一、鸡败血霉形体致病性研究（论文文献综述）
夏新萌,范书金,刘承军[1]（2020）在《鸡毒霉形体病的分析》文中指出鸡毒霉形体是引起鸡的慢性呼吸道病的主要病原菌之一。一旦感染即给家禽养殖业造成很大损失。本文通过对临床实践过程中病例,对鸡毒霉形体的生物学特征、致病性和致病机制、病理变化等总结分析,为家禽养殖者临床预防治疗鸡毒霉形体病提供参考。
李桂松,刘汉章[2]（2016）在《冬春季节引起鸡群呼吸道症状的几种疾病的鉴别诊治》文中研究说明通过这几年的临床诊治发现引起鸡群呼吸道症状的疾病主要有:低致病性禽流感、新城疫、鸡传染性喉气管炎、鸡传染性支气管炎、鸡传染性鼻炎、鸡败血霉形体、曲霉菌病。由于这几种病都有呼吸道症状,为了对症施治,必须对这几种病进行鉴别诊断。
陈美安[3]（2014）在《抗畜禽支原体中药复方肺康明颗粒剂的研制及其化学成分研究》文中进行了进一步梳理支原体导致的猪支原体肺炎、鸡毒支原体病、牛传染性胸膜肺炎和山羊传染性胸膜肺炎给养殖业带来严重的经济损失。由于目前支原体疫苗的免疫接种效果欠佳,兽医临床常用的泰乐菌素等抗菌药物耐药性严重和药物残留问题被普遍关注,急需开发廉价、高效、广谱、无毒的中药复方抗畜禽支原体制剂。为进一步研制抗畜禽支原体中药复方,本课题在前期工作基础上选取南药两面针、广藿香、南板蓝根、黄连、黄芩、黄柏、甘草、白鲜皮、土槿皮、艾叶等10味中药,通过体外微量药敏试验,结合中兽医理论基础和中药药剂学理论,筛选出有效的抗畜禽支原体单味中药及最佳中药复方,通过药效学试验评价最佳中药复方的安全性和临床疗效,并将其制成中药复方颗粒剂,同时对该复方颗粒剂进行质量标准、初步稳定性及其化学成分研究。具体研究方法与结果如下。1抗畜禽支原体中药复方肺康明确立采用水回流提取法和微量液体稀释法,对两面针、广藿香、南板蓝根、黄连、黄芩、黄柏、甘草、白鲜皮、土槿皮、艾叶等10味中药进行体外抗畜禽支原体研究。结果表明10味中药中,除了广藿香、土槿皮和艾叶外,其余7味中药对3种畜禽支原体均具有不同程度的体外抑制和杀灭作用；对照药物酒石酸泰乐菌素对试验用3种畜禽支原体均具有较高的敏感性。对有效的抗畜禽支原体单味中药进行两两联合药物敏感性试验,结果表明7味中药水提液两两配伍组合,对牛支原体、鸡毒支原体和羊肺炎支原体的抑制效果表明两面针、南板蓝根、黄连、黄芩、黄柏、甘草、白鲜皮间均无拮抗作用,宜配伍。在中医理论的指导下,根据中医方剂组成原则及配伍规律,自拟7组中药复方,通过药敏试验研究表明原复方和7组中药复方均具有不同程度的抗畜禽支原体活性,其中复方5（南板蓝根、两面针、白鲜皮）作用最好,且药味较少,故选用复方5作为抗畜禽支原体最佳中药复方,命名为肺康明。2中药复方肺康明药效学研究对健康雏鸡进行临床用药安全性研究,结果表明中药复方肺康明以16g生药/d兑水饮用5d,鸡只内脏各器官无任何异常,提示该方此剂量对鸡安全。采用1×109CCU/mL的MG培养物通过鸡胸气囊接种0.5mL、滴鼻0.3mL、点眼0.2mL,以及创造应激条件建立人工感染鸡毒支原体鸡只模型,并通过临床症状、病理观察、分离培养、鉴定及血清学诊断,证实了该疾病模型建立成功。临床药效试验结果表明肺康明高、中剂量组治疗MG人工感染病鸡疗效显着。死亡率方面,与感染对照组比较,各用药组均有不同程度的下降；肺康明高、中剂量和酒石酸泰乐菌素组死亡率均为0%,肺康明低剂量组和预防组死亡率很低,分别为5.00%、2.50%。治愈率方面,肺康明高剂量组疗效最好（92.5%）,明显优于低剂量组,中剂量组与对照药物酒石酸泰乐菌素组具有相同的疗效（90%）；增重方面,各用药组均显着高于感染对照组,但低于正常对照组,而肺康明高剂量组与正常对照组相当；料肉比方面,酒石酸泰乐菌素组最低,其他各用药组与健康组相当,感染对照组最高；血清抗体水平方面,各用药组均能明显减少抗体阳性反应数,其中肺康明高剂量组效果最佳；气囊损伤方面,各用药组气囊病变较感染对照组轻,其中肺康明高剂量组效果最好,其次为复方肺康明中剂量组和酒石酸泰乐菌素组。提示本复方对MG感染具有良好的治疗效果,并克服抗生素类药物长期使用会产生耐药性的缺点,可用于本病的防治。推荐肺康明用于MG鸡只的治疗量为0.4%兑水饮用给药浓度,预防量为0.2%兑水饮用给药浓度,连续用药5d,每天配换一次药液。3中药复方肺康明颗粒剂制备工艺研究根据临床需要、预试验结果、生产条件及技术水平,选择剂型为颗粒剂。本试验主要以多成分多指标综合评价,采用正交试验设计和单因素考察法进行最佳制备工艺筛选,最终确定中药复方肺康明颗粒剂的制备工艺为：取处方比例南板蓝根、两面针、白鲜皮粗粉（10目）,精密称定,加入12倍量的水,浸泡0.5h,回流提取3次,每次1.5h,合并3次提取液,超速离心（8000r/min,15min）后,真空减压（温度60℃,真空度0.08～0.10MPaa,蒸汽压力≤0.10MPa）浓缩至相对密度为1.10（60℃）的流浸膏；取该流浸膏进行喷雾干燥,物料温度：50～60℃,进液速度：50～60mL/min,进风温度：165～170℃,出风温度：70～75℃,收集干燥浸膏粉,按干浸膏粉：糊精=1：0.6混匀,过80目筛,采用干式制粒法,设定轧辊压力为60～70kgf/cm2,轧辊转速为12～14r/min,送粉速度为14～16r/min制成颗粒1200g,过筛,分装,即得。同时经三批中试试制证明,拟定工艺简单合理、稳定可行,可满足工业化大生产的要求。4中药复方肺康明颗粒剂质量标准及初步稳定性研究质量标准研究方面,主要进行原料药材及辅料质量标准和颗粒剂质量标准研究。原料药材及辅料质量标准中主要对投料药材饮片按照《中华人民共和国药典》2010年版（一部）相关项下规定进行检查；辅料—糊精按照《中华人民共和国药典》2010年版（二部）相关项下规定进行检查。颗粒剂质量标准中对中试生产的三批样品进行鉴别、检查和含量测定研究。对方中各味药均进行了薄层色谱鉴别试验,并将南板蓝根、两面针、白鲜皮的薄层色谱鉴别列入本品质量标准正文。检查项下,对粒度、水分、溶化性、装量差异、重金属、砷盐、微生物限度等进行检查均符合《中国药典》2010年版一部附录制剂通则I C颗粒剂项下有关规定,并将其列入本品质量标准正文。采用高效液相色谱法对主要有效成分靛蓝、氯化两面针碱和白鲜碱进行含量测定,并进行了系统方法学考察,均符合要求,并将含量测定列入本品质量标准正文,根据多批样品测定结果,制定了主要有效成分的含量限度,暂定本品每袋（5.0g）含南板蓝根以靛蓝计,不得低于773.08μg；两面针以氯化两面针碱计,不得低于846.84μg；白鲜皮以白鲜碱计,不得低于3301.67μg。初步稳定性研究方面,加速稳定性试验结果表明样品采用铝塑复合膜袋为包装材料在考察期内其性状、鉴别、检查等各项考察指标均符合本品质量标准草案规定,提示本品在高温高湿条件下贮存6个月,可保证质量稳定。长期稳定试验结果表明9个月的考察期内其性状、鉴别、检查等各项考察指标均符合本品质量标准的规定,提示本品在常温条件下保存9个月,可保证质量稳定；试验结束时间为24月末,其后续工作仍在进行当中。5中药复方肺康明化学成分研究按处方量的200倍称取南板蓝根、两面针、白鲜皮粗粉,以水回流提取,提取液经减压浓缩和喷雾干燥后,依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行部位分离后,采用反复硅胶柱色谱及重结晶等方法进行系统的化学成分分离与纯化,并根据理化常数测定和光谱测定（EI-MS或EIS-MS、1H-NMR、13C-NMR、Dept等）所得数据以及文献对照确定了21单体化合物的结构,分别为：氯化两面针碱（nitidine chloride,1）,大黄酚（chrysophanic acid,2）,熊果酸（ursolic acid,3）,靛蓝（indigotin,4）,靛玉红（indirubin,5）,硬脂酸（stearic acid,6）,辛夷脂素（fargesin,7）,补骨脂内酯（psoralen,8）,木犀草素（luteolin,9）,香草醛（vanillin,10）,棕榈酸（palmitic acid,11）,大黄素-8-0-β-D-吡喃葡萄糖苷（emodin-8-O-β-D-glucopyranoside,12）,槲皮苷（quercetin-3-rhamnoside,13）,棒酮（fraxinellone,14）,黄柏酮（obacunone,15）,柠檬酸（citric acid,16）,白屈菜碱（chelidonine,17）,腺苷（adenosine,18）,胞苷（cytidine,20）,黄芩苷（baicah,20）,苯甲酸（benzoicacid,21）。其中化合物3、7、10-13、16-17、19～21均首次在组成肺康明的3味中药南板蓝根、两面针和白鲜皮中发现。综上所述,本课题通过体外抑菌试验对10味中药进行筛选,确定了最佳中药复方,命名肺康明,对MG感染具有良好的治疗效果,使用安全。对该方进行颗粒剂制备工艺研究,其工艺简单合理、稳定可行,可满足工业化大生产的要求。其制剂基本稳定,安全性高,质量标准稳定、可控。同时从该方氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中共分离鉴定了21个化合物,其中11个化合物均首次在组成中药复方肺康明的3味中药南板蓝根、两面针和白鲜皮中分得。本课题为新兽药的研发及广泛应用中药防治临床畜禽支原体病提供了科学依据。
周国威[4]（2012）在《鸡败血霉形体感染的诊治》文中研究指明鸡败血霉形体感染通称为慢性呼吸道病和火鸡传染性窦炎,是当前影响禽类生产的常见疾病之一。本病发展慢,病程长,有的成隐性感染,可在鸡群中长期蔓延,尤其是气候多变的季节;本病死亡率低,但患鸡生长缓慢、产蛋下降,往往给养禽业带来巨大的经济损失。2011年5月在本溪市一鸡场发生鸡败血霉形体感
李红萍,邹勇,帅华平[5]（2009）在《鸡霉形体病的诊治》文中认为1病原引起鸡霉形体病的病原体,是一种介于病毒与细菌之间的微生物,叫败血霉形体,也称支原体、鸡毒霉浆体,姬姆萨染色良好,革兰氏染色呈弱阴性。由于它没有僵硬的细胞壁,而有较韧的细胞膜,因
刘国信[6]（2007）在《如何防治鸡败血霉形体病》文中认为近年来,随着规模化养禽业的发展,禽类的霉形体病的危害性逐渐显露,引起了人们的重视。禽类的霉形体到目前已鉴定出十几种,其中对家禽有严重致病作用的有鸡的败血霉形体和滑液霉形体等。鸡败血霉形体病,又称慢性呼吸道病
胡思顺[7]（2005）在《禽流感病毒H9N2亚型和鸡毒霉形体HS株主要抗原性基因的克隆与表达研究》文中认为禽流感病毒（AIV）和鸡毒霉形体（MG）是危害世界养禽业的主要病原,对世界养禽业造成了巨大的经济损失。近年来,禽流感在我国开始流行,特别是2004年初高致病性禽流感在我国和部分亚洲国家爆发流行,不仅造成了养禽业的巨大经济损失,而且导致人类的感染和死亡,引起了世界各国政府和普通民众的高度重视。另外,鸡毒霉形体是所有禽类呼吸道感染中的最基础的病原之一,在鸡群中感染普遍,血清学阳性率高,可经蛋传播,而且经常与其他呼吸道疾病混合感染,给畜牧业生产造成了极大的经济损失。为了养禽业的稳定发展和人类健康,必须加强这两种疾病病原的主要抗原基因的分子生物学研究,为最终控制和消灭这两种疾病打下良好的基础。 本研究首先进行了禽流感病毒核蛋白（NP）、血凝素蛋白（HA）基因的克隆与表达研究。（1）:采用RT-PCR方法,以AIV A/chicken/China/HSS2004（H9N2）株为材料,获得了NP基因的全长cDNA和HA基因的部分cDNA。（2）:将获得的cDNA克隆入pMD18-T载体进行序列测定,测得NP基因cDNA序列长度为1525bp;HA基因cDNA序列长度为1172bp,HA切割位点附近的氨基酸组成分别是:R-S-SR↓G,切割位点附近氨基酸残基的这种组成符合低致病力毒株的分子特征。（3）:与Genebank中基因序列的同源性比较分析得知,NP基因序列高度的保守性,具有型特异性,同亚型病毒间达97%,不同亚型病毒间亦达90%以上;HA基因与国内亚型病毒分离株间的同源性高达99%左右。说明国内的H9N2可能源自同一毒株。（4）:构建了重组表达载体pKG-NP和pKG-HA,并在BL21 codon plus和BL21（DE3）中表达,结果pKG-NP在BL21 codon plus中获得了高效表达。SDS-PAGE和Western-blot分析表明,融合蛋白GST-NP大小约为84kD,约占菌体总蛋白的20%,能与鸡抗AIV抗体发生明显的抗原抗体反应。（5）:利用十二烷基肌酸钠（SKL）方法纯化了GST-NP包涵体,并经过包涵体变性、复性、透析和包埋过程,获得了较高纯度的重组NP。 本研究在前期研究工作的基础上,对一个来自鸡毒霉形体的、含有4个pMGA基因的重组质粒（MgW17）进行了亚克隆,得到了一个完整的pMGA基因（H-pMGA1.2）,为更好地研究该基因产物的活性及高效表达,我们剔除了信号肽序列以及前端的跨膜疏水部分及膜内部分;将该DNA片段插入GST融合表达载体中并在BL21中进行了表达,表达产物大小约52kD,该产物为
郝永清[8]（2004）在《鸡毒支原体的分离鉴定及基因免疫的研究》文中认为鸡毒支原体（Mycoplasma Gallisepticum， MG）感染也称为鸡败血霉形体感染或慢性呼吸道病（Chronic Respiratory Disease， CRD）。随着养鸡集约化程度的提高，饲养方式的改变以及饲养密度的提高，在通风不良、空气中氨和灰尘增加或气温骤变等环境中极易诱发本病；甚至接种鸡新城疫、传染性支气管炎和传染性喉气管炎等活疫苗后也都可能诱发本病。鸡感染MG后临床上主要表现为咳嗽、流鼻涕、呼吸时发出啰音，严重时张口呼吸。本病分布于世界各地，可通过水平和垂直方式传播，因此该病在鸡群中可长期存在和蔓延。根据血清学调查，鸡群的感染率平均在50%～80%之间。据统计，鸡毒支原体感染鸡群后，雏鸡的弱雏率增加10%左右，蛋鸡的产蛋率下降10%～20%，肉鸡的体重减少38%，出栏期延长，饲料转化率降低20%，并可间接的引起大量的药费开支，同时造成禽产品中药物残留，所以该病是危害养鸡业的重要疾病之一 。因此，多年来许多国家对该病的防制（治）非常重视，但迄今为止仍未找到理想的防治方法。分子生物学技术的发展为该病的防治提供了新的手段和途径，虽然鸡毒支原体分子生物学研究也取得了一定进展，但对其免疫保护性抗原及其基因的克隆和表达的研究在国内报道很少,对该病进行基因免疫的研究至今未见报道。我区虽有用凝集试验和病理剖解方法诊断有鸡毒支原体病的报道，但迄今尚未见到鸡源支原体的分离、鉴定及分子生物学方面的研究报道，因此，在该病的防治中存在着很大的盲目性。 针对目前我区及国内、外鸡毒支原体病的研究现状和实际需要，我们进行了“鸡毒支原体的分离鉴定及基因免疫的研究”，通过该课题的研究，取得以下结果：对内蒙古呼和浩特和包头地区四个鸡场的部分鸡用平板凝集试验检查鸡毒支原体的感染情况，结果MG平均阳性率为84.6%，表明MG感染在我区鸡群中广泛存在。本研究从上述地区四个鸡场的39只鸡中分离到3株支原体，经鉴定两株为鸡毒支原体，分别命名为H3株和BR1株，另一株初步判定为鸡支原体，命名为BR2株。通过攻毒试验证明，H3株和BR1株均为强毒株。通过自制油乳剂灭活苗免疫SPF鸡证明，H3株具有较好的免疫原性。通过PCR扩增，成功克隆了H3株TM-1基因，通过DNA序列测定和比较分析，发现H3株的TM-1基因与S6株的核苷酸差异率为3.435%，氨基酸差异率为4.581%。通过PET-30a原核表达载体表达证明，TM-1基因可以在大肠杆菌中表达，且表达产物具有免疫反应性。成功构建了TM-1基因真核表达质粒。 <WP=3>通过对SPF鸡的免疫，然后经ELISA和流式细胞术对免疫鸡进行检测，结果表明所构建的真核表达质粒既可诱导机体产生体液免疫，也可以产生细胞免疫。攻毒试验证明，我们所构建的TM-1基因DNA疫苗的免疫效果与油乳剂灭活苗相当。
宁宜宝[9]（1999）在《鸡败血霉形体F-36株的稳定性测定》文中研究表明以试管培养基中连续继代 ３６ 次的鸡败血霉形体 Ｆ３６ 定为疫苗制造的起始代次，将其在人工培养基中再传 ４、６、８、１０、１４ 代（简称 Ｆ４０、 Ｆ４２、 Ｆ４４、 Ｆ４６、 Ｆ５０），分别制成疫苗，各接种 ８ 日龄和 ３０ 日龄雏鸡，作免疫原性和病原性测定，观察 Ｆ株的稳定性。病原性测定结果表明，各代次疫苗以 ２～３ 倍的免疫剂量接种感染，不引起鸡的呼吸道症状和气囊炎，对鸡不致病；免疫原性测定结果表明，用各代次疫苗接种鸡都能产生良好的免疫力，能有效地抵抗强毒 Ｒ 株的攻击，保护气囊不受损伤。
王玫,王柳,于力,张伟,洪秀聪,童光志,张绍杰,陈乃昌[10]（1996）在《用核酸探针诊断鸡败血霉形体和滑液霉形体感染》文中认为用鸡败血霉形体（MG）和滑液霉形体（MS）种特异性核酸探针检测临床样品,不但能检出霉形体感染,还能对MG感染和MS感染进行鉴别诊断。对三种鸡非致病性霉形体进行检测表明,没有核酸交叉反应。
二、鸡败血霉形体致病性研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、鸡败血霉形体致病性研究（论文提纲范文）
（1）鸡毒霉形体病的分析（论文提纲范文）
| 1 鸡毒霉形体的生物学特征及培养特性 |
| 2 鸡毒霉形体的致病性及致病机制 |
| 3 鸡毒霉形体病的临床症状及病理变化 |
| 4 鸡毒霉形体病的诊断和防控 |
（2）冬春季节引起鸡群呼吸道症状的几种疾病的鉴别诊治（论文提纲范文）
| 1 从病原及流行特点上进行区别 |
| 2 从主要临床症状上区别 |
| 3 从特征性病理变化上区别 |
| 4 防控措施 |
（3）抗畜禽支原体中药复方肺康明颗粒剂的研制及其化学成分研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 目录 |
| 引言 |
| 1 研究背景和意义 |
| 2 研究思路 |
| 第一章 抗畜禽支原体中药复方肺康明确立 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 单味中药体外抗畜禽支原体活性筛选 |
| 3 单味中药两两联合药物敏感性试验研究 |
| 4 抗畜禽支原体复方组成筛选 |
| 5 本章小结与论 |
| 第二章 中药复方肺康明药效学研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 方法 |
| 3 结果与分析 |
| 4 本章小结与讨论 |
| 第三章 中药复方肺康明颗粒剂制备工艺研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 中药复方肺康明颗粒剂处方、剂型、工艺技术与依据 |
| 3 含量测定方法建立 |
| 4 提取工艺研究 |
| 5 纯化除杂工艺研究 |
| 6 浓缩工艺 |
| 7 干燥工艺 |
| 8 成型工艺研究 |
| 9 中试放大试验研究 |
| 10 本章小结与讨论 |
| 第四章 中药复方肺康明颗粒剂质量标准及初步稳定性研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 原料药材及辅料的质量标准 |
| 3 中药复方肺康明颗粒剂的质量标准 |
| 4 中药复方肺康明颗粒剂质量标准草案说明 |
| 5 初步稳定性研究 |
| 6 本章小结与讨论 |
| 第五章 中药复方肺康明化学成分研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 方法与结果 |
| 3 本章小结与讨论 |
| 第六章 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 展望 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（4）鸡败血霉形体感染的诊治（论文提纲范文）
| 1 发病情况及临床症状 |
| 2 剖检变化 |
| 3 实验室诊断 |
| 3.1 镜检 |
| 3.2 血清学实验 |
| 4 鉴别诊断 |
| 5 防治 |
| 5.1 综合预防措施 |
| 5.2 清除种蛋内鸡败血霉形体 |
| 5.3 培养无霉形体感染鸡群 |
| 5.4 疫苗接种 |
| 5.5 治疗 |
（7）禽流感病毒H9N2亚型和鸡毒霉形体HS株主要抗原性基因的克隆与表达研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 禽流感病毒H9N2亚型核蛋白(NP)和血凝素(HA)基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 |
| 第1章 禽流感文献综述 |
| 1.1 禽流感概述 |
| 1.2 禽流感历史及引起的危害 |
| 1.2.1 禽流感历史 |
| 1.2.2 禽流感最近在世界各地的流行 |
| 1.2.3 禽流感在国内的感染情况 |
| 1.2.4 禽流感的生态学与公共卫生学意义 |
| 1.3 病原学 |
| 1.3.1 禽流感病毒形态与大小 |
| 1.3.2 流感病毒化学组成 |
| 1.3.3 流感病毒的复制 |
| 1.3.4 流感病毒的致病性 |
| 1.3.5 流感病毒的抗原性变异与进化 |
| 1.3.6 流感病毒对外界环境的抵抗力 |
| 1.3.7 禽流感病毒的基因组结构 |
| 1.4 禽流感的流行病学 |
| 1.4.1 易感动物 |
| 1.4.2 禽流感的传播 |
| 1.4.3 潜伏期 |
| 1.4.4 发病率和死亡率 |
| 1.5 禽流感的临床症状 |
| 1.6 禽类感染禽流感后的病理变化特点 |
| 1.7 禽流感的诊断 |
| 1.7.1 病毒的分离鉴定 |
| 1.7.2 血清学诊断技术 |
| 1.7.3 分子诊断技术 |
| 1.8 禽流感的预防和控制 |
| 1.8.1 防止病毒的传入和散播 |
| 1.8.2 建立疫情的预警机制 |
| 1.8.3 封锁、隔离和消毒 |
| 1.8.4 疫苗接种和检疫 |
| 第2章 禽流感病毒血凝素疫苗研究进展 |
| 2.1 亚单位疫苗 |
| 2.2 重组疫苗 |
| 2.3 核酸疫苗 |
| 2.4 表位疫苗 |
| 2.5 转基因植物疫苗 |
| 第3章 禽流感病毒核蛋白研究进展 |
| 3.1 NP基因的结构 |
| 3.2 NP功能研究 |
| 3.3 NP在诊断中的应用 |
| 3.4 NP免疫学功能及其DNA疫苗研究 |
| 第4章 研究目的及意义 |
| 第5章 实验材料与方法 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 病毒毒株、质粒、细菌及抗体 |
| 5.1.2 工具酶及主要生物学试剂 |
| 5.1.3 主要药品及化学试剂 |
| 5.2 主要试剂及溶液的配置 |
| 5.2.1 抗生素类 |
| 5.2.2 常用贮存液的配制 |
| 5.2.3 培养基 |
| 5.2.4 琼脂糖凝胶电泳试剂 |
| 5.2.5 α互补检查的试剂 |
| 5.2.6 碱裂解法质粒提取液 |
| 5.2.7 SDS—PAGE和Western—blot试剂 |
| 5.2.8 包涵体蛋白纯化试剂 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 引物的设计与合成 |
| 5.3.2 病毒的增殖、收获及纯化 |
| 5.3.3 病毒RNA提取 |
| 5.3.4 RT—PCR及DNA片段的电泳检测 |
| 5.3.5 RT—PCR扩增产物回收与纯化 |
| 5.3.6 回收的目的DNA片段与克隆载体pMD18—T的连接反应 |
| 5.3.7 大肠杆菌DH5α或BL21 codon Plus感受态细胞的制备 |
| 5.3.8 连接产物的转化 |
| 5.3.9 α互补检查方法 |
| 5.3.10 重组质粒DNA的提取 |
| 5.3.11 重组质粒DNA鉴定 |
| 5.4 NP和HA基因的cDNA序列测定与分析 |
| 5.5 表达载体pKG—NP和pKG—HA的构建 |
| 5.6 外源基因的诱导表达与表达产物的初步鉴定 |
| 5.7 重组NP蛋白的纯化 |
| 5.7.1 重组NP蛋白包涵体的纯化 |
| 5.7.2 包涵体的溶解与复性 |
| 5.8 SDS—PAGE和Western—blot |
| 5.8.1 SDS—PAGE |
| 5.8.2 Western—blot分析 |
| 第6章 结果与讨论 |
| 6.1 禽流感病毒NP和HA基因的RT- PCR与克隆 |
| 6.2 禽流感病毒NP和HA基因DNA序列测定与分析 |
| 6.3 禽流感病毒NP和HA基因的表达 |
| 6.3.1 表达载体的构建 |
| 6.3.2 克隆基因的诱导、表达与检测 |
| 6.3.3 免疫学活性检测 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 结论 |
| 第2部分 鸡毒霉形体pMGA基因在大肠杆菌中的表达研究 |
| 第1章 鸡毒霉形体文献综述 |
| 1.1 鸡毒霉形体概述 |
| 1.2 鸡毒霉形体的致病机理 |
| 1.3 鸡毒霉形体结构蛋白研究进展 |
| 1.4 鸡毒霉形体病的现代检测技术 |
| 1.5 鸡毒霉形体膜蛋白血清学反应特性研究 |
| 1.6 鸡毒霉形体粘附因子 |
| 1.6.1 鸡毒霉形体粘附素蛋白(pMGA)研究 |
| 1.6.2 鸡毒霉形体HS株pMGA多基因族研究 |
| 1.6.3 pMGA基因的表达调控 |
| 1.7 鸡毒霉形体的其他粘附因子 |
| 1.7.1 GapA |
| 1.7.2 PvPA |
| 第2章 研究的目的和意义 |
| 第3章 实验材料和方法 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 pMGA基因的克隆及表达策略 |
| 3.3 PCR引物设计 |
| 3.4 pMGA基因片段的PCR及克隆 |
| 3.5 重组表达质粒的构建与转化 |
| 3.6 外源基因的诱导表达与表达产物的初步鉴定 |
| 3.7 重组蛋白的包涵体的提取 |
| 3.7.1 重组蛋白包涵体的提取 |
| 3.7.2 包涵体变性、复性和纯化 |
| 3.8 重组蛋白Western—blot分析 |
| 第4章 结果与分析 |
| 4.1 pMGA基因的部分表达及免疫学活性检测 |
| 4.1.1 pMGA基因片段的克隆、重组表达质粒的构建及鉴定 |
| 4.1.2 GST—pMGA多肽融合蛋白的表达 |
| 4.1.3 Western—blot分析 |
| 4.2 pMGA基因的TGA同义突变及其表达 |
| 4.2.1 pMGA基因片段的扩增 |
| 4.2.2 含pMGA基因片段表达载体的构建 |
| 4.2.3 GST—pMGA多肽融合蛋白的表达 |
| 4.2.4 免疫印迹分析 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）鸡毒支原体的分离鉴定及基因免疫的研究（论文提纲范文）
| 1 引言 |
| 1.1 支原体的研究历史 |
| 1.2 鸡毒支原体 |
| 1.2.1 鸡毒支原体的研究历史 |
| 1.2.2 鸡毒支原体的形态及培养特性 |
| 1.2.3 鸡毒支原体的生化特性及抵抗力 |
| 1.2.4 鸡毒支原体的致病力 |
| 1.2.5 鸡毒支原体分子生物学研究进展 |
| 1.3 鸡慢性呼吸道病的流行病学和发生特点 |
| 1.3.1 鸡慢性呼吸道病的流行病学 |
| 1.3.2 鸡慢性呼吸道病的发生特点 |
| 1.4 鸡毒支原体感染的免疫机制 |
| 1.5 鸡慢性呼吸道病的发病机理 |
| 1.6 鸡慢性呼吸道病的临床症状和病理变化 |
| 1.6.1 鸡慢性呼吸道病的临床症状 |
| 1.6.2 鸡慢性呼吸道病的病理变化 |
| 1.7 鸡慢性呼吸道病的诊断 |
| 1.7.1 病原体的分离和鉴定 |
| 1.7.2 血清学方法 |
| 1.7.3 分子生物学方法 |
| 1.8 基因免疫的研究进展及特点 |
| 1.8.1 基因疫苗的研究历史 |
| 1.8.2 与基因有关疫苗的类型特征 |
| 1.8.3 基因疫苗的结构 |
| 1.8.4 DNA疫苗的接种途径与免疫应答机制 |
| 1.8.5 DNA疫苗的佐剂 |
| 1.8.6 基因免疫的安全性问题及分析 |
| 1.8.7 基因疫苗的免疫学特性 |
| 1.8.8 核酸疫苗的优点 |
| 1.9 鸡毒支原体疫苗的研究进展 |
| 1.9.1 灭活油乳剂疫苗 |
| 1.9.2 弱毒疫苗 |
| 1.9.3 生物技术疫苗 |
| 1.10 鸡慢性呼吸道病防治的研究进展 |
| 1.10.1 药物防治 |
| 1.10.2 菌苗免疫 |
| 1.10.3 建立MG阴性鸡群 |
| 2 研究一 鸡毒支原体的分离鉴定及某些生物学特性的研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 支原体分离培养结果 |
| 2.2.2 支原体形态观察结果 |
| 2.2.3 支原体培养特性及生化特性试验结果 |
| 2.2.4 支原体的血清学试验结果 |
| 2.2.5 支原体的药物敏感试验结果 |
| 2.2.6 鸡败血支原体致病性试验结果 |
| 2.2.7 免疫效力测定结果 |
| 2.3 讨论 |
| 3 研究二 鸡毒支原体H3株TM--1基因的克隆和原核表达 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.2.1 MG基因组DNA提取 |
| 3.2.2 MG H3株TM-1蛋白基因的PCR扩增 |
| 3.2.3 PCR产物的克隆及重组质粒的鉴定 |
| 3.2.4 核苷酸序列测定与分析 |
| 3.2.5 重组表达载体的构建及鉴定结果 |
| 3.2.6 表达产物的检测结果 |
| 3.3 讨论 |
| 4 研究三 鸡毒支原体基因疫苗的构建及基因免疫的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验方法: |
| 4.2 实验结果 |
| 4.2.1 基因疫苗的构建 |
| 4.2.2 重组质粒的鉴定结果 |
| 4.2.3 在COS7细胞中的短暂表达结果 |
| 4.2.4 外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞的检测结果 |
| 4.2.5 ELISA 实验结果 |
| 4.2.6 免疫效力测定实验 |
| 4.3 讨论 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（9）鸡败血霉形体F-36株的稳定性测定（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 鸡败血霉形体 |
| 1.2 试验鸡 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.4 结果判定 |
| 2 结果 |
| 2.1 8日龄鸡试验结果 |
| 2.1.1 病原性 |
| 2.1.2 免疫原性 |
| 2.2 30日龄鸡试验结果 |
| 2.2.1 病原性 |
| 2.2.2 免疫原性 |
| 3 讨论 |
（10）用核酸探针诊断鸡败血霉形体和滑液霉形体感染（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 霉形体菌株 |
| 1.2 核酸探针的制备 |
| 1.2.1 MG和MS种特异性DNA片断的筛选 |
| 1.2.2 MG和MS种特异性核酸探针的制备 |
| 1.3 样品及其处理 |
| 1.4 斑点杂交试验 |
| 2 结果和讨论 |
| 2.1 特异性和敏感性试验 |
| 2.1.1 特异性试验 |
| 2.1.2 敏感性试验 |
| 2.2 MG和MS种特异性探针的初步应用 |
四、鸡败血霉形体致病性研究（论文参考文献）
- [1]鸡毒霉形体病的分析[J]. 夏新萌,范书金,刘承军. 广东畜牧兽医科技, 2020(01)
- [2]冬春季节引起鸡群呼吸道症状的几种疾病的鉴别诊治[J]. 李桂松,刘汉章. 农技服务, 2016(01)
- [3]抗畜禽支原体中药复方肺康明颗粒剂的研制及其化学成分研究[D]. 陈美安. 成都中医药大学, 2014(06)
- [4]鸡败血霉形体感染的诊治[J]. 周国威. 中国畜牧兽医文摘, 2012(09)
- [5]鸡霉形体病的诊治[J]. 李红萍,邹勇,帅华平. 福建畜牧兽医, 2009(01)
- [6]如何防治鸡败血霉形体病[J]. 刘国信. 农村养殖技术, 2007(12)
- [7]禽流感病毒H9N2亚型和鸡毒霉形体HS株主要抗原性基因的克隆与表达研究[D]. 胡思顺. 华中农业大学, 2005(03)
- [8]鸡毒支原体的分离鉴定及基因免疫的研究[D]. 郝永清. 内蒙古农业大学, 2004(04)
- [9]鸡败血霉形体F-36株的稳定性测定[J]. 宁宜宝. 中国兽医学报, 1999(05)
- [10]用核酸探针诊断鸡败血霉形体和滑液霉形体感染[J]. 王玫,王柳,于力,张伟,洪秀聪,童光志,张绍杰,陈乃昌. 中国兽医科技, 1996(03)