员素质不高 |
| 4.2.5 安全风险预警、召回制度等食品安全保障制度不健全 |
| 4.2.6 信息共享机制不健全 |
| 4.3 动物源性食品安全法律规制问题的成因 |
| 注释 |
| 第五章 域外动物源性食品安全规制研究及借鉴 |
| 5.1 美国 |
| 5.2 欧盟 |
| 5.3 日本 |
| 第六章 进一步完善我国动物源性食品安全法律规制的建议 |
| 6.1 构建法律法规体系 |
| 6.2 健全标准体系 |
| 6.3 理顺监管职责 |
| 6.4 提高执法、检测水平 |
| 6.5 完善基本制度 |
| 6.6 实施全过程监控 |
| 注释 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录: 动物源性食品安全法律法规执行及需求情况座谈提纲 |
| 致谢 |
（7）鸡蛋生产质量安全问题分析及控制研究进展（论文提纲范文）
| 1鸡蛋质量安全问题 |
| 1.1有害微生物污染 |
| 1.2兽药残留 |
| 1.3农药残留 |
| 1.4重金属残留 |
| 1.5化学违禁物污染 |
| 2安全因素分析 |
| 2.1鸡群 |
| 2.2鸡舍 |
| 2.3饲料 |
| 2.4饲养方式 |
| 2.5饲养者素质 |
| 2.6环境污染 |
| 2.7其他 |
| 3控制措施 |
| 3.1饲养环境 |
| 3.2鸡群健康控制 |
| 3.3饲料及饮水控制 |
| 3.3.1饲料营养要均衡 |
| 3.3.2饲料品质监控 |
| 3.3.3正确使用饲料药物添加剂 |
| 3.3.4饲料贮藏管理 |
| 3.3.5饲料分类存放 |
| 3.3.6饮水质量控制 |
| 3.4兽药使用 |
| 3.5鸡蛋收集清洁储藏运输 |
（8）动物疫病风险损害及规避研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 相关理论基础 |
| 1.2.1 流行病学理论 |
| 1.2.2 公共管理理论 |
| 1.2.3 制度经济学 |
| 1.2.4 保险学 |
| 1.3 国内外研究综述 |
| 1.3.1 国外研究综述 |
| 1.3.2 国内研究综述 |
| 1.4 研究内容 |
| 1.5 研究方法和研究思路 |
| 1.5.1 研究方法 |
| 1.5.2 研究思路 |
| 1.6 可能的创新与不足 |
| 2 我国动物疫病及防控管理现状 |
| 2.1 我国主要动物疫病流行现状 |
| 2.1.1 我国主要动物疫病 |
| 2.1.2 我国动物疫病发生现状 |
| 2.2 我国的动物疫病防控管理状况 |
| 2.2.1 我国动物疫病防控管理相关法律法规 |
| 2.2.2 我国动物疫病防控管理体系 |
| 2.3 发达国家动物疫病管理控制 |
| 2.3.1 美国重大动物疫病防控应急机制 |
| 2.3.2 英国重大动物疫病防控应急机制 |
| 2.3.3 法国重大动物疫病防控应急机制 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 动物疫病对我国畜牧产业及养殖户危害的模型估计 |
| 3.1 禽流感在我国发病状况 |
| 3.2 动物疫病对我国畜牧产业危害的测算 |
| 3.2.1 对畜产品及禽蛋生产影响的测算 |
| 3.2.2 对畜产品及禽蛋价格影响的测算 |
| 3.2.3 禽流感对饲料产业损害的测算 |
| 3.2.4 禽流感对畜产品出口危害的测算 |
| 3.3 动物疫病对养殖户危害的模型估计 |
| 3.3.1 我国现行的动物疫病扑杀补偿政策 |
| 3.3.2 扑杀政策对养殖户造成的经济损失模型构建 |
| 3.3.3 养殖户经济损失模型构建 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 动物疫病防控影响因素分析—基于对四川省资阳地区的调研 |
| 4.1 模型选择 |
| 4.2 数据来源及样本的描述性分析 |
| 4.2.1 数据来源 |
| 4.2.2 样本的描述性分析 |
| 4.3 变量选择 |
| 4.3.1 变量选择 |
| 4.3.2 变量定义 |
| 4.4 模型估计与结果分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 研究结论与政策建议 |
| 5.1 研究结论 |
| 5.2 政策建议 |
| 5.2.1 建立和完善动物疫病防控管理体系 |
| 5.2.2 重新设计和完善扑杀补偿政策 |
| 5.2.3 提高养殖户的防控积极性 |
| 5.2.4 推广养殖保险来提高养殖户抵抗风险的能力 |
| 5.3 值得进一步研究的问题 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（9）两对混合抗原在ELISA诊断结核分枝杆菌感染中的效果鉴定（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语 |
| 1 前言 |
| 1.1 结核病的危害 |
| 1.2 结核分枝杆菌与结核病 |
| 1.2.1 肺结核病简介 |
| 1.2.2 肺外结核病简介 |
| 1.3 结核病的防治 |
| 1.4 结核病的检测手段 |
| 1.4.1 结核病的临床确诊 |
| 1.4.2 胸肺X光检查(CXR) |
| 1.4.3 结核菌素皮下测试(TST) |
| 1.4.4 抗酸杆菌(acid-fast bacillus,AFB)痰涂片法 |
| 1.4.5 培养基法(culture) |
| 1.4.6 核酸扩增(NAA)分析 |
| 1.4.7 血清学检测 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 1.6 本研究的主要内容 |
| 2 实验材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验所用菌株 |
| 2.1.2 实验所用抗生素及培养基 |
| 2.1.3 实验所用质粒 |
| 2.1.4 实验所用酶、试剂和试剂盒 |
| 2.1.5 实验所用PCR引物序列及片段大小 |
| 2.1.6 本研究中的缓冲液及相关试剂的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 分子生物学基本操作 |
| 2.2.2 结核分枝杆菌基因Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等的PCR扩增 |
| 2.2.3 pET28a表达载体的改造 |
| 2.2.4 蛋白质表达载体pET-Rv2309A和pET-Rv1040c、pET-Rv3872等的构建 |
| 2.2.5 结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的诱导表达 |
| 2.2.6 结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的非变性纯化 |
| 2.2.7 结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 |
| 2.2.8 采用Bradford方法测定结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的浓度 |
| 2.2.9 间接酶联免疫吸附实验(间接法ELISA) |
| 2.2.10 使用商业试剂盒TB-DOT进行结核病的检测(对比实验1) |
| 2.2.11 使用商业试剂盒TB-CHECK-1进行结核病的检测(对比实验2) |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 PCR扩增得到结核分枝杆菌基因Rv1040c、Rv2309A和Rv3872 |
| 3.2 构建并且验证了蛋白质表达载体pET-Rv1040c、pET-Rv2309A和pET-Rv3872 |
| 3.3 在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导和试表达了结核分枝杆菌Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白质 |
| 3.4 用非变性方法纯化结核分枝杆菌Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白质 |
| 3.5 用Bradford方法定量Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白 |
| 3.6 通过酶联免疫吸附(间接ELISA)实验得到结核分枝杆菌Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白质作为单独抗原以及Rv1040c+Rv2309A、Rv2309A+Rv3872作为混合抗原诊断效果 |
| 3.7 采用商业试剂盒TB-DOT对相同的血清进行检测 |
| 3.8 采用商业试剂盒TB-CHECK-1对相同的血清进行检测 |
| 3.9 ELISA和TB-DOT,TB-CHECK-1结果分析 |
| 4 总结与讨论 |
| 4.1 总结 |
| 4.2 讨论 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）TLR2基因多态性与牛结核病的易感相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 牛结核病研究进展 |
| 1.1 牛结核病概述 |
| 1.2 牛结核病的危害 |
| 1.3 牛结核与人结核的关系 |
| 1.4 牛结核病国内外流行情况 |
| 1.4.1 国外牛结核病流行状况 |
| 1.4.2 我国牛结核病流行状况 |
| 1.5 牛结核病检测方法 |
| 1.6 SNP 与牛结核病的易感性 |
| 1.6.1 单核苷酸多态性 |
| 1.6.2 Toll 样受体概述 |
| 1.6.3 TLR2 在牛结核病发生中的作用 |
| 1.7 课题研究意义 |
| 第2章 河南部分地区黄牛结核病流行病学调查 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试验器材与试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 病例组与对照组纳入标准 |
| 2.2.2 黄牛血液样本采集与检测 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 结核菌素变态反应检测 |
| 2.3.2 γ-干扰素检测结果 |
| 2.3.3 PPD 和 ELISA 检测结果比对 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第3章 TLR2 基因多态性与牛结核病的易感相关性 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 黄牛血液样本 |
| 3.1.2 试剂 |
| 3.1.3 仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 黄牛基因组 DNA 的提取 |
| 3.2.2 琼脂糖凝胶电泳鉴定黄牛 DNA |
| 3.2.3 PCR 扩增黄牛 DNA 序列 |
| 3.2.4 黄牛 TLR2 序列分析与结构预测 |
| 3.2.5 黄牛 TLR2 基因多态性位点的鉴定 |
| 3.2.6 数据处理及黄牛基因分型 |
| 3.2.7 黄牛基因多态性位点与突变位点的判断标准 |
| 3.2.8 黄牛各 SNP 位点与牛结核病易感性的关联分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 黄牛 TLR2 基因的 PCR 扩增结果 |
| 3.3.2 黄牛 TLR2 基因测序结果 |
| 3.3.3 黄牛 TLR2 基因同源性比对 |
| 3.3.4 黄牛 TLR2 基因进化树构建 |
| 3.3.5 黄牛 TLR2 氨基酸序列推导 |
| 3.3.6 黄牛 TLR2 信号肽预测 |
| 3.3.7 黄牛 TLR2 跨膜结构分析 |
| 3.3.8 黄牛 TLR2 基因 SNP 位点 |
| 3.3.9 黄牛 TLR2 基因单 SNP 位点分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 第4章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 |
四、一起禽结核病的鉴定和处理（论文参考文献）
- [1]牛群中禽分枝杆菌流行病学调查及牛结核诊断抗原的研制[D]. 张建东. 山东农业大学, 2021(01)
- [2]越冬白头鹤肠道微生物群落结构组成的时空变化及其影响因素的研究[D]. 董元秋. 安徽大学, 2019
- [3]鸟分支杆菌侵染牛单核-巨噬细胞mRNA-miRNA表达谱分析及miR-150调控凋亡作用研究[D]. 王梓. 吉林农业大学, 2019(03)
- [4]陕西靖边县奶牛结核病监测研究[D]. 高媛媛. 西北农林科技大学, 2018(01)
- [5]结核易感标志物和血清标志物的研究[D]. 李翠萍. 广西医科大学, 2016(11)
- [6]动物源性食品安全法律规制研究[D]. 齐鸣箫. 河北科技师范学院, 2015(06)
- [7]鸡蛋生产质量安全问题分析及控制研究进展[J]. 孙丹丹,秦玉昌,李军国. 中国家禽, 2015(05)
- [8]动物疫病风险损害及规避研究[D]. 贾天宇. 华中农业大学, 2013(02)
- [9]两对混合抗原在ELISA诊断结核分枝杆菌感染中的效果鉴定[D]. 张曙光. 华中农业大学, 2013(02)
- [10]TLR2基因多态性与牛结核病的易感相关性研究[D]. 周峰. 河南科技大学, 2012(06)