一、视网膜内源性NO在形觉剥夺性近视眼中的作用（论文文献综述）
牛宗镇,朱煌[1]（2013）在《信号通路在近视发病机制研究中的进展》文中研究说明近视是指当眼静止时,平行光线进入眼后聚焦于视网膜感觉细胞层之前,无法在视网膜上形成清楚的物像,是一种常见的屈光不正现象。近视在人群中具有很高的发病率[1-2],现代社会随着电视、电脑等家用电器的广泛应用其患病率也越来越高。目前近视的发病机制尚不明确。近年来研究发现局部视网膜调控、巩膜重塑等过程在近视的发病中起到了非常重要的作用[3]:
文丹,刘双珍,毛俊峰,谭星平,夏朝华,尹楚南[2]（2012）在《MK801对近视视网膜NO-cGMP信号通路的调控》文中研究说明目的:观察MK801对豚鼠近视的调节,探讨其在近视发病机制中的作用。方法:3周龄三色豚鼠分为6组:A组（正常空白对照组）、B组（右眼遮盖3周组）、C组（右眼遮盖3周+玻璃体腔生理盐水注射组）、D组（右眼遮盖3周+玻璃体腔注射1 ng MK801组）、E组（右眼遮盖3周+玻璃体腔注射10 ng MK801组）、F组（右眼遮盖3周+玻璃体腔注射100 ng MK801组）。实验前及实验3周时对各组进行视网膜检影和A超测眼轴,原位杂交法检测神经细胞性一氧化氮合酶（ncNOS）的表达,放射免疫法检测cGMP的含量,将D,E,F组的屈光度、眼轴、ncNOS及cGMP含量与MK801药物浓度进行直线相关分析。结果:玻璃体腔药物注射C,D,E,F组遮盖眼随注射浓度的升高近视屈光度数下降,眼轴延长减慢,ncNOS及cGMP含量下调,与MK801注射浓度行相关分析呈直线相关,屈光度与注射浓度呈正相关（r=0.702,P<0.05）,眼轴长度、ncNOS表达、cGMP表达与其呈负相关（r=-0.736,-0.637,-0.725,P<0.05）。结论:近视豚鼠MK801玻璃体腔注射能通过下调NO-cGMP表达减缓近视的进展,呈剂量依赖性。
王沙[3]（2010）在《bFGF和iNOS在小鼠形觉剥夺性近视眼视网膜中表达及作用的研究》文中指出目的：本研究通过建立小鼠形觉剥夺性近视（Form-deprivation myopia FDM）动物模型,观察小鼠形觉剥夺性近视形成及恢复期过程中视网膜中碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）和诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthetase, iNOS） mRNA的表达及其相互作用。方法：选择出生21日龄断乳的C57BL/6型小鼠80只,随机均分为两大组：Ⅰ.实验组（40只）：随机分为4组（每组10只）：（1）A组：形觉剥夺O周组。（2）B组：形觉剥夺1周组（3）C组：形觉剥夺2周组（4）D组：形觉剥夺2周后去形觉剥夺1周组。以间断缝合小鼠右眼睑造成形觉剥夺,右眼为形觉剥夺眼,左眼为自身对照眼。Ⅱ.正常对照组（40只）：随机分为4组（每组10只）：分别为A1、B1、C1、D1组,每组小鼠年龄分别与对应实验组相同。分别于相应时间点对各组进行视网膜检影和数显千分尺测量眼轴长度,将各组屈光度及眼轴长度变化进行比较分析。并取实验组的小鼠运用RT-PCR的方法分别检测其视网膜中bFGFmRNA和iNOSmRNA的表达,对其表达结果进行分析。结果：（1）随形觉剥夺时间的延长,实验组小鼠的形觉剥夺眼相对自身对照眼呈现近视漂移,且在两周时能形成约-2.50D的相对近视化改变,其形觉剥夺眼与自身对照眼的屈光度差值与正常对照组小鼠双眼的屈光度差值比较有统计学差异（P<0.05）,而去形觉剥夺后其近视漂移明显受到抑制,但较正常对照组双眼差值比较仍有统计学差异（P<0.05）,自身对照眼及正常对照组小鼠屈光度呈生理性远视化发展。形觉剥夺眼眼轴随遮盖时间的延长而延长,在1周、2周时其相对正常对照组双眼眼轴差值比较有统计学差异（P<0.05）,去遮盖后遮盖眼的眼轴延长明显减缓。（2）小鼠视网膜中bFGF和iNOSmRNA的表达随形觉剥夺时间的延长而下调,而去遮盖后两者的表达上调,不同时间点两者的mRNA表达与自身对照眼相比均有统计学差异（P<0.05）,且两者表达具有高度相关性,相关系数为0.963（P<0.001）。结论：形觉剥夺能成功诱导出C57BL/6型小鼠的近视模型,bFGF和iNOS与小鼠形觉剥夺性近视的发生发展呈负相关,且两者在近视的形成和恢复中的高度相关性提示两者之间可能存在直接或间接的调控。
蒋晶晶[4]（2010）在《早期生长反应因子-1在小鼠近视眼形成中的研究》文中指出第一章含小鼠Egr-1基因的发夹结构RNA干扰质粒的构建及干扰效率鉴定目的构建及筛选高效率针对小鼠早期生长反应因子-1（Egr-1）发夹结构RNA干扰（shRNA）的质粒。方法根据小鼠Egr-1基因mRNA序列（NM007913）,设计有发夹结构的3条寡核苷酸序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生含shRNA的重组质粒1#、2#及3#,PCR筛选阳性克隆,测序测定。设计构建不针对任何特异基因的NC质粒作为阴性对照。将3个shRNA表达质粒及NC质粒转染HEK293细胞,设不做任何处理的细胞为空白对照。通过对绿色荧光蛋白（GFP）表达量的观察,实时荧光定量聚合酶链反应（RQ-PCR）及免疫印迹法（western blotting）检测Egr-1基因mRNA及蛋白的表达,鉴定shRNA表达质粒对Egr-1基因的抑制效率。组间比较采用单因素方差分析,实验组3个序列两两比较采用q检验。结果针对小鼠Egr-1基因进行RNA干扰的1#、2#及3#序列中,1#序列的质粒明显抑制了细胞内Egr-1的mRNA及蛋白表达（FmRNA=118.819, P=0.000; Fprotein=71.605, P=0.000）结论成功构建了针对小鼠Egr-1基因的高效shRNA表达的质粒。第二章含小鼠Egr-1 shRNA慢病毒载体构建及转染小鼠视网膜的研究目的构建含绿色荧光蛋白（GFP）和小鼠早期生长反应因子-1（Egr-1）发夹结构RNA干扰（shRNA）共表达的慢病毒载体,并将其转染至小鼠视网膜组织,探索合适的给药方式。方法将前期实验已经筛选确定的小鼠Egr-1基因shRNA有效靶序列的质粒,命名为LV-shRNA（Egr-1）。将LV-shRNA（Egr-1）重组质粒及pHelper 1.0、pHelper2.0慢病毒包装用的辅助质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒载体,经梯度稀释后,根据荧光显微镜下绿色荧光蛋白（GFP）表达阳性细胞来计算病毒滴度。将包装好的慢病毒载体分别通过玻璃体腔和视网膜下注射的途径转染至C57BL/6小鼠视网膜,于实验后2周,取小鼠眼球制作冰冻切片,荧光显微镜观察视网膜GFP表达情况。结果①成功构建含GFP并携带靶向小鼠Egr-1基因的shRNA慢病毒载体,经孔稀释法测定病毒滴度为4×108TU/ml;②利用该慢病毒载体系统转染小鼠视网膜组织,发现经玻璃体腔注射途径转染后的小鼠,GFP广泛分布于视网膜全层包括视网膜色素上皮层（RPE）；而经视网膜下注射途径转染后的小鼠,GFP局限分布于视网膜外层。结论成功构建含GFP并携带靶向小鼠Egr-1基因的shRNA慢病毒载体,通过玻璃体腔注射较视网膜下注射转染效率高,分布范围广,为后期的体内实验提供了实验基础。第三章Egr-1基因对小鼠近视眼的调控作用目的将针对小鼠Egr-1基因的shRNA慢病毒载体行玻璃体腔注射后,观察小鼠屈光度及眼轴长度的变化,阐明Egr-1基因在小鼠近视眼形成中的调控作用。方法15日龄C57BL/6小鼠,共180只,等量随机分为3组：实验组、阴性对照组及空白对照组。其中实验组小鼠右眼玻璃体腔注入前期研究中构造的LV-shRNA（Egr-1）’慢病毒载体；阴性对照组小鼠右眼玻璃体腔注入阴性对照LV-NC慢病毒载体；空白对照组小鼠不做任何处理。分别于实验后1周、2周、3周测量各组小鼠右眼屈光度后将其麻醉处死,分别测量各组小鼠右眼眼轴长度；制作冰冻切片,荧光显微镜下观察视网膜GFP表达,判断转染情况；荧光定量聚合酶链反应（RQ-PCR）、免疫印迹法（western blotting）及免疫荧光检测小鼠视网膜Egr-1基因的表达；切片HE染色后,显微镜下观察视网膜形态有无变化。组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验。结果①RQ-PCR、western blotting、免疫荧光检测发现实验组注射眼内Egr-1的表达明显下调,其中第1周Egr-1下调最为显着（FmRNA=184.383,P=0.000; Fprotein=170.470, P=0.000）;②实验组和阴性对照组的慢病毒载体注射后1周后即可在荧光显微镜下观察到视网膜全层GFP分布明显,第2周后荧光强度开始衰减,第3周后GFP表达微弱；③在实验后第1周（F屈光度=157.793,P=0.000；F眼轴长度=10.005,P=0.000）及第2周（F屈光度=182.603,P=0.000；F眼轴长度=5.273,P=0.007）,实验组小鼠注射眼出现了明显的近视化发展,且伴有明显的眼轴延长；但在实验后第3周（F屈光度=1.259,P=0.290；F眼轴长度=1.004,P=0.371）实验组小鼠注射眼与阴性对照组注射眼及空白对照眼的屈光度及眼轴长度相比较,无统计学差异；阴性对照组的注射眼在实验各个阶段与空白对照眼的屈光度及眼轴长度相比较,均无统计学差异（p>0.05）④在实验后1周,小鼠近视化发展趋势最明显,取这周小鼠实验组及阴性对照组的注射眼、空白对照眼切片HE染色后观察,发现各组视网膜形态无明显变化。结论通过针对小鼠Egr-1基因的shRNA慢病毒载体转染小鼠视网膜后,出现了小鼠视网膜Egr-1基因的下调,小鼠屈光度及眼轴长度向近视趋势发展,证实了Egr-1基因在小鼠近视眼形成中所起的重要作用,同时发现慢病毒载体转染小鼠视网膜安全有效。实验结果为近视眼未来的基因治疗提供了思考的方向。
赵小云[5]（2010）在《视黄酸及LE540在早期形觉剥夺性近视豚鼠后极部巩膜中的作用》文中研究说明研究目的建立早期形觉剥夺性近视（form-deprivation myopia, FDM）动物模型,检测豚鼠巩膜中视黄酸（retinoic acid, RA）及视黄酸受体β（retinoic acid receptorβ,RARβ）的水平；同时比较注射RARβ特异性抑制剂LE540和注射RA与对照组对屈光状态的影响,观察后极部巩膜病理变化,并检测巩膜基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和核心蛋白聚糖（decorin, DCN）的水平,探讨RA及RARβ在形觉剥夺性近视豚鼠后极部巩膜变化中的作用。方法第一部分：同批次3周龄英国种短毛三色豚鼠30只（中国医学科学院放射研究所动物中心提供）,采用随机数字表法将动物分为3组,正常组6只,形觉剥夺15天组（FD 15 d）和形觉剥夺24天组（FD 24 d）各12只,实验眼均为左眼,右眼为自身对照眼。采用6号同色气球于豚鼠口鼻、双耳及对侧眼处开窗,制成大小合适的头套遮盖左眼,颈部以胶带固定防止脱落,分别饲养至15天和24天作为形觉剥夺动物模型。实验前后均测量屈光度,实验结束后摘除眼球,测量眼轴长,应用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography, HPLC）测定后极部巩膜RA含量,western blotting方法检测巩膜RARβ蛋白含量的变化。第二部分：另选同种豚鼠30只,随机分为4组,Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ组各8只,Ⅳ组6只,为正常对照组。I组左眼球后注射0.1 g/L LE540 0.1ml,并用气球头套遮盖至第24天；II组左眼用气球头套遮盖24天；III组左眼球后注射0.4g/L RA 0.1ml,饲养至第24天。右眼为自身对照眼。实验前后均行视网膜检影测量屈光度,实验结束后取眼球测量眼轴长度,取巩膜做石蜡切片行病理学检查,用western blotting方法检测后巩膜细胞外基质中MMP-2及decorin蛋白含量的变化。计量资料数据以x±s表示,采用SPSS11.5统计学软件进行统计学处理,并进行正态分布及Levene方差齐性检验后行t检验和方差分析。结果第一部分：FD 15 d组、FD 24 d组动物实验眼诱导出明显的相对近视,且与正常组比较差异有统计学意义（F=23.053,P=0.000）。FD15d组、FD 24 d组实验眼眼轴均长于自身对照眼（P<0.05）。FD 15 d组、FD 24 d组实验眼巩膜中RA水平较自身对照眼均明显升高（P<0.01）,但两组实验眼之间比较差异无统计学意义（P=0.857）。Western blotting所得RARβ的灰度图显示,FD 15 d组、FD 24d组实验眼巩膜RARβ较自身对照眼均增多,正常组、FD15 d组和FD 24d组实验眼巩膜中的RARβ/β-actin总体比较差异有统计学意义（F=20.527,P<0.001）,其中FD 15 d组和FD 24 d组实验眼间的RARβ/β-actin比较,差异有统计学意义（t=0.158,P=0.031）,而且FD 15d组和FD 24 d组的实验眼分别与正常组相比,差异均有统计学意义（t=0.324,P<0.001；t=0.482,P<0.001）。第二部分：实验干预后II和III组的实验眼形成相对近视,两组左右眼屈光度差异均有显着统计学意义（t=8.543,P=0.000；t=6.027,P=0.001）。其中,I组和II组实验眼的屈光度在实验前后差异分别为（-1.77±0.93）D和（-5.39±1.26）D,二者之间有显着统计学差异（P=0.000）；III组实验眼干预前后屈光度差别为（-3.73±0.79）D,实验前后差异有统计学意义（t=13.340,P=0.000）。实验干预后I组的左右眼眼轴长度相比差异无显着性统计学意义（t=1.635,P=0.146）；II组和III组干预后左右眼眼轴长度差异均有统计学意义（t=2.980,P=0.021；t=-4.100,P=0.005）。II组和III组实验眼后极部巩膜有明显病理性近视改变。I组、II组和III组实验后实验眼巩膜中的MMP-2/β-actin均明显升高（t=4.520,P=0.020；t=6.913,P=0.006；t=5.462,P=0.012）。I组、II组和III组实验后实验眼巩膜中的Decorin/β-actin均降低,与自身对照眼相比,I组差异无统计学意义（t=2.522,P=0.086）,II组和III组有统计学意义（t=9.072,P=0.003；t=4.202,P=0.025）。结论形觉剥夺可导致轴性近视发生,近视程度在早期随时间明显递增,形觉剥夺眼眼轴增长；豚鼠早期形觉剥夺眼后极部巩膜RA及RARβ水平上调；外源RA可导致轴性近视；形觉剥夺和外源RA诱导的近视眼后极部巩膜中,细胞外基质分解活跃,MMP-2上调,Decorin下调；RA参与介导的形觉剥夺性近视的形成作用可被RARβ抑制剂LE540不完全抑制；RA-RARβ途径可能是导致FDM豚鼠后极部巩膜重塑的重要机制之一
孙宏亮[6]（2009）在《iNOS和MMP-2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达变化》文中指出背景和目的近200年来,对近视机制的研究一直是眼科学研究的重要课题。自1977年Wiesel首次用缝合恒河猴眼睑的方法成功诱导出形觉剥夺性近视（formdeprivation myopia,FDM）以来,随着建立近视动物模型方法的日趋完善,对近视的发生发展及转归有了深入研究。目前的研究表明:形觉剥夺主要通过局部视网膜机制来调控邻近巩膜的生长,形觉剥夺可导致视网膜上的多种神经递质与生长因子水平发生改变,它们作为一级信使作用于视网膜色素上皮细胞和脉络膜,使之产生二级信使,再作用于巩膜,进而通过影响巩膜细胞外基质（extracellularmaterial,ECM）的合成或降解,使巩膜重新塑形,眼轴过度延长,形成近视。形觉剥夺性近视以后极部巩膜的变薄为一个重要的特征,其主要原因是因为巩膜细胞外基质的重塑。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs）是广泛存在于动植物体内的能够降解细胞外基质（ECM）的一组锌离子依赖性蛋白酶系。已有实验表明,小鸡和豚鼠的形觉剥夺眼后极部巩膜活性MMP-2明显增加,恢复期活性MMP-2减少,提示MMP-2与形觉剥夺性近视有关。一氧化氮（NO）是近20年来新发现的视网膜神经递质,与视网膜的发育、视觉兴奋和视觉信息的传导有关。NO由一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）催化左旋精氨酸（L-Arginine,L-Ag）而合成。Fujiis等研究发现,在新生鸡单眼形觉剥夺过程中,视网膜-色素上皮-脉络膜的三种NOS亚型中,只有诱导型一氧化氮合酶（i-NOS）表达水平明显下降,这提示i-NOS可能参与形觉剥夺性近视的形成。尽管iNOS和MMP-2在形觉剥夺性近视动物模型的变化已分别被证实,但是两者在形觉剥夺性近视的形成过程是否有内在联系尚未被研究。本研究拟建立豚鼠形觉剥夺性近视模型,应用免疫组织化学染色法,研究iNOS和MMP-2在形觉剥夺性近视豚鼠眼后极部的表达变化以及两者的相关性,以进一步揭示形觉剥夺性近视产生的机制,从而为近视的防治提供有价值的参考。材料与方法2周龄健康花色豚鼠60只,随机分为4组:Ⅰ组:未遮盖组;Ⅱ组:右眼遮盖3周组;Ⅲ组:右眼遮盖6周组;Ⅳ组:右眼遮盖9周组。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组均以右眼为实验眼,将直径为15mm的半透明眼罩粘于豚鼠右眼周围皮肤上,并在眼罩下方留有狭长缝隙供透气用;左眼不作任何处理为自身对照组。于不同时间点检测各组豚鼠的双眼屈光度、眼轴长度,HE染色光学显微镜下观察视网膜巩膜病理变化,免疫组织化学染色法检测视网膜iNOS和巩膜MMP-2的蛋白表达。所有数据均用（?）±s表示,统计学处理采用SPSS13.0统计软件,双眼比较采用配对t检验,组间比较采用单因素方差分析,多个样本均数之间进行LSD两两比较,相关性采用Person积差相关分析,以a=0.05为检验水准。结果1.遮盖眼与对照眼屈光度、眼轴比较:遮盖眼由实验前远视眼渐变为近视眼,并随遮盖时间延长,近视度数加深,眼轴延长。遮盖眼与对照眼（正常眼和自身对照眼）相比在统计学上差异具有显着性（P＜0.05）,成功建立了实验性近视动物模型。2.视网膜、巩膜形态学变化:遮盖3、6、9周后,遮盖眼视网膜较自身对照眼和正常对照眼变薄,以内外核层最明显;后极部巩膜变薄、稀疏。3.免疫组化染色:iNOS在正常和自身对照眼豚鼠的视网膜内呈低水平表达,而在形觉剥夺近视中主要表达于视网膜节细胞层、内核层、感光细胞层和脉络膜间质组织,在神经纤维层和巩膜也有阳性着色。MMP-2主要表达于巩膜,在节细胞层、内核层、感光细胞层也有阳性着色。随着遮盖时间的延长,视网膜iNOS和巩膜MMP-2吸光度值均成增加趋势（P＜0.01）。4.iNOS和MMP-2的相关性分析:经相关性分析发现,在形觉剥夺的不同阶段,视网膜iNOS和巩膜MMP-2蛋白表达量相关系数为r=0.769,P＜0.05,提示两者蛋白表达具有明显正相关。结论1.单眼遮盖可造成豚鼠遮盖眼视网膜中i-NOS和巩膜中MMP-2表达量增加,并随遮盖时间的延长逐渐加强,与近视屈光度增加和眼轴延长趋势相一致,提示iNOS和MMP-2可能参与了形觉剥夺性近视的形成。2.遮盖眼视网膜iNOS和巩膜MMP-2的表达量在形觉剥夺过程中呈强的正相关。可以推测在形觉剥夺性近视的发展过程中,模糊的物像通过刺激视网膜产生包括NO在内的多种神经递质,直接或间接作用于巩膜,影响MMP-2的表达和活性,最终导致巩膜重塑和近视的形成。
吴振凯[7]（2009）在《MMP-2与TIMP-2在豚鼠近视眼脉络膜中表达的变化及机制的初步探讨》文中提出目的:研究基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase 2,MMP-2）及基质金属蛋白酶-2特异性组织抑制剂（tissue inhibitor of matrixmetalloproteinase- 2,TIMP-2）在豚鼠形觉剥夺性近视眼脉络膜中表达的变化并予豚鼠眼球周注射全反式视黄酸溶液初步探讨调控其表达的上游因素。方法:第一部分:将30只3周龄三色豚鼠随机分为A、B组,分别为12只、18只,A组作为对照组,随机分为A1、A2组,每组6只,不作任何干预,分别饲养14d、21d;B组为遮盖组,随机分为B1、B2、B3组,每组6只,分别遮盖右眼14d、21d、遮盖14d后去遮盖7d,各组左眼为自身对照眼,按预定时间检测屈光度和眼轴长度,处死摘取眼球后极部组织切片行免疫组化染色检测脉络膜中MMP-2及TIMP-2的表达水平。第二部分:将12只3周龄三色豚鼠（与第一部分所用豚鼠同期同批次）作为C组,随机分为C1、C2组,每组6只,实验开始时予C1组右眼球周单次注射20ul浓度为10-6mmol/L的全反式视黄酸溶液、C2组右眼球周单次注射20ul全反式视黄酸的助溶剂二甲基亚砜溶液,均饲养21 d;各组左眼为自身对照眼,按预定时间检测屈光度和眼轴长度、处死摘取眼球后极部组织切片行免疫组化染色检测脉络膜中MMP-2及TIMP-2的表达水平。结果:第一部分、14d后B1组右眼与遮盖前、A1组右眼、自身左眼比较眼轴延长、近视形成,脉络膜组织中MMP-2染色阳性区灰度值较A1组显着减小,21d后B2组右眼较B1组右眼近视屈光度增加、眼轴延长、脉络膜组织中MMP-2染色阳性区灰度值较A2组、B1组减小,B3组右眼较B1、B2组右眼近视屈光度减小,眼轴缩短,脉络膜组织MMP-2染色阳性区灰度值较B1、B2组增大,差异均有统计学意义（P＜0.01）,各组脉络膜TIMP-2染色阳性区灰度值差异无统计学意义（P＞0.05）;二、21d后C1组右眼较A2组、C2组右眼、自身左眼屈光度增加、眼轴延长、脉络膜组织中MMP-2染色阳性区灰度值显着减小,差异均有统计学意义（P＜0.01）,各组脉络膜组织TIMP-2染色阳性区灰度值差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:1.豚鼠形觉剥夺性近视眼脉络膜组织中MMP-2表达上调、TIMP-2表达无明显变化,MMP-2与TIMP-2之间平衡失调。2.豚鼠后极部组织中的视黄酸可能是调控脉络膜组织中MMP-2与TIMP-2之间平衡的上游因子之一。
孔晓路[8]（2009）在《高度近视阻止糖尿病视网膜病变发生的机制研究》文中研究指明糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）是糖尿病患者的严重并发症之一,是导致失明的重要原因,但DR的发病机制仍在探讨中。临床发现高度近视患者即使有较长的糖尿病病史,也常常不伴有DR的发生;而且在同一糖尿病患者屈光参差的双眼中,近视程度较高眼的DR病变程度比对侧眼明显较轻。国内外已有的研究表明,近视的严重程度与DR的严重程度呈负相关,但缺乏相应的实验学依据。因此,进行高度近视对DR的阻滞机制研究对DR的发病机制及治疗有着重要的意义。由于视网膜小动脉无交感神经支配,因此血管内皮细胞通过释放NO松弛血管平滑肌,同时释放ET-1收缩血管,NO和ET-1的协调平衡维持着血管的外周阻力和局部血管的舒缩状态,协调着视网膜的血液循环,对DR的发生发展起着越来越重要的作用。本实验拟建立糖尿病联合高度近视眼动物模型,应用免疫组化法测定视网膜脉络膜中ET-1、iNOS蛋白含量及细胞凋亡的表达,初步探讨高度近视对糖尿病视网膜病变阻滞的机制。材料和方法选用出生3天的健康三色豚鼠60只,体重100～130 g,雌雄不限,所有豚鼠排除先天性近视及其它眼疾,将豚鼠随机分为4组,Ⅰ组（对照组）15只,饲养6周后腹腔注射等量空白缓冲液;Ⅱ组（拟建高度近视眼动物模型组）15只,以半透明眼罩行右眼遮盖6周后,腹腔注射等量空白缓冲液;Ⅲ组（拟建糖尿病动物模型）15只,饲养6周后按60mg/kg剂量连续3周左下腹腔小剂量多次注射链脲佐菌（streptozocin,STZ）诱发糖尿病;Ⅳ组（拟建糖尿病合并高度近视眼动物模型组）15只,半透明眼罩遮盖右眼6周后按60mg/kg剂量连续3周左下腹腔小剂量多次注射STZ诱发糖尿病。各组豚鼠右眼结膜囊内滴1%复方托吡咔胺滴眼液3次,间隔10min,带状光检影,以屈光度＞-6.00D者为高度近视眼豚鼠模型,腹腔注射STZ3天后,凡空腹血糖≥16.7mmol/L-1及尿糖阳性的豚鼠定为糖尿病豚鼠模型。饲养18周后检测4组豚鼠的体重、空腹血糖、双眼屈光度及眼轴长度,取眼球行视网膜切片HE染色、免疫组织化学染色及TUNEL染色,通过与电脑相连的Biosens Digital Imaging system V1.6高清晰度彩色病理图文分析系统作细胞ET-1蛋白、iNOS蛋白表达的半定量分析,用平均光密度值来表示免疫反应表达程度。结果1.体重及空腹血糖变化比较:正常对照组（Ⅰ组）和高度近视眼组（Ⅱ组）体重明显高于糖尿病组（Ⅲ组）及糖尿病合并高度近视眼组（Ⅳ组）,其差异具有统计学意义（P＜0.05）;Ⅰ组与Ⅲ组、Ⅲ组与Ⅳ组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。Ⅲ组与Ⅳ组空腹血糖明显高于Ⅰ组和Ⅱ组,其差异具有统计学意义（P＜0.05）,Ⅲ组与Ⅳ组、Ⅰ组和Ⅱ组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。2.屈光度及眼轴长变化比较:高度近视眼组（Ⅱ组）和糖尿病合并高度近视眼组（Ⅳ组）屈光度明显高于正常对照组（Ⅰ组）及糖尿病组（Ⅲ组）,其差异具有统计学意义（P＜0.05）;Ⅰ组和Ⅳ组、Ⅰ组及Ⅲ组相比无统计学意义（P＞0.05）。Ⅱ组和Ⅳ组眼轴长明显高于Ⅰ组及Ⅲ组,其差异具有统计学意义（P＜0.05）,Ⅱ组与Ⅳ组、Ⅰ组和Ⅲ组相比无统计学意义（P＞0.05）。3.免疫组化染色:ET-1、iNOS蛋白阳性细胞主要表达于神经节细胞层胞浆和内外丛状层,胞浆着色呈棕黄色。ET-1蛋白的表达:Ⅲ组及Ⅳ组阳性表达高于Ⅰ组及Ⅱ组,差异有统计学意义（P＜0.05）;Ⅲ组阳性表达高于Ⅳ组,但差异无统计学意义（P＞0.05）;Ⅰ组及Ⅱ组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。iNOS蛋白的表达:Ⅲ组及Ⅳ组阳性表达高于Ⅰ组及Ⅱ组,差异有统计学意义（P＜0.05）;Ⅲ组阳性表达高于Ⅳ组,差异有统计学意义（P＜0.05）;Ⅱ组阳性表达低于Ⅰ组,差异有统计学意义（P＜0.05）。4.TUNEL染色:荧光显微镜下凋亡细胞呈橙色荧光。正常组视网膜光感受器细胞极少见到凋亡,糖尿病组凋亡细胞明显增多。结论1.透明眼罩遮盖联合STZ小剂量多次腹腔注射是一种可靠的制备糖尿病合并高度近视眼动物模型的方法。2.ET-1/iNOS通过调节视网膜血流,参与了高度近视对DR发展的早期阻滞。3.糖尿病早期即出现了视网膜细胞凋亡。
文丹[9]（2007）在《NMDAR1与NO-cGMP视网膜信号传导通路对豚鼠形觉剥夺性近视的调控》文中研究说明第一章：豚鼠形觉剥夺性近视模型的建立及视网膜组织形态学观察目的：建立豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）动物模型，观察近视豚鼠视网膜组织形态学变化。方法：出生3周三色豚鼠66只，随机均分为3组：正常对照组、遮盖2周组、遮盖3周组。对各组进行视网膜检影和A超测眼轴，测量视网膜各层厚度的变化及视网膜光镜和电镜下组织形态学变化。结果：遮盖2周组，实验眼呈轻度近视（-1.58D），自身对照眼呈轻度远视（＋2.50D）；实验眼眼轴（7.958±0.118mm）较自身对照眼（7.510±0.046mm）轻度延长。遮盖3周组，实验眼呈中度近视（-3.42D），自身对照眼呈轻度远视（＋1.82D）；实验眼眼轴（8.123±0.086mm）较自身对照眼（7.593±0.064mm）明显延长。两组的实验眼与自身对照眼屈光度及眼轴差异均有统计学意义（P＜0.05），自身对照眼屈光状态有正视化趋势，眼轴随生长发育延长。实验眼随形觉剥夺时间延长，近视形成，光镜下视网膜各层变薄，内层细胞数目减少，排列紊乱，电镜下视网膜呈退行性改变并可见凋亡小体。结论：豚鼠是较理想的视觉系统研究的动物，对豚鼠进行无创性眼罩遮盖能成功诱导其眼轴延长，近视形成。随近视发展，视网膜变薄，光镜及电镜下均有病理性改变，视网膜内层可能是近视发病机制中起重要作用的部位。第二章：NMDAR1及NO-cGMP信号传导通路在FDM豚鼠视网膜上的表达目的：通过对豚鼠FDM视网膜上NMDAR1、NO及cGMP含量的动态观察，探讨NMDAR1介导的NO-cGMP信号传导通路对近视的调控。方法：对各组豚鼠视网膜运用免疫组化及Western Blot法检测NMDAR1蛋白表达，RT-PCR定量检测NMDAR1的mRNA含量；原位杂交法检测ncNOS的mRNA表达；放射免疫化学方法检测c-GMP含量；并对ncNOS和c-GMP的表达行相关分析。结果：正常对照组：双眼视网膜均有NMDAR1、ncNOS和c-GMP表达，其中NMDAR1、ncNOS主要在视网膜内层表达；双眼NMDAR1、ncNOS和c-GMP表达差异无统计学意义（P＞0.05）；遮盖2周组与遮盖3周组：实验眼视网膜NMDAR1、ncNOS和c-GMP表达随遮盖时间延长明显上调，与自身对照眼比较差异有统计学意义（P＜0.05）；视网膜ncNOS和c-GMP之间表达具有高度相关性，相关系数为0.941。结论：形觉剥夺可明显上调豚鼠视网膜NMDAR1的蛋白水平及mRNA的表达，伴随ncNOS的mRNA上调和cGMP含量升高。异常的视觉信号可能通过NMDAR1介导的NO-cGMP信号传导通路对近视进行调控。第三章：NMDAR1拮抗剂MK801对豚鼠形觉剥夺性近视的调控目的：对FDM豚鼠玻璃体腔注射NMDAR1拮抗剂MK801，观察其通过NMDAR1及NO-cGMP通路表达的变化对近视调控的影响。方法：出生3周三色豚鼠72只，随机均分为3组：A组（正常空白对照组，12只）、B组（右眼遮盖三周组，12只）、C组（右眼遮盖三周＋玻璃体腔注射组，48只）；按玻璃体腔注药的不同将C组分为4组：C1组（右眼遮盖三周＋玻璃体腔注射生理盐水组，12只）、C2组（右眼遮盖三周＋玻璃体腔注射lngMK801组，12只）、C3组（右眼遮盖三周＋玻璃体腔注射10ngMK801组，12只）、C4组（右眼遮盖三周＋玻璃体腔注射100ngMK801组12只）。按预定时间对各组进行视网膜检影和A超测眼轴；原位杂交法检测ncNOS表达；WesternBlot法定量检测NMDAR1蛋白表达，RT-PCR定量检测NMDAR1的mRNA含量结果：B、C1、C2、C3、C4组实验眼分别与A组比较，其屈光度加深、眼轴延长。B组与C1组在屈光度、眼轴及ncNOS、NMDAR1含量差异无统计学意义（P＞0.05）。C2、C3、C4组与C1组相比较，屈光度降低，眼轴变短，ncNOS表达下调，NMDAR1含量下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；将其与MK801的浓度行相关分析呈直线相关，效应呈浓度依赖性。结论：不同浓度MK801FDM豚鼠玻璃体腔注射，通过下调视网膜上ncNOS表达及NMDAR1的蛋白和mRNA水平，可延缓眼轴过度生长，抑制近视，其效应呈浓度依赖性。
魏欣[10]（2006）在《视网膜早基因c-fos在豚鼠实验性近视眼中的表达及其对TH调控作用的研究》文中认为第一章 豚鼠形觉剥夺性近视动物模型的建立及眼球生长、屈光变化过程的动态观察 目的：建立豚鼠形觉剥夺性近视动物模型，并对豚鼠形觉剥夺性近视（Form-deprivation myopia FDM）形成及恢复期间遮盖眼及对照眼屈光度和眼轴长度变化进行观察，了解豚鼠正视化和近视形成的过程。方法：出生3周三色豚鼠40只，随机均分为4组：未遮盖组、单眼遮盖1周组、单眼遮盖2周组、去遮盖组。对各组进行视网膜检影和A超测眼轴，将各组屈光度及眼轴长度变化进行比较分析。结果：未遮盖组：双眼呈基本正视状态，眼轴长度无统计学差异；遮盖1周后遮盖眼呈中度近视（-4.5D），自身对照眼呈轻度远视状态（+0.6D），双眼屈光度有统计学差异（P＜0.05），眼轴较自身对照眼呈轻度延长（0.104±0.325mm），但两者眼轴无统计学差异（P＞0.05）；遮盖2周后遮盖眼呈高度近视（-8.8D），而自身对照眼呈轻度远视状态（+0.5D），，双眼屈光度有统计学差异（P＜0.05），眼轴较自身对照眼明显延长（0.750±0.802mm），两者有统计学差异（P＜0.05）；去遮盖1周去遮盖眼较对照眼仍呈中度近视（-5.9D），但去遮盖前后屈光度无统计学差异（P＞0.05），去遮盖眼眼轴较前无明显延长，甚至有缩短趋势，但与自身对照眼眼轴有统计学差异（P＜0.05）。结论：形觉剥夺能成功诱导豚鼠近视发生及发展，促进眼轴延长，而去除形觉剥夺可抑制近视发展和眼轴延长。豚鼠不但是一种眼球结构及视觉发育与人类相似、对形觉剥夺较敏感的动物，而且具有易于饲养，生长发育
二、视网膜内源性NO在形觉剥夺性近视眼中的作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、视网膜内源性NO在形觉剥夺性近视眼中的作用（论文提纲范文）
（1）信号通路在近视发病机制研究中的进展（论文提纲范文）
| 一、各类信号通路的研究进展 |
| 1. TGF-β-Smad信号系统: |
| 2. 一氧化氮-环磷酸鸟苷(nitric oxide-cyclic guanine mono-phosphate,NO-c GMP)信号通路: |
| 3. Sonic hedgehog(Shh)信号通路: |
| 4. Stat3信号通路: |
| 5. IGF及其相关信号通路: |
| 6. 其他信号通路: |
| 二、展望 |
（2）MK801对近视视网膜NO-cGMP信号通路的调控（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1实验动物与分组 |
| 1.2材料 |
| 1.3动物模型建立 |
| 1.3.1近视模型的建立 |
| 1.3.2玻璃体腔注射药物配制 |
| 1.4实验方法 |
| 1.4.1屈光度及眼轴长度检测 |
| 1.4.2原位杂交法检测ncNOS的表达 |
| 1.4.3放射免疫法检测cGMP的含量 |
| 1.5统计学处理 |
| 2结果 |
| 2.1屈光度及眼轴长度变化 |
| 2.2原位杂交检测ncNOS mRNA表达 |
| 2.3放射免疫法检测cGMP结果 |
| 3讨论 |
（3）bFGF和iNOS在小鼠形觉剥夺性近视眼视网膜中表达及作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文对照缩写表 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计学方法 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 屈光度的变化 |
| 3.2 眼轴的变化 |
| 3.3 视网膜总RNA的提取 |
| 3.4 视网膜bFGFmRNA的表达 |
| 3.5 视网膜iNOSmRNA的表达 |
| 3.6 视网膜bFGF和iNOS表达的相关性分析 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 形觉剥夺后小鼠屈光度及眼轴的变化 |
| 4.2 形觉剥夺性近视发展中bFGF和iNOS的作用及其相互关系 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 近视眼的研究进展 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 研究成果 |
（4）早期生长反应因子-1在小鼠近视眼形成中的研究（论文提纲范文）
| 摘要 ABSTRACT 中英文对照 前言 第一章 |
| 含小鼠Egr-1基因的发夹结构RNA干扰质粒的构建及干扰效率鉴定 1 |
| 材料与方法 2 |
| 结果 3 |
| 讨论 小结 第二章 |
| 含小鼠Egr-1 |
| shRNA慢病毒载体构建并转染小鼠视网膜的研究 1 |
| 材料与方法 2 |
| 结果 3 |
| 讨论 小结 第三章 |
| Egr-1基因对小鼠近视眼的调控作用 1 |
| 材料与方法 2 |
| 结果 3 |
| 讨论 小结 结论 参考文献 综述一 |
| 近视动物模型及诱导方法选择 综述二 |
| 慢病毒载体在眼科基础研究中的应用 致谢 攻读学位期间主要的研究成果 |
（5）视黄酸及LE540在早期形觉剥夺性近视豚鼠后极部巩膜中的作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、视黄酸及RAR β在早期形觉剥夺性近视豚鼠后极部巩膜中的变化 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 主要实验试剂耗材及仪器 |
| 1.1.2 实验动物及模型制备 |
| 1.1.3 实验方法 |
| 1.1.4 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 屈光度变化 |
| 1.2.2 眼轴变化 |
| 1.2.3 RA的质量浓度变化 |
| 1.2.4 RAR β的Western印迹杂交电泳凝胶成像 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 形觉剥夺动物眼模型 |
| 1.3.2 视黄酸含量在形觉剥夺性近视眼巩膜中的变化 |
| 1.3.3 RAR β在形觉剥夺性近视眼巩膜中的变化 |
| 1.4 小结 |
| 二、外源性视黄酸及LE540在形觉剥夺性近视豚鼠巩膜中的作用 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 主要实验试剂耗材及仪器 |
| 2.1.2 实验动物及模型制备 |
| 2.1.3 实验方法 |
| 2.1.4 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 屈光度变化 |
| 2.2.2 眼轴变化 |
| 2.2.3 后极部巩膜组织病理切片及HE染色 |
| 2.2.4 MMP-2及Decorin的Western印迹杂交电泳凝胶成像 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 形觉剥夺、外源性视黄酸与LE540对豚鼠屈光状态影响的比较 |
| 2.3.2 形觉剥夺性近视眼后极部巩膜的病理学变化 |
| 2.3.3 MMP-2和Decorin在形觉剥夺性近视动物后巩膜中的变化 |
| 2.3.4 视黄酸及LE540对形觉剥夺性近视巩膜的影响 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 视黄酸在形觉剥夺性近视眼巩膜中作用的研究 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
（6）iNOS和MMP-2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达变化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 论文部分 iNOS和MMP-2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达变化 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述部分 形觉剥夺性近视分子机制的研究现状 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词索引 |
| 致谢 |
（7）MMP-2与TIMP-2在豚鼠近视眼脉络膜中表达的变化及机制的初步探讨（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 目录 |
| 前言 |
| 第一章 豚鼠形觉剥夺性近视眼脉络膜中MMP-2与TIMP-2表达的变化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂和仪器设备 |
| 1.2 实验动物与分组 |
| 1.3 动物模型建立及数据采集 |
| 1.4 获取眼球后极部组织 |
| 1.5 免疫组织化学染色测定MMP-2、TIMP-2在后极部组织的表达 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组屈光度及眼轴长度的比较: |
| 2.2 各组MMP-2及TIMP表达的比较: |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 第二章 视黄酸对豚鼠脉络膜中MMP-2与TIMP-2表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂和仪器设备 |
| 1.2 实验动物与分组 |
| 1.3 动物模型建立及数据采集 |
| 1.4 获取眼球后极部组织 |
| 1.5 免疫组织化学染色测定MMP-2、TIMP-2在后极部组织的表达 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组屈光度及眼轴长度的比较 |
| 2.2 各组MMP-2及TIMP表达的比较 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 视黄酸在眼球发育和近视眼形成中的作用 |
| 致谢 |
（8）高度近视阻止糖尿病视网膜病变发生的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 论文部分 高度近视阻止糖尿病视网膜病变发生的机制研究 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 糖尿病视网膜病变发病机制相关因素的研究进展 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 致谢 |
（9）NMDAR1与NO-cGMP视网膜信号传导通路对豚鼠形觉剥夺性近视的调控（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文对照 |
| 前言 |
| 第一章 豚鼠形觉剥夺性近视模型的建立及视网膜组织形态学观察 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 主要试剂和材料设备 |
| 1.1.2 实验动物分组 |
| 1.1.3 豚鼠形觉剥夺近视模型的建立 |
| 1.1.4 屈光度及眼轴长度检测 |
| 1.1.5 实验标本制备 |
| 1.1.6 光镜下视网膜形态学观察 |
| 1.1.7 电镜下视网膜超微形态学观察 |
| 1.1.8 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 屈光度变化 |
| 1.2.2 眼轴长度变化 |
| 1.2.3 光镜下视网膜各层厚度变化 |
| 1.2.4 光镜下视网膜形态学变化 |
| 1.2.5 视网膜电镜观察 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 豚鼠FDM模型与其他动物模型比较 |
| 1.3.2 FDM豚鼠视网膜形态学改变及其意义 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 NMDAR_1及 NO-cGMP信号传导通路在 FDM豚鼠视网膜上的表达 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验动物样本制备 |
| 2.1.2 主要试剂和材料设备 |
| 2.1.3 免疫组化染色法检测NMDAR_1表达 |
| 2.1.4 Western Blot检测NMDAR_1蛋白表达水平 |
| 2.1.5 RT-PCR检测NMDAR_1mRNA的表达水平 |
| 2.1.6 原位杂交法检测ncNOS的表达 |
| 2.1.7 放射免疫法检测cGMP的活性 |
| 2.1.8 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 视网膜NMDAR_1蛋白表达水平变化 |
| 2.2.2 视网膜NMDAR_1的mRNA表达水平变化 |
| 2.2.3 视网膜ncNOS的mRNA表达水平变化 |
| 2.2.4 视网膜cGMP的含量变化 |
| 2.2.5 视网膜ncNOS的表达与cGMP含量的相关分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 NMDAR_1在豚鼠FDM视网膜上的表达及其意义 |
| 2.3.2 FDM豚鼠视网膜上NO-cGMP信号传导通路的表达及其意义 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 NMDAR1拮抗剂MK801对豚鼠形觉剥夺性近视的调控 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要试剂和材料设备 |
| 3.1.2 实验动物分组 |
| 3.1.3 动物模型建立 |
| 3.1.4 屈光度及眼轴长度检测 |
| 3.1.5 实验动物样本制备 |
| 3.1.6 原位杂交法检测ncNOS的表达 |
| 3.1.7 NMDAR_1表达水平的检测 |
| 3.1.8 统计学方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 屈光度与眼轴长度变化 |
| 3.2.2 MK801对豚鼠FDM视网膜上ncNOSmRNA表达水平的影响 |
| 3.2.3 豚鼠视网膜上NMDAR_1表达水平的变化 |
| 3.2.4 MK801对豚鼠FDM视网膜上NMDAR_1mRNA表达水平的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 MK801对 FDM豚鼠屈光度、眼轴的影响 |
| 3.3.2 MK801对豚鼠视网膜ncNOS表达的影响 |
| 3.3.3 MK801对豚鼠视网膜NMDAR_1表达的影响 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 谷氨酸及其受体在眼科中的研究进展 |
| 致谢 |
| 作者攻读博士期间所发表的主要论文 |
（10）视网膜早基因c-fos在豚鼠实验性近视眼中的表达及其对TH调控作用的研究（论文提纲范文）
| 一、中文摘要 |
| 二、英文摘要 |
| 三、正文 |
| 前言 |
| 第一章 豚鼠形觉剥夺性近视动物模型的建立及眼球生长、屈光变化过程的动态观察 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 实验动物选择及分组 |
| 1.1.2 仪器设备 |
| 1.1.3 药物 |
| 1.1.4 方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 屈光度变化 |
| 1.2.2 眼轴变化 |
| 1.3 讨论 |
| 图 |
| 第二章 豚鼠形觉剥夺性近视模型视网膜中早基因c-fos、酪氨酸羟化酶及多巴胺的表达 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 仪器设备 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 正常豚鼠视网膜结构 |
| 2.2.2 视网膜c-fos蛋白和mRNA的变化 |
| 2.2.3 视网膜酪氨酸羟化酶(TH)蛋白和mRNA的变化 |
| 2.2.4 视网膜多巴胺(DA)含量及3,4-二羟基苯乙酸／多巴胺(DOPAC／DA)的变化 |
| 2.2.5 视网膜酪氨酸羟化酶(TH)表达与早基因(c-fos)表达的相关分析 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 早基因c-fos反义寡核苷酸诱导豚鼠实验性近视模型中c-fos的表达及其对酪氨酸羟化酶的调控 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 动物实验部分 |
| 3.1.2 分子生物学实验部分 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 屈光度变化 |
| 3.2.2 眼轴变化 |
| 3.2.3 视网膜c-fos蛋白和mRNA的变化 |
| 3.2.4 视网膜TH蛋白和mRNA的变化 |
| 3.2.5 视网膜多巴胺(DA)含量及3,4-二羟基苯乙酸／多巴胺(DOPAC／DA)的变化 |
| 3.2.6 视网膜酪氨酸羟化酶(TH)表达与早基因(c-fos)表达的相关分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 c-fos反义寡核苷酸对豚鼠屈光和眼轴的影响 |
| 3.3.2 c-fos反义寡核苷酸对豚鼠视网膜早基因c-fos、TH及DA表达的影响 |
| 四、总结 |
| 五、参考文献 |
| 六、综述1 |
| 七、综述2 |
| 八、攻读学位期间主要的研究成果 |
| 九、致谢 |
四、视网膜内源性NO在形觉剥夺性近视眼中的作用（论文参考文献）
- [1]信号通路在近视发病机制研究中的进展[J]. 牛宗镇,朱煌. 中华临床医师杂志(电子版), 2013(12)
- [2]MK801对近视视网膜NO-cGMP信号通路的调控[J]. 文丹,刘双珍,毛俊峰,谭星平,夏朝华,尹楚南. 中南大学学报(医学版), 2012(07)
- [3]bFGF和iNOS在小鼠形觉剥夺性近视眼视网膜中表达及作用的研究[D]. 王沙. 中南大学, 2010(02)
- [4]早期生长反应因子-1在小鼠近视眼形成中的研究[D]. 蒋晶晶. 中南大学, 2010(11)
- [5]视黄酸及LE540在早期形觉剥夺性近视豚鼠后极部巩膜中的作用[D]. 赵小云. 天津医科大学, 2010(04)
- [6]iNOS和MMP-2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达变化[D]. 孙宏亮. 郑州大学, 2009(02)
- [7]MMP-2与TIMP-2在豚鼠近视眼脉络膜中表达的变化及机制的初步探讨[D]. 吴振凯. 中南大学, 2009(04)
- [8]高度近视阻止糖尿病视网膜病变发生的机制研究[D]. 孔晓路. 郑州大学, 2009(02)
- [9]NMDAR1与NO-cGMP视网膜信号传导通路对豚鼠形觉剥夺性近视的调控[D]. 文丹. 中南大学, 2007(01)
- [10]视网膜早基因c-fos在豚鼠实验性近视眼中的表达及其对TH调控作用的研究[D]. 魏欣. 中南大学, 2006(01)