一、毛橘红与光橘红的紫外光谱和薄层色谱指纹图谱研究（论文文献综述）
李鹏,李平凤,樊柳园,朱华[1]（2018）在《基于壮药材鉴别方法的比较研究》文中进行了进一步梳理通过对比的方法分析传统与现代鉴别方法在壮药材鉴别品质、行业应用、创新和发展等方面的不同应用及其进展情况,有望对壮药在今后的临床应用方面提供参考。
王浩涵[2]（2018）在《基于分子标记对化州柚及其近缘品系的分类鉴别研究》文中进行了进一步梳理目的:化橘红来源于芸香科柑橘属植物化州柚（Citrus maxima‘Tomentosa’）或柚（Citrus maxima（Burm.）Merr.）及其栽培变种的未成熟或近成熟干燥外层果皮。化橘红具有化痰止咳、理气消积等功效,用治风寒咳嗽、久咳哮喘、呕吐呃逆等症。化橘红是我国长久以来用药筛选出的优质药品,是广东十大南药之一。其中来源于化州柚的毛橘红是传统的道地药材,在广东地区享有很高的声誉。毛橘红与来源于其它杂柚的光橘红市场价格差异极大,市场上的化橘红药材多来源于光橘红。而化橘红基原植物来源复杂异常,区分十分困难。传统的鉴别手段往往受限于植物生长年限、部位、环境等诸多因素,而分子标记的方法是基于植物内在遗传物质的差异进行鉴别,不易受这些因素的影响,且其结果较为可靠客观、准确。因此,采用分子标记手段对化州柚及其近缘品系植物进行研究,能够探讨不同品系的化州柚遗传背景以及与其它柚类的亲缘关系;有利于开发一种快速有效的鉴别方法,可以从苗期区分两者,为稳定苗木市场提供一种有力手段,同时也能为规范化橘红药材市场奠定一些基础。方法:本研究采用ITS2、psb A-trnH、matK三段DNA条形码序列在基因序列水平上对化州柚及其近缘品系共26份样品DNA进行研究,寻找合适于柚类植物分析的DNA条形码序列。利用SCoT标记和SRAP标记对26份试材DNA进行遗传聚类分析研究,并结合两者对比分析,对比多种分子标记手段在化州柚及其近缘品系植物研究中的效果。在SCoT标记和SRAP标记的基础上开发快速、直观的SCAR标记进行鉴别分析,以期为化橘红基原植物的鉴别提供一种快速、高效的鉴定方法。结果:1.应用3条国际通用DNA条形码对化州柚及其近缘品系进行研究,其中matK序列仅在外类群样品中得到1个碱基的变异,无法进行后续遗传聚类分析。ITS2序列虽然得到较高的变异率但聚类结果不理想,而psb A-trnH序列变异率较ITS2低,但取得的聚类结果更接近于真实情况,结合两种标记的分析结果则未优于psbA-trnH的聚类结果。但在总体上,DNA条形码序列在种下水平尤其是柚类植物的研究中,难以取得较好的效果。2.采用正交设计结合单因素法对SCoT-PCR反应体系进行优化,得到最终的优化结果为:3 mmol/L Mg2+、0.3mmol/L dNTPs、0.75UTaq酶、0.6μmol/L引物、40ngDNA。通过引物筛选及退火温度优化,从36条引物中筛选出6条引物,在26份样品中扩增出了94条条带,平均多态性73.4%。利用UPGMA算法构建聚类树,对化州柚及其近缘品系进行分类鉴别研究。3.应用正交设计结合单因素法对SRAP-PCR反应体系优化,得到的最佳条件为:3 mmol/L Mg2+、0.25 mmol/L dNTPs、0.75UTaq酶、0.4μmol/L每引物、40ngDNA。通过对110对引物组合的筛选,最终得到7对引物组合对所有样品进行分析,共扩增出84条条带,平均多态比率70.24%。其构建的聚类树与SCoT相似,但结果更为准确,结合两者标记构建聚类树,发现与SRAP构建的聚类树大致相同,但更为准确,表明SCoT标记和SRAP标记是适用于化州柚及其近缘品系植物分析的方法。对比SCoT、SRAP标记及两者结合的结果,mantel分析显示三种标记两两间的相似度高,表明SCoT标记和SRAP标记能够有效结合,其结果可靠、准确。4.在SCoT标记和SRAP标记的研究中发现3条特异性条带,对这3条条带进行回收、连接、转化、克隆、测序,获得3条条带的序列。对其重新设计引物,尝试转化为SCAR标记,最终在SCAR标记的验证中发现所有样品均出现了1条均一的条带,表明SCAR标记的转化失败。结合文献报道和实验,总结了几条可能导致失败的原因,以期为后来SCAR标记的开发奠定一定的基础。结论:3条国际通用DNA条形码序列在化州柚及其近缘品系的遗传关系研究中,未取得理想的效果,仅psbA-trn H序列的建树结果较好。SCoT标记的扩增效率和多态性较SRAP标记高,但在聚类分析中,SRAP标记取得了更接近真实情况的效果,结合两种标记分析,发现其能够完全区分化州柚及其它柚类。在基于SCoT标记和SRAP标记的基础上,开发SCAR标记,获得了3段特异序列,对其设计专有引物,但在最后验证的时候发现其多态性消失,转化失败。笔者根据实验结果,并参考了一些文献,总结了几点可能导致SCAR标记转化失败的原因,以期为后人的研究提供一些参考和借鉴。
何晶[3]（2018）在《基于回乳与消食作用的麦芽炮制工艺及芽长研究》文中提出目的:本研究在前期实验基础上,基于麦芽回乳与消食作用,建立麦芽炮制工艺并优选芽长。探讨麦芽在发芽过程中甲醇提取物HPLC指纹图谱特征及生物碱物质变化规律;比较不同芽长麦芽水煎液回乳消食作用的差异;从麦芽药效物质生物碱变化规律以及回乳消食药效学角度共同优选麦芽发芽炮制工艺及其芽长。方法:（一）以麦芽生物碱物质含量及淀粉酶活力为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察浸泡时间、发芽温度、发芽湿度及每日洒水量对大麦发芽的影响。麦芽中总生物碱及大麦芽碱含量测定方法依据本课题组前期的实验方法进行;麦芽中淀粉酶活力测定采用3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法。（二）用WondaSil○RR C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇-0.1 mol·L-1磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0mL·min-1,检测波长270 nm。制备10批生麦芽药材指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）对其进行相似度评价,在相同条件下比较麦芽发芽炮制过程HPLC图谱的差异;通过图谱信息探讨麦芽在发芽过程中物质成分变化规律。采用HPLC色谱法及酸性染料比色法研究麦芽发芽过程生物碱物质动态变化。（三）高泌乳素血症模型建立:采用背部皮下方式注射盐酸甲氧氯普胺复制高泌乳素血症大鼠模型,按照75 mg·kg-1剂量,每天上午注射1次,连续10天。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组大鼠血清中泌乳素（PRL）、孕酮（P）、雌二醇（E2）含量;采用免疫组化法测定各组大鼠下丘脑多巴胺D1、D2受体阳性反应及脑垂体PRL细胞阳性反应;采用荧光定量聚合酶链式反应法（PCR）测定各组大鼠脑垂体PRL mRNA表达水平。（四）采用炭末推进实验,测定各不同芽长麦芽水煎液组小肠推进率以及胃排空率;采用酶联免疫（ELISA）法测定各组小鼠血清胃蛋白酶与胃泌素的含量。结果:（一）优选的炮制工艺为:用水浸泡5h,环境温度25℃,湿度70%,每日洒水量（与大麦的比重）1:1;洒水方式为多次少量,控制麦芽含水量在20%-35%之间。常压下70℃干燥12h。（二）10批不同芽长麦芽样品HPLC指纹图谱中有19个共有峰,7号峰为大麦芽碱。生大麦在发芽炮制后,新增加了5,7,8,10,12,15,16,17号峰;在发芽过程中,1,6,9,13号峰的峰面积逐渐增大后减小,在芽长为0.75 cm时达到最大;3,5,8,17,18,19号峰的峰面积逐渐增大后趋平。麦芽芽长为0.75 cm时,总生物碱含量最大。（三）对血清中PRL含量的影响:与正常组(3.91±1.49 ng·ml-1)比较,模型组大鼠血清中PRL(38.54±1.93 ng·ml-1,P<0.01)的含量明显升高;与模型组比较,溴隐亭阳性药组以及不同芽长麦芽水煎液组大鼠血清中PRL的含量均有明显降低（P<0.01）,其中溴隐亭阳性药组以及0.75cm(4.41±2.49 ng·ml-1)、1.00cm(4.72±2.45 ng·ml-1)、1.25cm(4.69±3.61 ng·ml-1)芽长麦芽水煎液组大鼠血清中PRL的含量接近正常组水平。表明不同芽长麦芽水煎液对高泌乳素血症具有一定的治疗效果,麦芽芽长为0.75cm至1.25cm效果最佳。与正常组（553.09±48.74）比较,模型组大鼠泌乳素细胞的累计光密度值（27415.48±1072.01）显着升高（P<0.01）;与模型组相比,溴隐亭阳性药组以及不同芽长麦芽组大鼠脑垂体泌乳素细胞的累计光密度值显着降低（P<0.01）,其中0.50 cm至1.25 cm芽长麦芽组泌乳素阳性细胞的减少量多于其他芽长麦芽组,尤其是0.75 cm（1794.35±347.62）芽长麦芽组最为明显。PRL细胞mRNA在各组大鼠脑垂体组织中都有表达,与正常组（4.23±5.27）比较,模型组PRL细胞mRNA的表达水平（22.78±4.12）明显升高（P<0.01）。与模型组比较,溴隐亭阳性药组（5.62±4.77）以及0.50cm（8.41±6.90）、0.75cm（6.43±3.74）、1.00cm（7.83±4.21）芽长麦芽组有明显差异,尤其是0.75cm芽长麦芽组（P<0.01）,PRL细胞mRNA的表达水平显着低于模型组。与正常组（674.52±72.90）比较,模型组（9.55±6.07）、溴隐亭阳药组（170.66±12.00）及各麦芽组大鼠下丘脑D1受体表达数量明显降低（P<0.01）;与模型组比较,溴隐亭阳性药组以及不同芽长麦芽组大鼠下丘脑D1受体表达数量均明显升高（P<0.01或P<0.05）,但仍显着低于正常组。与正常组（222.41±33.28）比较,模型组（41.89±14.01）、溴隐亭阳药组及0.25cm、0.50cm、1.50cm、1.75cm、2.00cm芽长麦芽组大鼠下丘脑D2受体表达数量明显降低（P<0.01或P<0.05）。与模型组比较,不同芽长组大鼠下丘脑D2受体表达数量显着升高（P<0.01或P<0.05）,其中0.75cm（180.04±37.72）、1.00cm（179.29±22.99）、1.25cm（179.28±30.59）芽长组接近正常组,表明此三组可使大鼠下丘脑D2受体表达数量恢复至正常,同时提示D2受体应是麦芽发挥回乳作用主要靶点。（四）小鼠小肠推进率及胃排空率结果:与正常对照组（31.90±3.48）比较,不同芽长麦芽组均能增强小鼠小肠推进率（P<0.01或P<0.05）,其中0.75cm至2.00cm芽长麦芽水煎液组显着增加（P<0.01）;0.25 cm至1.50cm芽长麦芽组均能增强小鼠胃排空率（P<0.01或P<0.05）,其中0.75cm至1.25 cm芽长麦芽水煎液组显着增加（P<0.01）。结合麦芽对小鼠小肠推进率以及胃排空率的影响,综合分析,麦芽芽长在0.75cm至1.25 cm之间效果最佳。结论:（一）市售的麦芽药材品质不一,没有统一的发芽炮制规范,本文建立的麦芽发芽炮制工艺稳定可行性强,可保证炮制后麦芽药材芽长均一,药效物质含量稳定。（二）从化学成分及生物碱含量角度建议麦芽发芽芽长0.75至1.00cm;从麦芽回乳消食作用疗效角度综合分析建议麦芽发芽芽长0.75cm至1.25cm。（三）麦芽回乳作用机制既作用于大鼠脑垂体泌乳素细胞发挥直接分泌作用,也通过下丘脑多巴胺D2受体介导调控泌乳素分泌,从两个途径发挥回乳功效。（四）建议新版《中国药典》增加麦芽药材质量控制标准（统一麦芽炮制工艺规范及胚芽长度,限定麦芽发芽的温湿度等因素,增加麦芽药效物质及含量为指标等）,使药材质量标准更为合理可行。
李宇邦[4]（2017）在《基于一测多评法对毛橘红与光橘红的质量比较研究》文中认为目的:在2015年版《中国药典》基础上,筛选出质量合格的化橘红药材样品,系统建立适用于快速测定化橘红中5种黄酮类成分含量的一测多评法,并揭示两种来源化橘红（毛橘红与光橘红）之间的差异。方法:参考2015年版《中国药典》要求,首先建立用于一测多评法质量评价研究的化橘红药材的质量控制方法,对各批供试品进行水分、总灰分、水溶性浸出物和醇溶性浸出物的含量测定;通过性状鉴别、显微鉴别分析毛橘红与光橘红样品的外观性状和显微结构特征差异;采用2015年版《中国药典》薄层色谱法对化橘红药材进行薄层鉴别,并建立一种可有效区别毛橘红与光橘红样品的薄层色谱法;采用高效液相色谱法建立毛橘红与光橘红样品的HPLC指纹图谱,进行分析比较。通过以上方法,筛选出的合格的化橘红药材样品,建立一测多评法同时测定毛橘红与光橘红中柚皮苷、新橙皮苷、野漆树苷、柚皮素、芹菜素5种黄酮类成分的含量,运用相关系数法对一测多评法计算所得的5种黄酮类成分含量与传统外标法计算所得的黄酮类成分含量进行验证。采用一测多评法对毛橘红与光橘红药材进行质量比较。结果:1用于一测多评法的化橘红药材的质量控制1.1理化鉴别31批毛橘红样品的水分含量范围在7.77%～9.81%之间,平均水分含量为8.78%;17批光橘红样品的水分含量范围在7.68%～10.88%之间,平均水分含量为9.46%。31批毛橘红的总灰分含量范围在2.77%～4.57%之间,平均含量为3.59%;17批光橘红的总灰分含量范围在3.60%～4.88%之间,平均含量为4.19%。31批毛橘红样品与17批光橘红样品的水分含量均不超过11%,总灰分含量均不超过5.0%,符合2015年版《中国药典》要求。浸出物含量测定结果显示,毛橘红样品的水溶性浸出物（热浸法）含量范围在36.60%～49.45%之间,平均含量为42.77%;光橘红样品的水溶性浸出物（热浸法）含量范围在37.91%～48.16%之间,平均含量为43.37%。毛橘红样品的乙醇浸出物（热浸法）含量范围在20.52%～27.12%之间,平均含量为23.68%。光橘红样品的乙醇浸出物（热浸法）含量范围为18.27%～28.34%,平均含量为 23.85%。1.2性状鉴别与显微鉴别31批毛橘红表面观呈黄绿色至深褐色,外果皮密被白色茸毛,其粉末中除了含有光橘红粉末中可发现的表皮细胞、中果皮薄壁细胞、网纹导管、螺纹导管、草酸钙方晶外,还含有其特有的非腺毛,横切面显微结构中,表皮细胞类方形,有非腺毛分布,外缘可见1列油室,呈圆形或椭圆形。17批光橘红表面观呈黄棕色至深褐色,外果皮光滑无毛,中果皮薄壁细胞排列较疏松,表皮不含非腺毛,油室较大。1.3薄层色谱研究薄层色谱法（药典法）结果显示,化橘红样品在柚皮苷对照品相应位置上显示相同颜色的斑点。本实验所建立的薄层色谱法,在紫外光（365nm）下,在Rf=0.35与Rf=0.27处,毛橘红样品的乙醇提取部位在相应位置上没有显示斑点。光橘红样品的乙醇提取部位在Rf= 0.35处显示蓝色斑点,部分光橘红样品在Rf= 0.27处显示蓝色斑点。1.4HPLC指纹图谱研究HPLC指纹图谱显示,从毛橘红与光橘红样品共检出色谱峰24个,对其HPLC指纹图谱进行色谱峰匹配,其中21个为共有峰,8、17号峰为毛橘红特有峰,2号峰为光橘红特有峰。31批毛橘红的HPLC指纹图谱相似度在0.954～0.995之间,17批光橘红的HPLC指纹图谱相似度在0.905～0.999之间,相似度均达到0.90以上。2 一测多评法的建立以柚皮苷作为内参物,建立新橙皮苷、野漆树苷、柚皮素、芹菜素的相对校正因子分别为0.898、1.519、0.313、0.406,RSD<3.0%。运用相关系数法对一测多评法测定的毛橘红与光橘红的5种黄酮类成分进行验证,结果显示,一测多评法计算得到的5种黄酮类成分含量结果与外标法计算得到的5种黄酮类成分含量结果无显着差异。3 一测多评法评价毛橘红与光橘红药材质量采用一测多评对毛橘红与光橘红样品进行质量比较,结果显示,毛橘红柚皮苷含量在56.321 mg·g-1～274.513 mg·g-1之间,平均含量127.138 mg·g-1;新橙皮苷含量在0.032mg·g-1～0.163mg·g-1之间,平均含量0.085mg·g-1;野漆树苷含量在1.307mg·g-1～14.726mg·g-1之间,平均含量7.079mg·g-1;柚皮素含量在0.116 mg·g-1～1.162 mg·g-1 之间,平均含量 0.394 mg·g-1;芹菜素含量在 0.018 mg·g-1～0.094mg·g-1之间,平均含量0.05mg·g-1。光橘红柚皮苷含量在28.387mg·g-1～229.015 mg g-1之间,平均含量76.085 mg·g-1;新橙皮苷含量在0.040 mg·g-1～0.143 mg·g-1 之间,平均含量 0.078 mg·-1;野漆树苷含量在 0.857 mg·g-1～5.675 mg·g-1之间,平均含量2.488 mg·g-1;柚皮素含量在0.083 mg·g-1～0.373 mg·g-1之间,平均含量0.194 mg·g-1;芹菜素含量在0.017 mg·g-1～0.124 mg·g-1之间,平均含量0.052mg·g-1。独立t检验结果显示,毛橘红与光橘红的柚皮苷、野漆树苷、柚皮素成分的含量存在显着差异（P<0.05）。结论:1用于一测多评法的化橘红药材的质量控制所检化橘红样品的水分含量、总灰分含量、性状与显微鉴别、薄层鉴别等,均符合2015年版《中国药典》要求。初步拟定浸出物检查项,毛橘红与光橘红样品的水溶性浸出物（热浸法）不得少于33%,醇溶性浸出物（热浸法）不得少于18%。本实验所建立的薄层色谱法,色谱图斑点清晰、直观,可有效地区分毛橘红与光橘红。所建HPLC指纹图谱法可用于毛橘红与光橘红药材来源鉴别,可通过所测样品的特征峰准确区分化橘红样品的来源,所测毛橘红样品来源于化州柚,光橘红样品来源于柚。2一测多评法的建立一测多评法所建立的相对校正因子准确、可靠,可用于毛橘红与光橘红5种黄酮类成分的含量测定。通过一测多评法计算化橘红中5种黄酮类成分的含量,与传统外标法相比,该方法能在新橙皮苷、野漆树苷、柚皮素、芹菜素对照品紧缺的情况下,准确得到待测成分的含量,可降低实验成本。3 一测多评法评价毛橘红与光橘红药材质量毛橘红与光橘红在有效成分上存在差异,毛橘红的柚皮苷含量是光橘红柚皮苷含量的近一倍,毛橘红中野漆树苷、柚皮素含量是光橘红的数倍以上,毛橘红中的柚皮苷、野漆树苷、柚皮素成分含量显着高于光橘红。从药材来源上对毛橘红与光橘红区分,可提高化橘红的总体药材质量。
张赟赟[5]（2016）在《指纹图谱在中药质量控制方面的研究现状》文中提出中药指纹图谱已日渐应用于中药鉴定与质量评价。文章对近来来薄层色谱指纹图谱、高效液相指纹图谱、气相色谱指纹图谱、核磁共振指纹图谱、X-射线衍射指纹图谱、色谱联用指纹图谱及DNA指纹图谱等的研究现状进行综述。
张岳[6]（2014）在《NIRS结合化学计量学在布渣叶质量评价中的应用研究》文中研究表明目的：布渣叶为椴树科植物破布叶Microcos paniculata L.的干燥叶,盛产于我国南方,特别是两广地区,资源丰富。具有消食化滞,清热利湿的功效。用于饮食积滞,感冒发热,湿热黄疸等症,民间常采叶晒干泡水当茶饮。近年来药理研究证明,布渣叶具有解热、促消化、退黄、抗炎及降血脂等作用。本文旨在前期研究工作的基础上,充分利用高效液相色谱（HPLC）及近红外光谱（near infrared spectroscopy, NIRS）等现代分析技术,结合化学计量学方法,对布渣叶的质量进行分析,以建立一种经济、简便、快速的布渣叶质量综合评价方法。方法：以布渣叶药材中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷为评价指标,采用高效液相色谱法对不同产地49份布渣叶样品进行指标成分的含量测定,并进行方法学考察；利用NIRS技术结合偏最小二乘法（Partial Least Square, PLS）建立NIRS与HPLC含量测定值之间的多元校正模型,以探索一种快速测定布渣叶指标成分含量测定的新方法。结果：通过方法学考察证实,建立的布渣叶黄酮类成分HPLC质量评价方法可行,重现性好,结果准确,可为布渣叶药材或饮片的质量控制提供一种“一测多评”的评价手段。通过对49批不同产地布渣叶中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷及总黄酮的含量测定进行HPLC分析,研究结果表明,布渣叶药材来源不同,其中表儿茶素等4种成分和总黄酮含量亦不同,表儿茶素含量在0.0260%-0.4514%之间、牡荆苷含量在0.0242%-0.1900%之间、异牡荆苷含量在0.0218%-0.2916%之间、水仙苷的含量在0.0448%-0.5024%之间；总黄酮含量在0.1338%-1.1114%之间；单一成分含量测定结果可以看出,呈现水仙苷含量>异牡荆苷含量（除S15、25样品外）>牡荆苷含量（除S23、24、37、42号样品外）的趋势,表儿茶素的含量未表现出这一特点,同时说明《中国药典》现行版布渣叶药材中规定的牡荆苷含量项具有一定的科学性。结果提示,布渣叶药材的质量受到诸多因素（如生长环境和加工炮制等）影响,应以多种数据综合评价药材的内在质量。本论文的分析结果,为多指标控制布渣叶质量提供了一种可参考的方法。NIRS数据通过比较模型的相关系数（R2）和均方根误差（RMSE）分析,布渣叶中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷校正模型的最佳预处理方法是9点平滑结合纵坐标归一化。应用SAS JMP Statistical Discovery V9.0.2统计分析大师中偏最小二乘法建立校正模型。布渣叶NIRS以9点平滑并进行纵坐标归一化处理,表儿茶素、异牡荆苷和水仙苷的建模波段为7800-9999cm-1,牡荆苷的建模波段为7100-7800cm-1,经交叉验证确定表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷的主因子数分别为10、7、9、8,得到模型的NIRS预测结果表明,表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷拟合直线的相关系数R2分别为0.9276,0.9084,0.9252,0.9305。NIRS预测值与HPLC测定值之间的偏差较小,所建模型的预测能力较好,预测结果及趋势与HPLC测定结果基本一致。将待测样品的近红外光谱数据导入模型中,即可对其含量进行快速预测。结论：采用NIRS技术结合化学计量学方法对布渣叶中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷的含量进行测定。该方法简单、准确,灵敏度高,检测成本低,有利于综合评价布渣叶药材的质量。
贾贤,陈雄庭,彭明,王颖,吴坤鑫[7]（2013）在《广东化州橘红（Exocarpium Citri Grandis）的研究现状》文中研究指明综述近年来对于广东化州橘红的研究进展,包括品种分类、有效化学成分的提取、化学成分检测与品质鉴别、药理及临床研究、分子水平的多样性研究、组织培养以及化州橘红的栽培与管理等方面的研究现状,并对化州橘红研究中存在的问题进行讨论与展望。
王佩龙[8]（2013）在《波棱瓜子药材质量标准研究》文中进行了进一步梳理波棱瓜（Herpetospermum pedunculosum （Sex.））为葫芦科波棱瓜属一年生攀援植物,以种子入药。波棱瓜子味苦,性寒,泻肝火、胆热,解毒,临床上主治肝胆疾病,如黄疸型传染性肝炎,胆囊炎等。波棱瓜子在藏成药中广泛使用,需求量大。《中华人民共和国药典》1977版中曾收载了波棱瓜。现行质量标准为卫生部药品标准藏药第一册（1995版）,仅有性状鉴别和显微鉴别,无含量测定；且定性鉴别仅有生物碱的鉴别。为准确、全面地控制波棱瓜药材的内在质量,为波棱瓜药材的生产和质量控制标准规范奠定基础,有必要对其质量标准进行深入系统的质量标准研究。本研究将从药材检查、药材鉴别及采用一测多评法测定波棱瓜药材中有效成份含量三个部分建立波棱瓜药材质量标准。本研究主要内容如下：1、药材检查对波棱瓜子药材进行了水分、总灰分、醇溶性浸出物、重金属含量检查,并根据测定结果,对上述指标的含量限度做出规定。波棱瓜中水分含量范围为4.66%-10.97%,故暂定水分不得过12%；总灰分含量范围为3.89%-7.31%,故暂定总灰分含量不得过8%；醇溶性浸出物含量范围为12.55%-17.21%,故暂定醇溶性浸出物的含量不得少于12%；五种重金属含量：铅含量范围为0.00-2.60mg/kg,镉的含量范围为0.00-0.23mg/kg,砷的含量范围为0.01-0.13mg/kg,汞的含量范围为0.00-0.14mg/kg,铜含量范围为2.81-9.11mg/kg。2、药材鉴别（1）采用薄层色谱法,以herpetolide A和herpetotriol为对照品,对波棱瓜药材进行鉴别,12批不同产地波棱瓜子药材在相同条件下与对照品相同位置具有相同颜色斑点,结果斑点清晰,分离度好,可作为波棱瓜药材的定性鉴别方法。（2）波棱瓜子药材HPLC指纹图谱研究：以herpetolide A为对照品,对12批次样品进行高效液相指纹图谱研究,获得具有18个共有峰的指纹图谱,各批样品与对照指纹图谱的相似度均在0.9以上。色谱图响应值高、基线平稳、分离度好,符合中药指纹图谱的技术要求,建立的HPLC指纹图谱可用于对波棱瓜药材的真伪进行鉴别及药材质量优劣进行控制。3、一测多评法测定波棱瓜子中有效成分含量以herpetolide A为内参物,建立其与herpetotriol的相对校正因子,用于测定herpetotriol的含量；外标法与一测多评法测定herpetotriol含量,两者相对误差小于2%,表明两种方法测定结果无显着性差异,一测多评法可用于波棱瓜子药材的质量标准研究。4、通过以上研究,拟定波棱瓜子质量标准如下：波棱瓜系葫芦科波棱瓜属一年生攀援植物波棱瓜Herpetospermum pendunculosum（Sex.）的干燥成熟种子。[薄层鉴别]（1）精密称取波棱瓜子药材1.0g,加入40mL甲醇,超声处理30min,放冷,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液1mL,即得供试品溶液。取HerpetolideA对照品,加甲醇制成herpetolide A lmg/mL作为对照品溶液。照《中国药典》（2010版）附录Ⅵ B薄层色谱法试验,吸取样品溶液3μL和对照品溶液2μL,点于硅胶GF254板上,以氯仿-乙酸乙酯-甲酸（5：1：0.2）作为展开剂,展开,取出,晾干,在紫外仪365nm下检视。供试品色谱中,在与对照品相应的位置上,显示相同颜色的斑点。（2）精密称波棱瓜子药材1.0g,加入40mL甲醇,超声处理30min,放冷,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液1mL,即得供试品溶液。取Herpetotriol对照品,加甲醇制成herpetolide A lmg/mL作为对照品溶液。照《中国药典》（2010版）附录Ⅵ B薄层色谱法试验,吸取样品溶液3μL和对照品溶液2μL,点于硅胶GF254板上,以氯仿-丙酮-甲酸（8：4.3：0.7）作为展开剂,展开,取出,晾干,在紫外仪254nm下检视供试品色谱中,在与对照品相应的位置上,显示相同颜色的斑点。[检查]水分使用烘干法进行测定,不得高于12%总灰分参照2010版《中国药典》（附录Ⅸ K）灰分测定法测定,不得高于8%醇溶性浸出物参照2010版《中国药典》（附录Ⅹ A）醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定,不得低于12%[含量测定]参照2010版《中国药典》高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定对照品溶液的制备分别精密称herpetolide A、herpetotriol对照品适量,制成浓度分别为6.8μg/ml、5.76μg/ml。供试品溶液的制备供试品溶液的制备取波棱瓜子药材约1.0g,精密称定,置三角烧瓶中,精密加入甲醇20mL,密塞,称重,超声40min,放冷,称重,用甲醇补足减失重,摇匀,滤过,取续滤液,取续滤液4℃保存作为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品和供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定,即得。本品含Herpetolide A不得低于0.7%,含Herpetotriol不得低于3.6%。[性味与归经]寒,苦。归肝、胆经。[功能与主治]泻肝火,胆热,解毒。用于治疗赤巴病,肝病,胆病以及消化不良。[用法与用量]3-6g。[贮藏]置阴凉干燥处,防蛀。
庄满贤[9]（2012）在《降香檀叶质量评价和综合利用研究》文中认为目的：中药降香为降香檀心材,种植数十年后才能供药用。降香檀叶民间有人用于降血压,但尚未见其质量评价和综合利用研究的报道。为此,作者对降香檀叶化学成分、形状与显微、薄层鉴定、有效成分含量测定、指纹图谱、药效等方面进行了研究,为其资源综合开发利用提供科学依据。方法：以SHR大鼠为实验模型,测定其给药前后收缩压,测定血清中Ang Ⅱ、ET-1含量,对降香檀叶提取物降血压药效进行研究；采用柱层析法、溶剂法等方法进行化学成分分离,并经理化常数和1H-NMR、13C-NMR等光谱分析,对所分的成分进行结构鉴定；依据形态学特征对降香檀叶进行原植物形态描述,照性状鉴别法进行性状鉴别,照显微鉴别法进行显微特征鉴别；采用TLC法对降香檀叶进行理化鉴别；采用HPLC法测定降香檀叶中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A的含量；采用HPLC法构建降香檀叶指纹图谱；以6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A的含量为考察指标,按正交设计法优化降香檀叶中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A提取工艺,并采用柱层析法结合溶剂法优选其纯化工艺；采用HPLC法测定降香檀不同部位有效成分含量并对其不同部位指纹图谱进行比较研究。结果：1.降香檀叶提取物降血压药效研究降香檀叶超临界提取物高剂量组、低剂量组以及挥发油提取物高剂量组、低剂量组均对SHR大鼠收缩压、有不同程度的降低作用,其中,挥发油提取物高剂量组、低剂量组降压作为较为明显,给药前后收缩压下降分别为：18.8mmHg、25.6MMHg,差异与无水乙醇对照组给药前后血压差进行t检验,P值均小于0.05,有显着性意义。超临界提取物高剂量组、低剂量组以及挥发油提取物高剂量组、低剂量组对SHR大鼠血清中Ang Ⅱ、ET-1含量均有降低的作用。经t检验,挥发油提取物高剂量组、低剂量组对SHR大鼠血清中AngⅡ含量的降低,与无水乙醇对照组相比,两者差异具有显着性意义。2.降香檀叶化学成分研究降香檀叶中含有氨基酸、蛋白质、有机酸、酚类、糖类、三萜类、黄酮类、挥发油等类化合物。从降香檀叶中分离得到两个异黄酮,经鉴定,为6-羟基-鹰嘴豆芽素A（6-hydroxy-Biochanin A）和鹰嘴豆芽素A （Biochanin A）。3.降香檀叶质量评价3.1降香檀叶形状、显微特征描述了降香檀叶性状特征、显微特征等作为其形态学鉴别的依据。其形状特征为：叶片卵形或椭圆形,先端急尖,钝头,基部圆形或楔形,长4-7cm,宽2-3cm,叶柄长1.5-3cm；生品上表面深绿色,下表面绿色；晒干品呈浅绿色;叶片近革质,纸质或薄革质,表面较光滑；气微香,味微苦。显微鉴别要点概括为：（1）横切面观：维管束外韧型,射线细胞、韧皮部细胞和侧脉维管束部位含较多的草酸钙柱晶或方晶；两面叶,栅栏组织与海绵组织的分化明显；（2）表面观：叶片表面光滑,气孔主分布于叶片下表皮,主为平轴式；有众多黄色非腺毛；（3）粉末：可见众多晶纤维及纤维,晶纤维有的呈分枝状；草酸钙柱晶及方晶多存在于薄壁组织细胞中,可见韧皮纤维和木纤维单个散在；非腺毛由两个细胞组成,靠近头部的细胞较短,较大的细胞颜色较深,壁疣明显；导管主为螺纹。3.2降香檀叶薄层鉴别按照2010版中国药典一部附录ⅥB薄层色谱法试验,以6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A为对照品,254nm紫外灯下,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,有相同颜色的斑点。3.3降香檀叶中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A的含量测定6-羟基-鹰嘴豆芽素A在浓度0.0017-0.1716u g范围内呈良好的线性关系（r=0.9995）,平均加样回收率为99.04%：鹰嘴豆芽素A分别在浓度0.0017-0.1740u g范围内呈良好的线性关系（r=0.9995）,平均加样回收率为99.02%。高州产降香檀叶6-羟基-鹰嘴豆芽素A含量范围为0.0411%～0.6659%,鹰嘴豆芽素A含量范围为0.0320%～0.3509%,江门、东莞、开平、海南等地产降香檀叶中6-羟基-鹰嘴豆芽素含量较高,其中开平产降香檀叶中含量可高达1.0392%。鹰嘴豆芽素A含量普遍较低,最高为东莞产降香檀叶,含量达0.4382%。而广州产降香檀叶中鹰嘴豆芽素A含量极低,难以检出。3.4降香檀叶黄酮类成分指纹图谱经相似度软件分析后确定15个共有峰为特征峰,构成降香檀叶药材HPLC指纹图谱,其中有两个特征峰得到确认,13号峰为6-羟基-鹰嘴豆芽素A,15号峰为鹰嘴豆芽素A。14批降香檀叶样品中有6批样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度在0.90以上,另有5批在0.80以上,其余样品相似度均在0.80以下。4.降香檀叶中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A提取纯化工艺最终确定工艺为50%乙醇提取,提取时间为60min,料液比为1：60,提取次数为3次。采用大孔树脂柱层析法结合溶剂法纯化6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A。5.降香檀不同部位质量比较将同一产地不同部位中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A含量进行比较,高州产降香檀花含量高于叶子；海南海口产降香檀不同部位含量高低依次为叶>枝>果实；江门产降香檀叶子含量高于枝；广州中医药大学产降香檀含量叶子高于果实；而市售降香檀心材中没有检测到6-羟基-鹰嘴豆芽素A,鹰嘴豆芽素A含量含量也较低。降香檀不同部位指纹图谱相似度较低,心材成分较其他部位差异较大,心材的色谱峰基本集中在30-50min,而叶子、枝、花、果实等部位的色谱峰分布较为均匀,并且从其指纹图谱色谱峰的紫外吸收光谱图可以看出,心材的成分与其他部位差异较大。在挑选共有峰时也发现心材与其他部位共有峰较少,只有6-羟基-鹰嘴豆芽素A较为明显。剔除心材后,将其他部位进行比较,结果发现果实相似度较低,其他部位相似度较高。结论：降香檀叶挥发油提取物高剂量、低剂量组能降低SHR大鼠收缩压,其血压差具有显着性意义,并且能降低SHR大鼠血清中Ang ⅡⅡET-1含量,其降血压机制可能是通过降低Ang Ⅱ、ET-1含量达到降低血压的效果。降香檀叶中含有氨基酸、蛋白质、有机酸、酚类、糖类、三萜类、黄酮类、挥发油等多类成分,其中黄酮类成分含量较为丰富,已分离得到两个含量较大的异黄酮：6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A,其中6-羟基-鹰嘴豆芽素A为首次从降香檀叶中分离得到。采用正交设计法优化降香檀叶中这两个成分的提取工艺,并且结合大孔树脂层析法、溶剂法对其进行纯化,工艺较为简单、稳定,有利于降香檀叶的综合利用开发。结合形状.与显微鉴别、薄层鉴别、含量测定、指纹图谱的现代分析手段,可建立降香檀叶的质量评价体系。对降香檀不同部位质量进行比较,降香檀不同部位中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A含量高低依次为花>叶>枝>果实、心材,果实中只含6-羟基-鹰嘴豆芽素A,而心材中只含鹰嘴豆芽素A。不同部位指纹图谱相似度较低,其中心材与果实成分差异较大,叶子、枝、花指纹图谱相似度较高,因而在进行叶子的综合开发利用时,也可以考虑对枝、花等部位进行开发利用,增强降香檀资源的可持续性利用。
王莲婧[10]（2012）在《化橘红抗氧化保健（功能）食品的研究》文中研究指明目的：针对我省道地药材化橘红-毛橘红富含黄酮类成分的特点,提取其有效部位,系统研制化橘红抗氧化保健食品,为该珍稀药材资源的开发利用奠定坚实的研究基础和科学依据。方法：采用PSC法进行不同配比的组方抗氧化性评价,采用Caco-2细胞模型考察柚皮素及配伍组方的转运机制,确定合理的处方配比组成及比例,进行组方优化设计。采用UPLC法同时测定化橘红中柚皮苷、野漆树苷、柚皮素和芹菜素等活性成分含量；采用保健食品法、铝盐络合法、SBC法三种方法进行总黄酮测定对比研究,确定总黄酮含量测定最优方法；采用HPLC法建立不同栽培品种化橘红色谱指纹图谱库；完善原料药的质量标准。采用Central Composite Design响应面试验进行总黄酮提取工艺研究,选取乙醇浓度、乙醇用量、pH值三个因素,以总黄酮得率和黄酮清除率为考察指标,确定化橘红总黄酮最佳提取工艺；采用Box-Behnken的中心试验设计进行响应面试验,选取酶用量、pH值、温度及时间四个因素,以脱苦率为考察指标,优化柚苷酶酶解工艺；采用旋转压片制粒机压片,采用Box-Behnken的中心试验设计原理,选取酸和碱的比例、甘露醇用量、PEG6000用量及PVP-K30浓度四个因素,以硬度、崩解时间为考察指标,优化泡腾片制备工艺,确定最佳工艺参数,制订工艺路线图。采用UPLC法快速测定化橘红维C泡腾片中柚皮素、芹菜素含量,采用薄层色谱法对化橘红维C泡腾片中柚皮素、芹菜素进行鉴别,采用国家颁布的保健食品检验指南中规定的总黄酮测定法测定化橘红维C泡腾片中总黄酮含量,照2010版《中国药典》中崩解度、重量差异等测定方法和要求,测定并建立化橘红维C泡腾片质量标准。根据2003年版《保健食品检验与评价技术规范》要求,开展抗氧化功能评价研究。采用溴代苯肝脂质过氧化小鼠动物模型,采用试剂盒法测定血和肝脏中过氧化脂质降解产物MDA、LPO含量、SOD、GSH-Px等抗氧化功能酶指标,初步评价本研究产品的抗氧化活性。结果1配方设计以柚皮苷、野漆树苷、柚皮素为代表的化橘红总黄酮作为功效成分实现抗氧化的功能；以维生素C、化橘红中特有的肌醇作为营养源补充维生素;采用独特先进的生物酶技术对化橘红提取物进行脱苦,以阿斯巴甜、甘露醇作为复合甜味剂,通过调节柠檬酸与碳酸氢钠的比率来控制pH值。以化橘红挥发油β-环糊精包合物作为赋香剂,以化橘红总黄酮粉末固有的棕黄色作为着色；柠檬酸-酒石酸,碳酸氢钠聚乙二醇包合物作为泡腾剂,以羧甲基淀粉钠作为泡腾片的崩解剂。按照科学理论有机结合,通过柚皮素的增效协同作用,以少量维生素C与柚皮素配比达到更好的抗氧化作用。采用先进的PSC法优化组方配比,结果最佳配比为脱苦总黄酮+维生素C=2：1时,PSC值相当于65.219μmol水溶性维生素E （Trolox）所表现出的抗氧性能力。采用Caco-2细胞模型证明与维生素C配伍,可以增加柚皮素的吸收,并减少其外排作用。2原料药质量标准研究2.1取样部位对有效成分的含量有一定的影响,其中对柚皮苷的影响较为有规律性,顶端采集部位的柚皮苷含量相对较高。不同化橘红（毛橘红）品种黄酮类含量有异,其中假西洋的柚皮苷含量较高,黄绒果的野漆树苷、柚皮素、芹菜素含量较高。2.2不同总黄酮测定方法对比结果显示,“铝盐络合法”测得值显着大于保健食品法和SBC法测得值。SBC方法是较为先进的国际公认的总黄酮测定方法,但由于反应过程步骤较多,该方法的稳定性还有待考察。保健食品法不需经显色直接测定,其结果准确、简便,测定方法较为合理,综合考虑,选用保健食品法测定化橘红中总黄酮含量。2.3建立了50批化橘红药材的指纹图谱库,采用相似度评价系统A版进行数据处理,不同栽培品种化橘红药材指纹图谱的相似度均高于0.93。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004B版”软件将各栽培品种对照图谱与50批化橘红指纹图谱进行相似度计算,以相似度最高者作为栽培品种判定结果。结果显示,除12、32、33、34号误判外,其余46批化橘红均可通过相似度判别出栽培品种,判定成功率达92%。3泡腾片制备工艺研究3.1化橘红总黄酮提取工艺：采用响应面试验法对化橘红总黄酮提取工艺进行了进一步优化,其最佳工艺为：取化橘红粗颗粒,第一次加25倍水,浸泡0.5小时后,煮沸2小时,滤过,药渣第二次加20倍水,煮沸1.5小时,滤过,合并滤液。浓缩至1g/mL,缓缓加入95%乙醇,边加边搅拌,使其含醇量达到78.5%,继续加入适量一定浓度乙醇使其达到生药量的8倍量,用40%NaOH调节pH值至7.0,搅拌15分钟后,滤过,滤渣用适量一定浓度乙醇分次洗涤,并入滤液,回收乙醇,浓缩至1g/mL,加入适量蒸馏水使其浓度为0.6g/mL,5mol/L盐酸调pH至1.3,冷藏,一定时间后取出,滤过,沉淀用适量蒸馏水洗涤,60℃干燥,粉碎,过筛,得化橘红总黄酮粉末。3.2化橘红总黄酮脱苦工艺：根据响应面优化试验结果,化橘红总黄酮最佳脱苦条件为当柚苷酶用量1.6U/mL、酶解温度54℃、酶解时间132分钟时,脱苦率达到98.88%。3.3泡腾片制备工艺：优选出的结果为：取化橘红提取物,加入甘露醇制成药材软材,过24目筛；柠檬酸14份、酒石酸7份、羧甲基淀粉钠2.6份、维生素C3.4份、阿斯巴甜0.3份与甘露醇6份制成酸系统软材,过24目筛；碳酸氢钠17.5份、聚乙二醇-60002份制成碱系统软材,过24目筛；将三种软材分别制粒、烘干、混合整粒,在温度25℃、湿度30%条件下,以旋转式压片机压制成片。4泡腾片质量标准研究薄层鉴别显示,化橘红维C泡腾片在紫外灯（365nm）下检视,与柚皮素、芹菜素对照品Rf值相同位置均有显相同颜色的荧光斑点。泡腾片的片重差异在-3.91%～3.89%之间,符合药典规定的±5%限度,片重差异检查合格。4批泡腾片的崩解时限均符合药典规定5分钟以内崩解完全的的要求,本片剂崩解时限检查合格。根据UPLC法测定4批泡腾片制剂中柚皮素含量的结果,其柚皮素含量应为5.4±0.5mg/片；采用国家颁布的保健食品检验指南中规定的总黄酮测定法测定泡腾片中总黄酮含量,其总黄酮平均含量为14.13%。5抗氧化功能评价DPPH法体外评价抗氧化性结果表明,优化工艺中化橘红提取物抗氧化活性清除自由基的能力（抑制率高达26.24%）显着高于优化前的化橘红提取物（抑制率为16.13%）。灌胃化橘红维C泡腾片45d后,小鼠血中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）舌力结果表明,在高剂量组与阳性对照组中,与正常对照组SOD活性差异具有显着性（P<0.05）,与正常对照组GSH-Px活性差异具有显着性（P<0.01）；在中剂量、低剂量组中,与正常对照组GSH-Px活性差异具有显着性（P<0.05）。灌胃溴代苯油造模后,小鼠肝脏中MDA、LPO含量较正常对照组分别增加0.73±0.22nmol/mL、0.68±0.31μmol/gprot,其差异具有极显着性（P<0.01）。与模型组相比,高剂量组可有效抑制溴代苯引起的肝脂质过氧化,使MDA、LPO含量降低,其差异具有极显着性（P<0.01）,中剂量与低剂量组可降低LPO含量,其差异具有极显着性（P<0.01）；同时,中剂量组的SOD活性与模型组对比具有显着性差异（P<0.05）,高剂量组和中剂量组GSH-Px活性,与模型组对比具有极显着性差异（P<0.01）,说明适量的化橘红维C泡腾片有助于增强小鼠机体清除自由基的能力,具有一定的抗氧化作用。结论：1经过科学配方配伍后的保健食品组方科学合理,立项依据符合现代医学理论和中医传统养生理论,预期达到的保健功能具有科学性。2从原药材、提取物到泡腾片制剂进行多方位的质量控制,外观性状、薄层色谱、崩解时限及有效成分含量测定等质控指标的综合应用,可有效保证所研发的产品的质量控制水平。3首次使用酶法对化橘红提取物进行脱苦工艺研究,所获得的化橘红提取物显着改善了传统化橘红提取物甚苦的口感,并能增强其抗氧化功效,可应用于化橘红食品和保健食品制备。所选用的泡腾片剂型,具有口感清凉、崩解迅速,服用方便,便于保存和携带的特点。所研产品是一种效果确切、富具特色的化橘红保健食品。4制定化橘红维C泡腾片质量标准为具体数据,该标准可以有效地控制该泡腾片的质量。5化橘红维C泡腾片能有效抑制溴代苯导致的肝脂质过氧化,使小鼠血清、肝脏中SOD和GSH-Px活力明显升高,肝脏中MDA、LPO含量显着降低,提示合理服用化橘红维C泡腾片,增强清除自由基的能力,具有良好的抗氧化作用。
二、毛橘红与光橘红的紫外光谱和薄层色谱指纹图谱研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、毛橘红与光橘红的紫外光谱和薄层色谱指纹图谱研究（论文提纲范文）
（2）基于分子标记对化州柚及其近缘品系的分类鉴别研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表(Abbreviation) |
| 引言 |
| 第1章 文献研究 |
| 1.1 化橘红基原植物的概况 |
| 1.1.1 化橘红的用药历史沿革 |
| 1.1.2 化橘红的质量研究 |
| 1.2 化橘红的鉴别研究 |
| 1.2.1 毛橘红与光橘红的鉴别研究 |
| 1.2.2 毛橘红的品系鉴别研究 |
| 1.3 分子标记的研究进展 |
| 1.3.1 DNA条形码标记 |
| 1.3.2 SCoT分子标记 |
| 1.3.3 SRAP分子标记 |
| 1.3.4 SCAR标记 |
| 1.3.5 分子标记技术在化橘红种质资源研究中的应用 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 化州柚及其近缘品系的DNA条形码研究 |
| 2.1 材料与试剂 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验仪器和试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 DNA提取及检测 |
| 2.2.2 PCR扩增 |
| 2.2.3 电泳检测及测序 |
| 2.2.4 数据处理 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 总DNA提取质量 |
| 2.3.2 PCR扩增结果 |
| 2.3.3 序列分析 |
| 2.3.4 ITS2序列的聚类分析 |
| 2.3.5 psbA-trnH序列的聚类分析 |
| 2.3.6 ITS2结合psbA-trnH序列的聚类分析 |
| 2.4 小结与讨论 |
| 第3章 化州柚及其近缘品系的SCOT分子标记研究 |
| 3.1 材料与试剂 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 仪器和试剂 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 总DNA提取与检测 |
| 3.2.2 SCoT-PCR反应体系正交设计 |
| 3.2.3 SCoT-PCR反应体系的单因素优化 |
| 3.2.4 PCR扩增及电泳检测 |
| 3.2.5 引物筛选及退火温度优化 |
| 3.2.6 数据分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 DNA提取结果 |
| 3.3.2 SCoT-PCR正交设计结果 |
| 3.3.3 SCoT-PCR反应体系的单因素优化 |
| 3.3.4 引物筛选及退火温度优化 |
| 3.3.5 SCoT标记的多态性分析 |
| 3.3.6 SCoT标记的聚类分析 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 化州柚及其近缘品系的SRAP标记研究 |
| 4.1 材料与试剂 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 仪器和试剂 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 总DNA提取与检测 |
| 4.2.2 SCoT-PCR反应体系正交设计 |
| 4.2.3 PCR扩增及电泳检测 |
| 4.2.4 引物筛选及退火温度优化 |
| 4.2.5 SRAP多态引物筛选及退火温度优化 |
| 4.2.6 数据分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 DNA提取结果 |
| 4.3.2 SRAP-PCR正交设计结果 |
| 4.3.3 SRAP-PCR反应体系的单因素优化 |
| 4.3.4 引物筛选 |
| 4.3.5 SRAP多态性引物筛选及退火温度优化 |
| 4.3.6 SRAP标记的多态性分析 |
| 4.3.7 SRAP标记的遗传相似性分析 |
| 4.3.8 SRAP标记的聚类分析 |
| 4.3.9 SCoT标记结合SRAP标记的聚类分析 |
| 4.3.10 SCoT、SRAP、SCoT+SRAP标记的相关性分析 |
| 4.4 小结与分析 |
| 第5章 化州柚及其近缘品系的SCAR标记研究 |
| 5.1 材料和仪器 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 仪器和试剂 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 特异性条带筛选 |
| 5.2.2 特异性条带的回收、克隆及测序 |
| 5.2.3 SCAR引物的设计 |
| 5.2.4 SCAR引物的验证 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 特异性条带筛选 |
| 5.3.2 特异性条带的回收 |
| 5.3.3 SCAR引物的验证 |
| 5.4 小结 |
| 第6章 总结与讨论 |
| 6.1 总结 |
| 6.2 讨论 |
| 6.2.1 化州柚及其近缘品系的鉴别 |
| 6.2.2 不同品系化州柚的分类和鉴别 |
| 6.2.3 四种标记在化州柚及其近缘品系植物中的研究情况 |
| 6.2.4 SCAR标记的转化 |
| 6.3 本文的不足之处及展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（3）基于回乳与消食作用的麦芽炮制工艺及芽长研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 麦芽发芽炮制工艺研究 |
| 1 浸泡时间、溶剂及环境温湿度对麦芽质量影响 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.3 讨论 |
| 2 干燥温度及方式对麦芽质量影响 |
| 2.1 仪器与试药 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.3 .讨论 |
| 第二章 麦芽甲醇提取物HPLC指纹图谱特征及药效物质含量测定 |
| 1 麦芽及其不同炮制品HPLC指纹图谱比较 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.3 .讨论 |
| 2 发芽炮制过程中HPLC指纹图谱及生物碱含量变化规律 |
| 2.1 仪器与试药 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 不同芽长麦芽对高泌乳素血症模型大鼠的影响 |
| 1 对模型大鼠体内血清激素含量影响 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果与分析 |
| 1.4 讨论 |
| 2 对模型大鼠脑垂体泌乳素细胞阳性反应及mRNA表达影响 |
| 2.1 仪器与试药 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.4 讨论 |
| 3 对模型大鼠下丘脑多巴胺D1、D2受体影响 |
| 3.1 仪器与试药 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 不同芽长麦芽消食作用比较 |
| 1 不同芽长麦芽中淀粉酶活力比较 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果与分析 |
| 2 对小鼠小肠推进及胃排空影响 |
| 2.1 仪器与试药 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.4 讨论 |
| 讨论 |
| 结语与创新 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录一 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录二 实验相关公式及图片 |
| 附录三 在校期间发表论文与参与课题 |
| 致谢 |
（4）基于一测多评法对毛橘红与光橘红的质量比较研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1 本草学研究 |
| 2 化学成分研究 |
| 3 毛橘红与光橘红药材规格现状 |
| 4 指纹图谱的研究进展 |
| 5 一测多评法的研究进展 |
| 6 评价与思路 |
| 第二章 用于一测多评法的化橘红药材的质量控制 |
| 1 仪器、试剂与样品 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 水分、总灰分、浸出物含量测定 |
| 2.2 性状、显微鉴别 |
| 2.3 薄层鉴别 |
| 2.4 毛橘红与光橘红HPLC指纹图谱的建立 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三章 毛橘红与光橘红5种黄酮类成分一测多评法的建立 |
| 1 一测多评法的原理 |
| 2 仪器、试剂与样品 |
| 3 方法与结果 |
| 3.1 建立HPLC法同时测定化橘红5种黄酮类成分 |
| 3.2 相对校正因子的建立 |
| 3.3 系统适用性考察 |
| 3.4 一测多评法的验证 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第四章 基于一测多评法比较毛橘红与光橘红药材质量 |
| 1 仪器、试剂与样品 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 色谱条件 |
| 2.2 对照品溶液的制备 |
| 2.3 供试品溶液的制备 |
| 2.4 标准曲线的制备 |
| 2.5 一测多评法比较毛橘红与光橘红5种黄酮成分 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 化橘红质量标准(草案) |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 统计学审核证明 |
（5）指纹图谱在中药质量控制方面的研究现状（论文提纲范文）
| 1 中药指纹图谱的建立 |
| 2 中药指纹图谱的研究现状 |
| 2.1 薄层色谱 (TLC) 指纹图谱 |
| 2.2 高效液相色谱 (HPLC) 指纹图谱 |
| 2.3 气相色谱 (GC) 指纹图谱 |
| 2.4 X射线衍射指纹图谱 |
| 2.5 核磁共振 (NMR) 指纹图谱 |
| 2.6 傅里叶红外色谱 (FTIR) 指纹图谱 |
| 2.7 紫外光谱 (UV) 指纹图谱 |
| 2.8 色谱联用指纹图谱 |
| 2.9 DNA指纹图谱 |
| 3 结语 |
（6）NIRS结合化学计量学在布渣叶质量评价中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 中药质量控制的概述 |
| 1.2 IRS在中药质量分析中的应用 |
| 1.3 化学计量学在中药中的研究概况 |
| 1.4 布渣叶的质量分析研究概况 |
| 第二章 布渣叶黄酮成分的HPLC分析 |
| 2.1 仪器与材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 材料 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.2.1 色谱条件 |
| 2.2.2 对照品溶液的制备 |
| 2.2.3 供试品溶液的制备 |
| 2.2.4 测定法 |
| 2.2.5 线性关系考察 |
| 2.2.6 精密度试验 |
| 2.2.7 稳定性试验 |
| 2.2.8 重复性试验 |
| 2.2.9 加样回收率试验 |
| 2.2.10 样品的测定结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 含量测定提取方法的优选 |
| 2.3.2 含量测定检测条件的优选 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 NIRS结合化学计量学对布渣叶黄酮成分的分析 |
| 3.1 仪器与材料 |
| 3.1.1 仪器 |
| 3.1.2 材料 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.2.1 近红外光谱的采集 |
| 3.2.2 校正集和验证集样品的选择 |
| 3.2.3 建模方法 |
| 3.2.4 光谱数据预处理 |
| 3.2.5 建模波段的选择 |
| 3.2.6 校正模型的建立 |
| 3.2.7 样品快速测定 |
| 3.3 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（7）广东化州橘红（Exocarpium Citri Grandis）的研究现状（论文提纲范文）
| 1 化州橘红的品种分类 |
| 2 化州橘红有效化学成分的提取 |
| 2.1 黄酮类化合物的提取 |
| 2.2 挥发油的提取 |
| 2.3 香豆素类化合物的提取 |
| 2.4 多糖的提取 |
| 2.5 肌醇的提取 |
| 2.6 影响有效成分形成的因素 |
| 3 化州橘红的化学成分检测与品质鉴别 |
| 4 药理及临床研究 |
| 5 化州橘红分子水平的多样性研究 |
| 6 化州橘红组织培养的研究 |
| 7 化州橘红的栽培与管理 |
| 8 化州橘红研究存在的问题与讨论 |
| 9 展望 |
（8）波棱瓜子药材质量标准研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 中药质量标准的研究方法 |
| 1.1.1 中药质量标准现状 |
| 1.1.2 中药指纹图谱在药品质量控制中的应用 |
| 1.1.3 一测多评法在中药质量标准中的应用 |
| 1.1.4 展望 |
| 第二章 绪论 |
| 第三章 波棱瓜药材检查 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 仪器与试剂 |
| 3.1.2 实验材料 |
| 3.1.3 实验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 总灰分检查 |
| 3.2.2 水分检查 |
| 3.2.3 醇溶性浸出物检查 |
| 3.2.4 重金属检查 |
| 3.2.5 化学成分检查 |
| 3.3 小结 |
| 第四章 波棱瓜子药材薄层鉴别及HPLC指纹图谱研究 |
| 4.1 实验部分 |
| 4.1.1 仪器与试剂 |
| 4.1.2 实验材料 |
| 4.1.3 实验方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 薄层鉴别 |
| 4.2.2 HPLC指纹图谱 |
| 4.3 讨论与小结 |
| 4.3.1 讨论 |
| 4.3.2 小结 |
| 第五章 “一测多评”法测定波棱瓜子有效成分含量 |
| 5.1 实验部分 |
| 5.1.1 仪器与试剂 |
| 5.1.2 实验材料 |
| 5.1.3 实验方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 标准曲线建立 |
| 5.2.2 以化合物Ⅰ为内标测定化合物Ⅱ含量 |
| 5.2.3 方法学考察 |
| 5.2.4 含量测定测定结果 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 提取溶剂的选择 |
| 5.3.2 流动相体系的选择 |
| 5.3.3 对照品的选择 |
| 5.3.4 最佳波长的选择 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）降香檀叶质量评价和综合利用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 降香檀及其叶子研究进展 |
| 第二节 中药入药部位的研究 |
| 第三节 异黄酮研究进展 |
| 第四节 中药指纹图谱技术与应用研究进展 |
| 第五节 降血压药物的研究 |
| 第二章 降香檀叶挥发性成分降血压药效研究 |
| 第三章 降香檀叶化学成分研究 |
| 第一节 降香檀叶化学成分预试 |
| 第二节 降香檀叶化学成分分离 |
| 第四章 降香檀叶质量评价 |
| 第一节 降香檀叶形状与显微鉴别 |
| 第二节 降香檀叶薄层鉴别 |
| 第三节 HPLC法同时测定降香檀叶中鹰嘴豆芽素A和6-羟基-鹰嘴豆芽素A的含量 |
| 第四节 降香檀叶黄酮类成分HPLC指纹图谱研究 |
| 第五章 降香檀叶中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A提取纯化工艺研究 |
| 第一节 正交设计优选降香檀6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A的提取工艺 |
| 第二节 降香檀叶中6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A纯化工艺研究 |
| 第六章 降香檀不同部位质量比较 |
| 第一节 降香檀不同部位6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A含量的比较 |
| 第二节 降香檀不同部位指纹图谱比较研究 |
| 第六章 结语 |
| 第一节 讨论 |
| 第二节 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（10）化橘红抗氧化保健（功能）食品的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 化橘红研究综述 |
| 1 文献研究 |
| 2 鉴定研究 |
| 3 化学成分 |
| 4 药理作用 |
| 5 化橘红制剂及其质量评价研究 |
| 第二节 指纹图谱研究进展 |
| 1 薄层色谱法(TLC) |
| 2 气相色谱法(GC) |
| 3 高效液相色谱法(HPLC) |
| 4 高效毛细管电泳法(HPCE) |
| 5 高速逆流色谱(HSCCC) |
| 6 紫外-可见光谱法(UV-VIS) |
| 7 红外光谱法(IR) |
| 8 核磁共振波谱法(NMR) |
| 第三节 抗氧化研究进展 |
| 1 中药抗氧化作用的可能机理 |
| 2 中药抗氧化活性的评价方法 |
| 第四节 抗氧化保健食品研究进展 |
| 第五节 泡腾片研究进展 |
| 1 泡腾片特点 |
| 2 泡腾片崩解原理 |
| 3 处方设计 |
| 4 制备工艺及制备过程应注意的事项 |
| 第六节 研究思路与技术路线 |
| 1 研究思路 |
| 2 拟定的技术路线 |
| 第二章 配方设计研究 |
| 第一节 配方依据 |
| 第二节 PSC法优化配方配比 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三节 Caco-2细胞模型的柚皮素转运研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 第三章 原料药质量标准研究 |
| 第一节 化橘红中柚皮苷、柚皮素等有效成分测定 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 第二节 毛橘红指纹图谱库的建立 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章 泡腾片制备工艺优化研究 |
| 第一节 响应面法优化毛橘红总黄酮提取工艺 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 第二节 化橘红提取物中总黄酮测定方法比较研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 第三节 柚苷酶脱苦工艺考察 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 第四节 泡腾片制备工艺研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 第五章 产品质量标准研究 |
| 第一节 化橘红维C泡腾片质量标准 |
| 第二节 泡腾片标准起草说明 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第六章 产品功能学评价 |
| 第一节 体外抗氧化评价 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 第二节 化橘红维C泡腾片对小鼠抗氧化作用的研究 |
| 1 仪器与试药 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
四、毛橘红与光橘红的紫外光谱和薄层色谱指纹图谱研究（论文参考文献）
- [1]基于壮药材鉴别方法的比较研究[J]. 李鹏,李平凤,樊柳园,朱华. 壮瑶药研究季刊, 2018(02)
- [2]基于分子标记对化州柚及其近缘品系的分类鉴别研究[D]. 王浩涵. 广州中医药大学, 2018(02)
- [3]基于回乳与消食作用的麦芽炮制工艺及芽长研究[D]. 何晶. 湖北中医药大学, 2018(11)
- [4]基于一测多评法对毛橘红与光橘红的质量比较研究[D]. 李宇邦. 广州中医药大学, 2017(02)
- [5]指纹图谱在中药质量控制方面的研究现状[J]. 张赟赟. 中国民族民间医药, 2016(20)
- [6]NIRS结合化学计量学在布渣叶质量评价中的应用研究[D]. 张岳. 广州中医药大学, 2014(01)
- [7]广东化州橘红（Exocarpium Citri Grandis）的研究现状[J]. 贾贤,陈雄庭,彭明,王颖,吴坤鑫. 中国园艺文摘, 2013(10)
- [8]波棱瓜子药材质量标准研究[D]. 王佩龙. 西南大学, 2013(01)
- [9]降香檀叶质量评价和综合利用研究[D]. 庄满贤. 广州中医药大学, 2012(03)
- [10]化橘红抗氧化保健（功能）食品的研究[D]. 王莲婧. 广州中医药大学, 2012(03)