小鼠基因型鉴定调研报告

小鼠基因型鉴定调研报告

问:鼠尾基因型鉴定原理
  1. 答:鉴定原理如下:
    利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,亮尘以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳对比不同基因型特异产物的大小(一般差异在100bp以上),根据电泳条带差异来直接区分小鼠的不同基因型。
    对小鼠进行基因型鉴定是实验动物敬辩禅中心表型分析平台提供的常规服务,灶前在动物实验研究中也是不可或缺的一环。
问:研究小组从小鼠血管内皮细胞分离到一个新基因,请设计一个研究方案对该基因进行定性、定量以及定位分析。
  1. 答:1)首先确认这是一个真正的基因,然后克隆到带标签的真核表达载体,则链转染细胞,检测蛋白的表达。同时注意观察对细胞增殖啦形态啦有没有什么影响,这个可能性不是很大,但注意细节。
    2)同时用这个序列在NCBI做blast,找其同源序列,有没有序列类似,可能是同一蛋白家族成员的。寻找其在其他物种中有没同源序列,功能是否已知。这些可以作为功能研究提示。
    3)设计其RNAi片段,做基因敲除,看敲除后老鼠有没有表型,如果有,是非常非常重要的功能提示。
    4)如果实在没有得到什么者凯线索,可以选择做酵母首盯唤双杂交,筛选其相互作用蛋白,看它是不是通过跟功能已知的蛋白互作来调控细胞功能的,这是研究新基因的非常重要的方法。
    总之,找到一个新基因就像认识一个新人,先确认他是个人,然后找跟他相似的,亲戚,兄弟姐妹。然后看他的工作是什么,把他去掉,哪个环节会出现问题。然后找他的一帮朋友,很可能他的朋友是已知的,那么看他和朋友之间的联系。
问:关于遗传工程小鼠表型分析。高分~!
  1. 答:对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代谢指标测定及病理组织学检查。例如基因RIG-Ⅰ在小鼠多种组织中广泛表达,但表达水平存在一定差异。RIG-Ⅰ基因剔除后,小鼠未见明显发育异常;无明显预期的粒系分化受阻表现;但RIG-Ⅰ基因剔除小鼠外周血相中的粒/淋比明显倒置,且对条件性致病菌易感。所以说RIG-Ⅰ在小鼠抗细菌免疫过程中具有重要作用。
小鼠基因型鉴定调研报告
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