一、EGF,Genistein对垂体瘤细胞膜PI转换的影响（论文文献综述）
胡琼瑶[1]（2021）在《胰岛素样生长因子与表皮生长因子在草鱼垂体中的功能研究》文中研究说明胰岛素样生长因子（IGF）和表皮生长因子（EGF）广泛分布于机体各个部位,是生长因子家族中的重要成员,在生物体内发挥着重要功能。IGF通过结合胰岛素样生长因子绑定蛋白（IGFBP）发挥生理功能,体内大多数IGF呈IGF/IGFBP复合物的形式,只有少数以游离形式存在。目前,关于IGF和EGF在鱼类中的功能主要聚焦在肝脏和性腺组织中,而其在垂体中的具体功能尚不清楚。基于此,本论文以草鱼为研究对象,系统阐释IGF1/IGFBP1a和EGF在硬骨鱼类垂体中的功能。具体结果如下:1、IGF1/IGFBP1a参与调控草鱼垂体LH和FSH表达。首先,通过克隆得到草鱼IGFs（IGF1、IGF2a、IGF2b、IGF3）和IGFBP1（IGFBP1a、IGFBP1b）基因。序列比对结果显示草鱼IGFs家族序列高度保守,哺乳动物和草鱼IGFBP1a在C末端和N末端区域高度保守,但在连接域中均不保守。组织表达分析结果显示IGFBP1a主要在草鱼垂体、肾脏、脾脏中高表达。利用免疫组化对IGFBP1a在草鱼垂体中的具体分布位置进行进一步定位,结果显示IGFBP1a广泛分布于后腺垂体区中的神经垂体区,预示IGFBP1a可能在垂体中发挥重要功能。基于此,利用IGF1和IGFBP1a分别处理草鱼垂体原代培养细胞,转录组分析结果显示IGF1和IGFBP1a能够分别诱导草鱼垂体中786个和616个差异基因表达,这些差异基因主要参与了细胞生长、发育过程、免疫反应等重要生理功能。接着,以草鱼垂体原代培养细胞为研究对象,进一步检测发现IGF1能够以时间和剂量依赖性方式促进LHβ和FSHβ的表达,而IGFBP1a则以时间和剂量依赖性方式抑制LHβ和FSHβ的表达。此外,IGF1和IGFBP1a共同处理草鱼垂体细胞后,发现IGFBP1a能够阻断IGF1对LHβ和FSHβ的诱导作用,并且IGFBP1a能够显着抑制IGF1对ERK和AKT的磷酸化激活水平。综上结果表明IGFBP1a对垂体LHβ和FSHβ表达的抑制作用是通过阻断内源性IGF1的作用实现的。2、EGF能够直接诱导草鱼垂体中UTS1、EGR1和MMP13的表达。EGF是一种6k Da的小分子蛋白,含有53个氨基酸,通过与其受体ErbBs结合在细胞增殖、分化和卵泡形成过程中发挥重要作用。在哺乳动物和鱼类中,关于EGF的功能研究主要集中在乳腺和性腺组织,而其在垂体中的功能研究较少。基于此,以草鱼垂体细胞为研究模型,首先,转录组分析结果显示EGF诱导垂体差异表达基因主要富集在金属离子绑定、癌症相关通路和代谢等相关通路上。其次,离体实验进一步证实EGF能够以时间和剂量依赖性的方式显着诱导草鱼垂体细胞中UTS1、EGR1和MMP13的表达。接着,受体后信号通路研究显示EGF通过结合ErbB1和ErbB2受体,并激活其受体后MEK/ERK和PI3K/AKT/m TOR通路促进UTS1和EGR1的表达,而EGF对MMP13的调节作用则是通过结合ErbB1受体并激活其受体后MEK/ERK通路完成的。
张顺立[2]（2021）在《多巴胺激动剂溴隐亭通过促进细胞程序性坏死途径治疗垂体泌乳素腺瘤》文中指出溴隐亭是治疗垂体泌乳素瘤最常用的多巴胺激动剂（DA）,可有效减少垂体泌乳素瘤的肿瘤大小,但其机理尚未完全明了。细胞凋亡已被广泛认为参与溴隐亭引起的肿瘤体积缩小机制。然而,是否还有其他非凋亡性细胞死亡参与溴隐亭缩小肿瘤体积的机制尚不清楚。新近发现的程序性坏死（necroptosis）的分子机制研究,为检查溴隐亭药理学功能中是否可诱导肿瘤细胞坏死提供了可能。本研究的目的是观察和研究程序性坏死在溴隐亭诱导的垂体泌乳素瘤瘤体缩小中的潜在机制。通过免疫组织化学研究,我们发现在溴隐亭治疗后垂体泌乳素瘤患者的瘤体组织中,受体相互作用的丝氨酸-苏氨酸激酶3（RIP3）和磷酸化的混合谱系激酶域样蛋白（p MLKL）阳性细胞数量增加,阳性信号的表达强度也增加。为进一步探讨溴隐亭的作用机制,我们采用泌乳素瘤细胞系（MMQ细胞）研究了体外程序性坏死的机制研究。结果显示,溴隐亭处理后,MMQ细胞的细胞活性和ATP水平降低,而活性氧（ROS）水平升高。坏死抑制剂（necrostatin-1）,可以部分逆转上述作用。超微结构研究进一步证实溴隐亭可诱导MMQ细胞发生程序性坏死,其特征是细胞膜破裂,细胞质溶解,尤其是线粒体肿胀。此外,我们的进一步研究结果表明,磷酸甘油酸突变酶家族5（PGAM5）/亲环素D（CypD）通路参与溴隐亭诱导的RIP3/MLKL依赖性的泌乳素瘤细胞程序性坏死。以上结果提示,细胞程序性坏死可能成为泌乳素瘤临床治疗的新靶标。本研究由以下四个部分组成:第一部分:溴隐亭可诱导人垂体泌乳素瘤组织中RIP3和p MLKL的表达随机选取12例人垂体泌乳素瘤患者瘤体组织纳入本研究。其中,有6个样本来自手术前接受溴隐亭治疗的患者,其他6个样本来自未经溴隐亭治疗的患者。结果显示,溴隐亭治疗后催乳素（PRL）水平降低、肿瘤缩小,这与以前的研究一致。我们进一步研究了细胞程序性坏死是否参与溴隐亭缩小瘤体的机制。免疫组化染色结果显示,程序性坏死相关蛋白RIP3的阳性染色信号可定位在泌乳素瘤细胞的胞质和胞膜。定量分析结果表明,与未使用溴隐亭治疗的患者相比,使用溴隐亭治疗的患者泌乳素瘤瘤体组织汇中RIP3阳性细胞数量及其免疫荧光强度（IFI）显着增加。同时,程序性坏死的另一种关键介质p MLKL也可定位于细胞膜上,统计结果显示溴隐亭治疗后泌乳素瘤组织中p MLKL的表达显着增加。以上结果表明,溴隐亭可诱导垂体泌乳素瘤瘤体组织中程序性坏死关键蛋白RIP3和p MLKL的表达,提示溴隐亭可能诱导泌乳素瘤细胞发生程序性坏死。第二部分:溴隐亭可抑制大鼠垂体泌乳素瘤细胞（MMQ）活性并诱导程序性坏死相关指标本部分实验,我们首先采用CCK-8测定溴隐亭处理后泌乳素瘤MMQ细胞的活性。以0μM至100μM的不同剂量溴隐亭处理MMQ细胞,我们发现溴隐亭以剂量依赖性方式抑制MMQ细胞的活性,而100μM是产生最大效应的剂量浓度。另外,我们研究了溴隐亭对MMQ细胞活性的抑制是否具有时间依赖性。结果显示,24小时和48小时处理,MMQ细胞活性间没有显着性差异。因此,后续试验采用100μM溴隐亭处理24小时的条件。然而,细胞活性降低可能是由不同形式的细胞死亡引起的。鉴于前面的结果,我们检查了细胞程序性坏死的两个指标ROS和ATP的水平,以观察程序性坏死是否参与了MMQ细胞活性降低。结果显示,MMQ细胞的ROS水平提高了1.8倍而ATP水平降低了2.1倍,而Necrostatin-1可以显着抑制这种作用。此外,免疫细胞化学染色结果表明,溴隐亭治疗后,MMQ细胞中RIP3和p MLKL的荧光强度及阳性细胞数显着增加,而Necrostatin-1可部分抑制该作用。结果表明,溴隐亭可以诱导MMQ细胞的RIP3/MLKL依赖性坏死。为进一步研究溴隐亭的作用是否通过RIP3/MLKL信号介导,我们设计了针对RIP3和MLKL的si RNA沉默序列。结果表明,下调RIP3和MLKL可显着逆转溴隐亭诱导的MMQ细胞中细胞程序性坏死相关生化指标ROS和ATP水平变化。以上数据表明,溴隐亭诱导的MMQ细胞程序性坏死至少部分依赖于RIP3/MLKL信号。第三部分:超微结构研究证实溴隐亭确可诱导MMQ细胞发生程序性坏死为进一步证实溴隐亭处理可诱导MMQ细胞发生程序性坏死,我们采用电子显微镜技术研究了MMQ细胞的超微结构变化。结果显示,用溴隐亭处理的MMQ细胞中,发生坏死的细胞数量显着增加,其超微结构特点表现为典型的细胞坏死样改变,如细胞内水肿、细胞质溶解及细胞膜破裂。另外,与对照组相比,溴隐亭处理后的MMQ细胞中出现了大量肿胀线粒体,以上作用可部分被程序性坏死抑制剂Necrostatin-1所抑制。以上研究分别从细胞内生化改变、坏死相关蛋白表达检测及电子显微镜超微结构研究证实了溴隐亭处理可诱导泌乳素瘤细胞发生程序性坏死。第四部分:PGAM5-CypD通路参与溴隐亭诱导泌乳素瘤细胞程序性坏死上一部分的电镜研究显示,坏死MMQ细胞的形态特征不仅表现为细胞膜破裂、细胞质溶解,还存在大量线粒体明显受损、肿胀,提示溴隐亭诱导的MMQ细胞坏死可能与线粒体功能障碍有关。考虑到在病理条件下,RIP3的两个下游信号分子PGAM5和CypD可参与线粒体的肿胀和破裂,我们进一步检测了PGAM5-CypD通路是否参与溴隐亭诱导的MMQ细胞的程序性坏死。Western blot结果显示,Necrostatin-1能显着降低溴隐亭诱导的MMQ细胞中PGAM5和CypD表达,与RIP3和p MLKL的变化一致。此外,溴隐亭对总MLKL和CypD的表达水平没有影响。为进一步探讨PGAM5-CypD通路在溴隐亭诱导的RIP3/p MLKL依赖的程序性坏死中的作用,我们采用免疫共沉淀技术,在溴隐亭诱导的MMQ细胞中验证了p-CypD和RIP3之间存在蛋白质-蛋白质相互作用。进一步采用PGAM5和CypD的si RNA进行干预研究,结果发现,下调PGAM5和CypD可显着抑制溴隐亭诱导的MMQ细胞程序性坏死。以上数据表明,PGAM5-CypD信号参与溴隐亭诱导的MMQ细胞程序性坏死
张溢华[3]（2019）在《垂体腺瘤术后复发的危险因素分析及PVT1在垂体腺瘤进展中的实验研究》文中提出垂体腺瘤发病率高,是常见的颅内肿瘤,大多数腺瘤被认为是良性的,经药物治疗、手术治疗或辅助放射治疗等常规治疗方法可获得痊愈,但仍有一部分垂体腺瘤患者因术后复发或残瘤再生长,难以治愈,严重者预后差,甚至危及生命。大约35%的垂体腺瘤在影像学上表现为侵袭性生长,2017年6月出版的WHO垂体肿瘤新分类取消了既往认为容易复发的“非典型垂体腺瘤”的分类,在描述中将肿瘤增殖（Ki-67指数和有丝分裂计数）和肿瘤侵袭行为作为预测临床预后的重要因素。目前,关于侵袭性垂体腺瘤的诊断尚未形成共识,仅在影像学上利用Hardy分类、改良Hardy分类和Knosp分类等分级系统来评估垂体腺瘤的侵袭性,对垂体腺瘤侵袭性行为的认识和预测仍然是一个挑战。垂体腺瘤的发生发展包括外在因素和内在因素,目前研究表明,家族性垂体综合征有明确的基因缺陷,但绝大多数垂体腺瘤为散发性腺瘤。据报道,散发性垂体腺瘤发生基因组和表观遗传异常会自引起分泌和旁分泌信号,以及细胞周期调节、信号转导、转录调节因子和miRNAs的改变,肿瘤抑制因子异常丢失,癌基因的过度表达,细胞周期的失调和细胞增殖的促进而发生转化。既往文献研究表明,侵袭性的分子基础非常复杂,涉及多种基因,蛋白质和信号通路,再加上垂体腺瘤的亚型分泌的激素在很多方面都不同,垂体腺瘤的发生进展机制有待于进一步阐明。长链非编码RNA（LncRNAs）转录自至少75%的人类基因组,它们在基因调控和维持基因组稳定性方面发挥重要作用并影响各种细胞过程,包括生存、增殖和迁移,有研究发现在零细胞腺瘤中LncRNA c5orf66-as1的表达低于正常垂体组织,侵袭性腺瘤中LncRNA c5orf66-as1的表达低于非侵袭性腺瘤,表明LncRNA c5orf66-as1抑制了垂体腺瘤的发展和侵袭。还有文献表明在非功能性垂体腺瘤中,侵袭性腺瘤与非侵袭性腺瘤相比增殖细胞核抗原的mRNA与meg3-LncRNA水平呈负相关,meg3和hotair的表达可能与非功能性垂体腺瘤的发展和侵袭有关。另外还有文献报道生长激素细胞腺瘤的侵袭与LncRNA H19水平呈正相关。目前,LncRNA PVT1对多种肿瘤的增殖、侵袭、转移具有促进作用,被认为是一种促癌基因,然而其对垂体腺瘤的增殖、侵袭转移的作用尚未见报道。为了深入研究LncRNA PVT1在垂体腺瘤的增殖、侵袭转移的作用与机制,本研究首先对垂体腺瘤术后复发的危险因素进行分析,然后利用垂体腺瘤临床组织标本和垂体腺瘤细胞系来检测侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤组织标本、垂体腺瘤细胞系GH3和HP75中PVT1表达水平,实验研究PVT1对垂体腺瘤细胞系GH3和HP75生长增殖、克隆形成能力和侵袭迁移能力以及PVT1对β-连环蛋白、C-myc和细胞周期蛋白D1等标志物表达的影响。本研究基于LncRNA PVT1在侵袭性垂体腺瘤中的作用,以期为垂体腺瘤的研究提供了理论基础和新的靶点。研究内容与方法:第一部分垂体腺瘤术后复发的危险因素分析1.收集从2015年8月至2017年8月在陆军特色医学中心大坪医院神经外科首次接受手术治疗的垂体腺瘤121例,平均随访19.59±15.57月,根据复发或残瘤生长分为未复发组和复发组,使用单因素分析和多因素logistic回归分析,探讨性别、年龄、肿瘤体积、肿瘤最大径、肿瘤增殖能力指标、病理类型、手术方式、切除程度对垂体腺瘤术后复发的影响。第二部分LncRNA PVT1在侵袭性垂体腺瘤组织和垂体腺瘤细胞中表达水平变化1.垂体腺瘤组织收集:2017年7月至2018年7月从陆军特色医学中心大坪医院神经外科接受神经内镜经鼻蝶手术治疗的垂体腺瘤患者中,收集到36例侵袭性垂体腺瘤组织,50例非侵袭性垂体腺瘤组织。另备两个垂体腺瘤细胞株（GH3和HP75）以及正常细胞株NHPG细胞。采用qRT-PCR分析垂体腺瘤组织、垂体腺瘤细胞株和正常细胞株的PVT1相对表达水平。第三部分LncRNA PVT1对垂体腺瘤细胞的增殖、成瘤、迁移的作用1.构建pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2载体,以空白载体为对照,将HP75和GH3细胞转染后,确认其转染效率以及PVT1表达水平抑制效率,将pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2及空白质粒转染HP75和GH3细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况、用平板克隆法检测HP75和GH3细胞的克隆形成能力、用Transwell侵袭实验检测HP75和GH3细胞的侵袭迁移能力。第四部分PVT1对垂体腺瘤细胞β-连环蛋白、c-myc、细胞周期蛋白D1以及细胞间质转化标志蛋白表达水平的作用1.采用Western blotting检测在侵袭性垂体腺瘤组织和非侵袭性垂体腺瘤组织中Wnt/β-连环蛋白信号通路相关分子β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc表达水平。2.采用Western blotting检测在垂体腺瘤细胞HP75和正常细胞NHPG中Wnt/β-连环蛋白信号通路相关分子β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc表达水平。3.将sh-PVT1质粒和空白对照转染垂体腺瘤细胞HP75和GH3,采用Western blotting检测垂体腺瘤细胞HP75和GH3中Wnt/β-连环蛋白信号通路相关分子β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc表达水平。4.将sh-PVT1质粒和空白对照转染垂体腺瘤细胞HP75和GH3,采用Western blotting检测了垂体腺瘤细胞HP75和GH3中E-cadherin和N-cadherin分子表达水平,研究PVT1对垂体腺瘤细胞HP75和GH3间质转化的影响。研究结果:第一部分影响垂体腺瘤术后复发的危险因素分析单因素分析结果发现复发组年龄低于未复发组年龄（P<0.05）;复发组肿瘤体积和肿瘤最大径大于未复发组（P<0.05）;复发组肿瘤侵袭率高于未复发组（P<0.05）;复发组肿瘤增殖率高于未复发组（P<0.05）;切除程度比较,全切患者复发率最低（P<0.05）。术后残余肿瘤行伽玛刀治疗可降低复发率（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果发现肿瘤侵袭是垂体腺瘤术后复发的独立危险因素（P<0.05）。第二部分PVT1在侵袭性垂体腺瘤组织和垂体腺瘤细胞中表达的变化1.与非侵袭性垂体腺瘤组织相比,侵袭性垂体腺瘤组织中PVT1的表达显着增高。2.PVT1在GH3细胞和HP75细胞的表达水平比NHPG细胞中的表达水平显着升高。第三部分抑制PVT1抑制对垂体腺瘤细胞的增殖、成瘤、迁移的影响1.pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2载体转染效率均达80%,抑制PVT1的抑制效率60%-70%。2.抑制PVT1对垂体腺瘤细胞增殖的影响:将pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2及空白质粒转染HP75和GH3细胞。MTT法检测结果显示,pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2转染HP75和GH3细胞后,均能抑制HP75和GH3细胞生长。3.抑制PVT1对垂体腺瘤细胞克隆形成能力的影响:将pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2及空白质粒转染HP75和GH3细胞,平板克隆法检测结果显示,pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2转染HP75细胞后,均能抑制HP75和GH3细胞克隆形成能力。4.抑制PVT1对垂体腺瘤细胞侵袭迁移能力的影响:将pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2及空白质粒转染HP75和GH3细胞,Transwell侵袭实验检测结果显示,pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2转染HP75和GH3细胞后,均能抑制HP75和GH3细胞侵袭迁移能力。第四部分抑制PVT1对垂体腺瘤细胞β-连环蛋白、c-myc、细胞周期蛋白D1以及细胞间质转化标志蛋白表达水平的影响1.β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc在侵袭性、非侵袭性这两种垂体腺瘤组织的相对表达情况:和后者相比,前者的β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc的表达显着增加（p<0.05）。2.β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc在垂体腺瘤细胞HP75及正常细胞NHPG中相对表达水平:与正常细胞NHPG相比,垂体腺瘤细胞HP75中β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc这些分子的表达显着增加（p<0.05）。3.PVT1对垂体腺瘤细胞HP75和GH3中Wnt/β-连环蛋白信号通路相关分子的影响:与空白质粒对照相比,sh-PVT1质粒转染的垂体腺瘤细胞HP75和GH3中β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc这些分子的表达显着降低（p<0.05）。4.抑制PVT1表达抑制垂体腺瘤细胞HP75和GH3间质转化:与空白质粒对照相比,sh-PVT1质粒转染的垂体腺瘤细胞HP75和GH3中E-cadherin蛋白的表达显着升高（p<0.05）,N-cadherin蛋白的表达显着降低（p<0.05）。结论:1.提高肿瘤全切除率是预防垂体腺瘤复发的有效方式,术后肿瘤残余及时行伽玛刀治疗有助于降低残余肿瘤的复发。肿瘤侵袭性生长是复发的独立危险因素,年轻患者需要延长术后随访期限。2.PVT1在侵袭性垂体腺瘤组织和垂体腺瘤细胞中高表达,在垂体腺瘤发生进展、侵袭转移中具有促进作用。3.pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2可成功转染HP75和GH3细胞、表达GFP荧光蛋白,成功抑制PVT1的表达。pcDNA3.1-sh-PVT1#1、pcDNA3.1-sh-PVT1#2可成功抑制下调HP75和GH3细胞内的PVT1水平。抑制PVT1的表达可降低HP75和GH3细胞生长增殖、克隆形成能力和侵袭迁移能力。4.Wnt/β-连环蛋白信号通路在侵袭性垂体腺瘤组织和垂体腺瘤细胞中可能被激活。降低PVT1水平可抑制Wnt/β-连环蛋白信号通路在垂体腺瘤细胞HP75和GH3中激活。抑制PVT1的表达可通过β-连环蛋白、c-myc和细胞周期蛋白D1的表达调节垂体腺瘤细胞系HP75和GH3的增殖、迁移和上皮间质转化。
周和平[4]（2018）在《GH型垂体腺瘤合并心肌病临床疗效探讨及Notch信号通路在GH型垂体腺瘤中的作用研究》文中指出生长激素型垂体腺瘤是垂体腺瘤中常见功能性肿瘤,起源于垂体前叶,文献报道占垂体腺瘤的20%～30%,除引起头痛、呕吐、视物模糊、视野缺损等肿瘤压迫症状外,由于长期过度分泌生长激素（growth hormone,GH）、胰岛素样生长因子-1（Insulin-like growth factors,IGF-1）,引起内分泌代谢紊乱,若发生在青春期后,以软组织、骨骼、内脏的增生肥大为主要特征。心脏疾病在GH型腺瘤患者中较常见,GH型腺瘤合并心肌病是发生在肢端肥大症患者的一种特殊类型的心肌病。长期过度分泌的GH、IGF-1可导致心肌肥厚、心脏扩大、心律失常、心功能减退等心脏结构和功能异常,严重影响患者健康和生活质量,甚至死亡。因此,本论文第一部分通过临床病例回顾性分析探讨其临床疗效,提高诊疗水平。垂体腺瘤各亚型虽都起源于垂体前叶,但它们各有特点,临床表现差异很大,既可表现为肢端肥大症或巨人症及Cushing症,也可表现为闭经、泌乳或性功能低下等。既有共性,又有差异,各种类型具体发病机制尚不确定。生长激素型垂体腺瘤起病隐匿,危害性大,在肿瘤病因学中,生长激素腺瘤的发生发展具体机制仍不十分清楚,目前研究热点放在外部环境促使肿瘤细胞生长的信号通路中。Notch信号通路是一种高度保守的信号通路,介导细胞之间的信号传递,通过Notch信号通路精确调节细胞的增殖、分化、吞噬及凋亡等,对大多数器官组织的正常发育至关重要。目前,关于Notch信号通路各个信号分子中,Notch1、Notch3、Hes1在通路信号转导中最为重要,起关键作用。受体Notch1、Notch3等及下游靶基因Hes1在生长激素型垂体腺瘤组织中的表达及意义临床研究不多,因此,本课题将进行相关基础及临床研究。第一部分 GH型垂体腺瘤合并心肌病临床疗效探讨目的回顾性分析GH型垂体腺瘤合并心肌病患者的临床特点,内分泌学水平、影像学特征,探讨其治疗及临床疗效。方法归纳分析苏州大学附属第一医院和安徽医科大学附属安庆医院神经外科2010年1月-2017年12月经手术治疗的GH型垂体腺瘤合并心肌病患者86例。手术前后行垂体激素、颅脑磁共振、心脏功能生化评估、超声心动图等相关检查。无创方式检测手术前、后血清生长激素、胰岛素样生长因子-1,左室舒张末期内径（LVIDd）、室间隔厚度（IVST）、左室后壁厚度（LVPWT）、左室射血分数（EF）、二尖瓣血流频谱（E/A比值）,并进行对比分析,总结归纳,探讨其诊断及治疗。结果1.86例病例中,微腺瘤23例,大腺瘤27例,巨大腺瘤36例。侵袭性腺瘤28例,非侵袭性腺瘤58例。通过手术治疗,肿瘤全切除51例,次全切除25例,大部分切除8例,部分切除2例。2.经过手术治疗后大部分病例临床症状改善,远期随访治愈率为39.17%,缓解率为 77.29%。术前 GH 均值（31.23±3.29）ng/ml,IGF-1 均值（782.6±38.7）ng/ml,术后GH、IGF-1水平明显下降,术后GH均值（12.07±1.25）ng/ml,IGF-1均值（126.8±17.5）ng/ml,同术前相比有统计学差异（P<0.01）。3.手术后心脏功能明显改善,血清学检测B型心房钠尿肽及肌钙蛋白水平较术前明显下降,术前BNP均值（376.3±18.1）pg/ml,Tn均值（38.7±5.2）pg/ml,术后BNP均值（86.2±7.5）)pg/ml,Tn均值（7.31±1.8）pg/ml,有统计学差异（P<0.05）。同时心脏超声检测提示LVIDd、IVST、LVPWT、EF、E/A值较术前有明显改善（P<0.05）.结论1.GH型垂体腺瘤合并心肌病大部分病例通过积极的治疗能够达到满意的疗效。2.手术能较好切除肿瘤,良好控制激素水平,同时能显着改善心脏结构和功能。第二部分 Notch1、Notch3蛋白在GH型垂体腺瘤中的表达及意义目的通过免疫组化、Western Blot和Real Time PCR检测GH型垂体腺瘤中的Notch1、Notch3蛋白和mRNA的表达水平,探讨Notch信号通路是否参与GH型垂体腺瘤的致病过程。方法收集GH型垂体腺瘤患者临床标本38例,同时收集21例无功能垂体腺瘤和25例泌乳素垂体腺瘤。通过免疫组化、Western Blot和Real Time PCR方法检测各亚型组中的Notch1、Notch3蛋白和mRNA的表达水平。结果1.通过免疫组化发现,Notch1、Notch3蛋白在各种亚型垂体腺瘤中都有不同程度的表达,在GH型垂体腺瘤组中Notch1、Notch3蛋白呈强阳性表达;而在无功能垂体腺瘤和泌乳素垂体腺瘤组中呈轻度表达。2.通过Western Blot、Real Time PCR检测发现GH型垂体腺瘤组中Notch1、Notch3蛋白和mRNA表达量最高,而在无功能垂体腺瘤和泌乳素垂体腺瘤组中呈低表达,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论1.Notch1、Notch3在不同亚型垂体腺瘤中表达水平不一,在GH型垂体腺瘤中表达最高。2.Notch1、Notch3作为Notch信号通路的重要组成部分,在GH型垂体腺瘤发生、发展中起重要促进作用。第三部分 Notch信号靶基因Hes1在GH型垂体腺瘤中的表达及意义目的通过检测Notch1、Notch3靶基因Hes1在GH型垂体腺瘤中的转录mRNA和蛋白表达水平,进一步证实Notch信号通路在GH型垂体腺瘤中的作用。方法通过Western Blot和Real Time PCR检测GH型垂体腺瘤组织中的Hes1转录蛋白和mRNA表达水平,并同时检测无功能腺瘤和泌乳素腺瘤组中的Hes1表达水平。结果1.Western Blot检测在GH型垂体腺瘤中Hes1蛋白相对表达量分别为（1.025±0.121）,无功能腺瘤组中为（0.426±0.018）,泌乳素腺瘤组中为（0.512±0.033）,在GH型垂体腺瘤中表达最高,无功能腺瘤组中最低,差异具有统计学意义（P<0.05）。2.Real Time PCR检测GH型垂体腺瘤中的Hes1基因转录mRNA相对表达量为（0.736±0.032）,而泌乳素腺瘤中为（0.428±0.045）,无功能腺瘤组中为（0.352±0.028）,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论1.Hes1基因转录在GH型垂体腺瘤中表达最高,Notch1、Notch3活化后可以促进Hes1基因转录来发挥促进作用。2.Hes1基因在GH型垂体腺瘤中发挥重要作用,调控肿瘤的发生、发展,有望成为GH型垂体腺瘤治疗的分子靶点。
宋智健[5]（2017）在《肿瘤的致病机理和药物重定位研究》文中进行了进一步梳理复杂疾病严重危害人民的生命健康,是目前现代医学研究中一道难以逾越的关卡。它并不遵循简单的孟德尔遗传模式,而是由多种因素共同作用（包括多个基因、单个基因的多个突变、基因与环境表观因素相互作用等）所导致的疾病。肿瘤属于一种典型的复杂疾病,受到多种基因和环境因素的交互影响,其基因组高度复杂的遗传模式和异质性的特点使得传统用于复杂疾病研究的GWAS方法在肿瘤中收效甚微。二代测序技术凭借其高通量、单碱基分辨率等突出优势,在肿瘤基因组研究中脱颖而出,大大加速了人们对肿瘤发生发展转移机制的认识,也为肿瘤的靶向药物精准治疗提供了基石。本研究论文围绕着肿瘤疾病的遗传机制和药物重定位主题的3个子课题开展研究。课题一是关于垂体瘤的外显子测序研究,我们首次绘制了涵盖垂体瘤7种亚型的全外显子基因突变图谱,总共发现412个基因突变位点,分别证实了GNAS和USP8基因在GH和ACTH垂体瘤亚型中属于高频突变（突变率>50%）;还发现KIF5A、GRB10、SP100等可能与垂体瘤发生相关的新基因。其次,我们首次全面的展示了垂体瘤的体细胞拷贝数变异图谱,发现了9q34.11、16p13.3、3p21.31、7q21.11、16q12.2等区域的染色体大片段扩增与缺失。再次,我们对突变基因的通路富集分析发现了各个垂体瘤亚型之间的关联性,ACTH型、GH型、PRL型、多激素混合型和无功能型之间通过某些通路形成一个子网络,而GT型和TSH型垂体瘤则通过其他通路串成另一个子网络,这一发现可能暗示不同垂体瘤亚型之间的发生机制存在某些共性;此外,本研究还探索了可用于垂体瘤治疗的靶向药物,筛选了垂体瘤发生相关的7条信号通路上共48种特异性靶向药物,覆盖28%的肿瘤样本。最后,我们分析了垂体瘤的侵袭和耐药临床表型与突变基因间的相关性,发现含有GNAS突变的肿瘤,不但与GH型垂体瘤的侵袭性及大小呈现负相关,还普遍对生长抑素类似物敏感;含USP8突变的肿瘤也与ACTH型垂体瘤的侵袭性及大小呈负相关。课题二进行了胰腺癌外显子测序研究,本研究中构建了50例汉族人胰腺癌体细胞基因组突变和拷贝数变的图谱,确认了胰腺癌中常见的KRAS,TP53,SMAD4和CDKN2A等基因的高频突变。另外,我们还发现了ELF3,MKRN3,NF1等胰腺癌新基因频发突变,这些突变在汉族人胰腺癌队列中出现的频率大于5%,属于较高频突变。最值得注意的是,ELF3基因存在3个编码框移码突变,属于功能失活的突变模式,且该基因尚未在胰腺癌中报道过。而且,我们发现胰腺癌样本中ELF3突变与KRAS/TP53突变的发生是互斥的,意味着拥有该突变的肿瘤发生机制与胰腺癌最常见的KRAS激活突变依赖于RAS通路的机制可能完全不同。ELF3作为一种转录激活因子,可反式激活TGFBR2,β-catenin等基因,这些基因是TGF-β信号通路,WNT/β-catenin信号通路等这些胰腺癌中常发生的重要激活通路中的关键基因。故此,我们推测ELF3的失活在胰腺癌的发生过程中起着重要的作用。其次,我们还开展了胰腺癌体细胞拷贝数异常分析,总共鉴定了23个重复扩增和66个重复丢失区域。其最阳性的扩增区域属染色体14q32.31（Q=5.30E-27）,该区域中存在大量的MIR329-1,MIR329-2,MIR494,MIR495,MIR758,MIR543,MIR1193A,这些微小RNA的扩增与肿瘤的发生发展可能密切相关,也许有望成为胰腺癌检测的诊断标志物。另外显着缺失的染色体臂有9p21.3（包括CDKN2A,CDKN2B基因）和3p21.31（Q=8.74E-06,SMARCC1）也被报道与胰腺癌的发生相关。再次,我们整合了来自多个中心的胰腺癌数据,总共764个突变样本来进行胰腺癌低频率突变基因的挖掘,一共得到46个新的显着突变基因,如RREB1（2%）,PEG3（2%）,NFKBIZ（1%）,EEF2（1%）等,尽管这些基因在胰腺癌中出现突变频率并不高,但它们可能是胰腺癌发生发展相关的驱动基因。最后,本研究还对胰腺癌的作用通路进行了分析,归纳了10条和胰腺癌发生发展转移等过程相关的通路,这10条通路在蛋白质相互作用子网络上彼此连接紧密。其中,胰腺分泌通路和磷脂酶D信号通路是我们在胰腺癌中新发现的通路,可能与胰腺癌的分泌,增殖和侵袭等生物学功能相关。本研究为胰腺癌的进一步研究提供了方向与线索,并最终为胰腺癌的早期诊断和个性化干预治疗提供指导。课题三进行了泛肿瘤基因组药物重定位研究,该研究整合收集了来自于32个组织或器官的52种原发灶肿瘤类型共17,567个已发表的人类肿瘤全基因组和全外显子组体细胞突变数据,以及文献中报道的体细胞拷贝数变异基因和融合基因,开展了泛肿瘤基因组分析,得到969个肿瘤相关驱动基因。发现了一些新的肿瘤驱动基因,如CHD5,TENM1,BRINP3等在不同类型肿瘤中有较高（>5%）的突变率。此外,我们还整理了Drugbank,KEGG等药物数据库1487种FDA批准的药物共1675个靶点。开展了针对肿瘤驱动基因的药物直接靶点重定位分析,发现95种FDA批准的抗癌药物直接靶向66个驱动基因,该结果扩展了已知的抗肿瘤药物可适用于不同类型肿瘤靶向治疗的可能性。此外,我们还发现了82种适应症并不是肿瘤的药物可以直接靶向55种驱动基因,这些可能会成为新的抗肿瘤药物。上述直接靶向的肿瘤驱动基因的药物,最多可以使核心队列中的59%肿瘤患者受益。此外,为了能最大限度地利用现有药物实现肿瘤靶向治疗,我们还提出了一种新的分析法:基于蛋白相互作用网络的肿瘤药物重定位方法。该方法兼顾考虑药物的直接和间接靶点,对每种FDA批准的现有药物的直接靶点或与其相互作用蛋白的间接靶点是否为肿瘤驱动基因进行逐一累加打分,并与随机背景做比较进行多重置换检验。我们运用该方法对969个肿瘤驱动基因进行药物重定位,得到90种候选的抗肿瘤药物。检索文献又发现有34种（37.8%）预测药物被报道具有潜在的抗肿瘤能力,另外有13种药物（14.4%）显示其副作用有导致肿瘤发生的风险。最后,为了进一步证实药物重定位预测结果的准确性,我们选择了与IPA细胞激活通路相匹配的8种药物进行了抗肿瘤细胞增殖实验,检测后发现有6个药物分别是尼卡地平（Nicardipine）,异丙嗪（Promethazine）,依托孕烯（Etonogestrel）,去氧孕烯（Desogestrel）,左炔诺孕酮（Levonorgestrel）和舒林酸（Sulindac）对与不同类型的肿瘤细胞株体现出显着的增殖抑制作用。最后,我们还用该方法对各个肿瘤类型分别进行药物重定位,确定了139种显着药物能靶向连接51种肿瘤类型。
李倩[6]（2016）在《Eps8在宫颈癌发生发展中的作用及其与上皮间质转化的关系研究》文中进行了进一步梳理研究目的:检测Eps8、E-cadherin和Vimentin在不同宫颈组织中的表达,初步探究Eps8与宫颈癌进展及上皮间质转化（EMT）的关系;干扰宫颈癌细胞中Eps8的表达,检测宫颈癌细胞中EMT相关分子表达的变化,及宫颈癌细胞侵袭、迁移能力的改变,探讨Eps8在宫颈癌细胞EMT中的作用。研究方法:1.采用免疫组化法检测正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ级、CINⅡⅢ级及宫颈鳞癌组织中Eps8、E-cadherin和Vimentin的表达,比较不同宫颈组织中这三种蛋白的表达情况,分析宫颈鳞癌组织中Eps8、E-cadherin、Vimentin表达水平的相关性,及三种蛋白的表达水平与宫颈宫颈鳞癌临床病理特征的相关性。2.应用脂质体转染技术,干扰宫颈癌细胞中Eps8的表达;采用qRT-PCR、Western blot检测Eps8表达下调后,宫颈癌细胞中E-cadherin、Vimentin及Snail表达的改变;采用Transwell小室进行侵袭、迁移实验,检测Eps8表达的降低对宫颈癌细胞侵袭、迁移能力的影响。结果:1.宫颈鳞癌组织中Eps8、Vimentin的表达水平明显高于正常宫颈上皮组、CIN组;正常宫颈上皮组、CIN组中E-cadherin的表达水平明显高于宫颈鳞癌组（P<0.05）。2.在宫颈鳞癌组织中,Eps8、Vimentin均与E-cadherin的表达水平呈负相关（P<0.05）,Eps8与Vimentin的表达呈正相关（P<0.001）。3.Eps8的表达水平与宫颈鳞癌的分化程度、浸润深度以及淋巴结转移相关,E-cadherin和Vimentin的表达水平则与宫颈鳞癌的浸润深度和淋巴结转移相关（P<0.05）。4.qRT-PCR和Western blot结果表明,下调Eps8的表达,使得E-cadherin的表达明显升高,Vimentin、Snail的表达明显降低（P<0.05）。5.Transwell小室侵袭、迁移实验结果提示,抑制宫颈癌中的Eps8的表达,细胞的侵袭、迁移能力明显降低（P<0.05）。结论:1.Eps8可能参与了宫颈癌的发生发展和浸润转移。2.Eps8可能通过调控E-cadherin及Vimentin的表达,参与宫颈癌的EMT。3.抑制人宫颈癌细胞中Eps8的表达,可抑制宫颈癌细胞的EMT,使得宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力降低。Eps8可能通过促进EMT来推动宫颈癌的发生发展。
于冯[7]（2016）在《竹叶黄酮对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响》文中研究指明竹叶黄酮（AOB）是一类竹子中提取的黄酮类化合物。许多黄酮类化合物具有雌激素效能,可因剂量差异对动物生殖及胚胎发育功能产生不同影响。大熊猫是我国特有珍稀濒危动物,有“国宝”和“活化石”之称,低下的生殖力使大熊猫的种群正在走向灭亡。竹子是大熊猫的主要食物来源,大熊猫的低生殖能力是否会受到竹叶黄酮在体内累积的影响至今尚不清楚。本研究首先采用小鼠胚胎成纤维（MEF）细胞和小鼠胚胎干细胞（mESC）分化形成的拟胚体（mEB）为模型,探索AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能的毒理以及内在相关基因表达的影响及作用机制,以期为进一步探索竹叶黄酮是否对大熊猫生殖力具有影响奠定基础。本研究取得了以下主要结果：1、AOB对MEF细胞的毒理性作用及基因表达的影响采用形态观察、MTT实验、流式细胞术等检测不同浓度AOB对MEF细胞增殖的影响作用。结果表明低浓度AOB （0-10 μg/ml）对MEF生长具有显着促进作用；较高浓度的AOB（≥100μ/ml）对MEF细胞增殖具有显着抑制作用,且能显着增强MEF凋亡率。形态学观察发现,AOB可使贴壁的MEF细胞皱缩,不能维持其梭型状态。实验确定了AOB对MEF细胞的半致死浓度为400μg/ml。根据表达谱基因芯片结果筛选出差异基因792个,其中,实验组与对照组相比表达量上调2倍以上的基因有478个,下调的基因有314个。分析发现,许多差异基因与小鼠生殖功能及胚胎发育等功能密切相关,筛选出与精卵结合、精子发生、精子活力、胚胎发育及生殖细胞发育等生殖功能相关的GO terms 94个。同时KEGG分析发现,许多差异基因参与调控卵母细胞减数分裂、Wnt、MAPK、 P53、Hippo等生殖及胚胎发育功能相关的通路。然后,采用qRT-PCR方法,验证从中筛选的参与细胞凋亡（负调节细胞增殖、细胞凋亡、酮酸代谢过程、代谢过程以及有机酸代谢过程等）功能和生殖调节（精子发生、精卵结合、胚胎发育等）等功能相关GO类和通路中的基因20个（Cxxc4、Fzd1、Sfrp1、Ntrk2、Fgf10、 Kn2、Cpz、Dhrs9、Pla2g4e、Mapk12、Smc3、Lrp6、Cabyr、Pcsk4、Myl2、Pla2g4b、 B23120H23Rik、Rap1a、Pdgfb、Pdgfra）进行了表达检测,qRT-PCR结果表明,各基因的表达趋势与表达谱基因芯片分析结果基本一致。2、AOB影响MEF细胞中ERK和Wnt信号通路的活化程度采用Western blot实验检测AOB处理前后MEF细胞中ERK通路及Wnt信号通路关键蛋白表达量变化,结果发现,磷酸化的ERK和(3-catenin表达量显着上调,说明AOB对两条信号通路具有显着的激活效应。此外,Western blot实验结果显示AOB处理后,生殖相关的蛋白（CABYR, SOX17, P450scc）表达量显着上调。而加入ERK通路和Wnt通路抑制剂后,三种蛋白表达量显着下调,因而推测,AOB通过调控这两条经典通路的激活,影响生殖发育等功能相关蛋白的表达。3、AOB影响mESC分化和mEB的基因表达通过采用ALP染色和Oct4的免疫荧光化学方法鉴定mESC的状态,采用qRT-PCR技术检测处理组和对照组mEB中三胚层标志基因和mES干性标志基因的表达,研究AOB对mEB发育的影响以及预测AOB对胚胎发育的效应。结果表明,50 μg/ml和100μg/ml AOB处理后,其mES干性标志基因Oct4和Nanog的相对表达量较对照组显着增高,推断AOB显着抑制了mESC的分化过程。50μg/ml AOB处理后,mEB原始外胚层基因Gata6表达量显着下调、而Sox7和Pdgfrb表达量则显着上调；外胚层标志基因Nestin和Fgf5表达量显着下调；中胚层标志基因Brachyuary表达量显着下调,而Flk1则显着上调；内胚层标记基因Afp和Sox17表达量显着下调。100 μg/ml的AOB处理后,mEB原始外胚层基因Gata6、Sox7、Pdgfrb表达量显着上调；外胚层标志基因Nestin和Fgf5表达量显着下调；中胚层标志基因Brachyuary表达量显着下调,而Flk1则显着上调；内胚层标记基因Afp和Sox17表达量显着上调。说明AOB显着影响了mESCh和mEB的基因,推测AOB可能影响胚胎的早期发育。表达谱基因芯片分析结果显示,50μg/ml AOB处理后,mEB差异表达基因数明显少于100μg/ml处理组,说明AOB浓度越高,对小鼠生殖功能基因表达的影响越大。根据差异基因GO和KEGG分析的数据,筛选出与小鼠生殖及胚胎发育功能相关的差异基因,并进行qRT-PCR验证,结果与芯片检测结果一致。认为AOB影响小鼠生殖能力及胚胎发育是复杂的过程,可能是通过调控与小鼠生殖及胚胎后期发育、孕酮合成关键酶等功能相关基因表达而实现的。此外,AOB可显着影响生殖发育功能相关的Wnt及MAPK等信号通路的关键调控基因差异表达,影响通路信号传导,从而影响小鼠的生殖及胚胎发育功能。与对照相比,两种浓度AOB处理后的mEB中miRNA-294/295/372/373的靶基因Fgf10, miRNA-449abc/34ab的靶基因Pdgfra表达均显着上调。推测AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能的影响作用也可能与miRNA调控相关。4、AOB影响mEB细胞中ERK和Wnt信号通路的活化程度Western blot实验检测AOB处理前后mEB细胞中ERK通路及Wnt信号通路关键蛋白表达量变化,结果发现,磷酸化的ERK和P-catenin表达量显着上调,说明AOB对两条信号通路具有显着的激活效应。此外,Western blot实验结果显示100μg/ml AOB处理后,生殖相关的蛋白（CABYR, SOX17, P450scc）表达量显着上调。而加入ERK通路和Wnt通路抑制剂后,三种蛋白表达量显着下调,进一步证明,AOB通过调控这两条经典通路的活化,影响生殖发育等功能相关蛋白的表达。5、AOB影响差异表达基因的生物学效应为了进一步探索AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能影响作用机制,生物信息学预测芯片试验中与小鼠生殖及胚胎发育功能相关差异基因在调节信号传导网络中的作用,以及连接这些信号的上下游调控基因节点,进一步探索AOB影响小鼠生殖及胚胎发育功能的机制。通过IPA分析差异基因所导致的下游生物学效应,即疾病和功能分析,结果显示AOB作用后产生的差异表达基因主要在多种肿瘤、神经系统症状、骨骼肌病等相关疾病中富集。信号通路分析发现,差异表达基因主要在MAPK、Wnt、p53和PI3K/AKT等信号途径中富集。总之,通过MEF和mEB细胞模型研究,发现特定浓度的AOB对动物的胚胎发育和胚胎生殖具有明显的毒性作用。也为进一步探索大熊猫生殖力降低的原因和机理提供一种思路。
孙婧,金卢阳,王慧莹,周婧倩,刘以俊,何颖芝,李玉华[8]（2013）在《Eps8与恶性肿瘤增殖、转移和预后的相关研究进展》文中研究说明表皮生长因子受体通路底物8（Eps8）是表皮生长因子受体重要的激酶活性底物之一。在生理功能上,Eps8与细胞的有丝分裂、分化有关。近年来发现,Eps8参与了多种恶性实体瘤的增殖、转移,并与预后相关。有研究表明,Eps8主要通过形成Eps8-Abi1-Sos1三聚体参与Ras-Rac途径或通过rab5介导的EGFR内化途径来调节肿瘤增殖、转移,并能参与细胞周期的调节,因此有望成为恶性肿瘤监测与治疗的新靶点。本文对Eps8的分子结构和生理功能作简要介绍,重点对Eps8在不同恶性肿瘤中与增殖、转移和预后的关系及相关分子机制研究现状作一综述。
敖红敏[9]（2009）在《HIF-1α和VEGF在垂体腺瘤中的表达和意义》文中研究指明目的:检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达,探讨其与肿瘤侵袭发生的关系及它们之间的相关性。方法:采用免疫组化Envision二步法检测56例垂体腺瘤,其中32例侵袭性垂体腺瘤及24例非侵袭性垂体腺瘤标本中HIF-1α和VEGF的表达。结果: HIF-1α在侵袭性垂体腺瘤中的强阳性及阳性表达率分别为53.1%和93.8%,明显高于非侵袭性垂体腺瘤中的16.7%和50.0%（P<0.01）;VEGF在侵袭性垂体腺瘤中的强阳性及阳性表达率分别为56.3%和96.9%,明显高于非侵袭性垂体腺瘤中的12.5%和45.8%（P<0.01）。侵袭性腺瘤组中HIF-1α与VEGF的表达成正相关（P<0.01）,非侵袭性腺瘤组中HIF-1α与VEGF的表达无明显相关性。结论: HIF-1α、VEGF高表达与垂体腺瘤的侵袭性密切相关,可以作为判别垂体腺瘤侵袭性的有效参考指标。HIF-1α、VEGF在肿瘤侵袭及新生血管形成过程中可能存在协同作用。
李程[10]（2007）在《Genistein和Daidzein抑制肝癌细胞HepG2增殖的分子机理研究》文中提出原发性肝癌是全球发病率和死亡率均较高的恶性肿瘤之一,目前手术治疗切除率低且复发率高,而肝癌患者对毒副反应大的化疗药物耐受力差,因此从天然动植物中寻找毒性低、疗效高的抗癌活性成分成为近年来国内外肝癌治疗的发展方向。Genistein和Daidzein是大豆异黄酮的两种主要成分,二者结构相似且都具有广泛的生物学功能。目前对二者抗肿瘤增殖的研究主要集中在前列腺癌、乳腺癌等性激素依赖性肿瘤方面,而针对抑制肝癌细胞增殖的研究较少。本课题以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,通过MTT分析表明Genistein和Daidzein都可以时间和剂量依赖的方式抑制肝癌细胞的增殖。流式细胞术和凋亡相关蛋白检测表明,Genistein和Daidzein都可通过引发周期阻滞（Genistein引发G2-M期阻滞,Daidzein引发G1-S期阻滞）和细胞凋亡,并且二者诱导凋亡作用都与Bcl-2家族蛋白表达变化相关。为了进一步探讨Genistein和Daidzein抑制肝癌细胞增殖的作用及其分子机制,我们从二者对DNA损伤和端粒酶活性调控相关信号通路的影响来进行研究。DNA损伤是放疗和多种化疗药物抑制肿瘤细胞增殖的生物学基础,其通过激活细胞内的DNA损伤检控点系统来引发周期阻滞和细胞凋亡,从而达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。我们采用彗星电泳、免疫印记以及与Caffeine联合作用来进行分析,结果表明Genistein和Daidzein都可不同程度地引发细胞内的DNA损伤并激活DNA损伤检控点的多种蛋白,Genistein引发G2-M期阻滞可能主要通过DNA损伤活化ATM-Chk2-Cdc25C-Cdc2通路来完成,而Daidzein如何通过DNA损伤信号通路引发G1-S期阻滞尚不明了。我们还分析了Genistein和Daidzein对端粒酶活性的影响。因为端粒酶活化是大多数肿瘤细胞维持端粒长度并获得永生化的必要条件,如果某种药物能抑制端粒酶的活性就可阻断端粒的合成,从而使细胞退出增殖周期,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。本实验通过TRAP-银染法检测表明,HepG2细胞经Gentein和Daidzein作用后细胞内端粒酶活性显着降低。进一步的研究表明,Gentein和Daidzein抑制端粒酶活性的原因在于二者都可降低转录因子c-myc含量从而抑制hTERT的表达,还可通过降低Akt蛋白473位点Ser的磷酸化来抑制hTERT的活性修饰。总之,我们的研究表明Genistein和Daidzein都具有引发DNA损伤和抑制端粒酶活性来的功能,都是极具开发前景的抗肝癌药物。
二、EGF,Genistein对垂体瘤细胞膜PI转换的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、EGF,Genistein对垂体瘤细胞膜PI转换的影响（论文提纲范文）
（1）胰岛素样生长因子与表皮生长因子在草鱼垂体中的功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 垂体与垂体激素 |
| 2 IGFS/IGFBPS家族研究进展 |
| 2.1 IGFs/IGFBPs家族简介 |
| 2.2 IGFs/IGFBPs系统在哺乳动物中的研究现状 |
| 2.3 IGFs/IGFBPs系统在硬骨鱼类中的研究现状 |
| 3 表皮生长因子家族研究现状 |
| 3.1 表皮生长因子家族受体配体简介 |
| 3.2 表皮生长因子家族研究进展 |
| 4 研究的主要目的及意义 |
| 第二章 IGF1/IGFBP1A调控草鱼垂体LH、FSH的作用机制研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要试剂及仪器设备 |
| 2.3 草鱼垂体组织样品获得与石蜡切片制作 |
| 2.4 草鱼IGFBP1a分子克隆与组织表达分析 |
| 2.5 草鱼垂体细胞培养 |
| 2.6 转录组测序与生物信息学分析 |
| 2.7 实时定量PCR检测 |
| 2.8 IGF1和IGFBP1a对垂体细胞中LHβ和FSHβ的调控作用 |
| 2.9 Western Blot检测信号通路 |
| 2.10 免疫组化定位IGFBP1a、LH、FSH在垂体组织中的表达情况 |
| 2.11 数据分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 草鱼IGFs、IGFBP1a、IGFBP1b序列分析及三维结构预测 |
| 3.2 组织表达分析 |
| 3.3 转录组结果分析 |
| 3.4 LH、FSH位于中腺垂体区,IGFBP1a位于神经垂体区 |
| 3.5 IGF1与IGFBP1a差异调控LHβ、FSHβ的表达 |
| 3.6 IGF1和IGFBP1a互作对FSHβ和LHβ的影响 |
| 3.7 IGF1和IGFBP1a互作的信号通路机制 |
| 4 讨论 |
| 第三章 表皮生长因子对UTS1、EGR1和MMP13的调控机制 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要仪器设备与试剂 |
| 2.3 细胞培养、RNA提取与cDNA文库构建 |
| 2.4 转录组差异基因分析与功能富集分析 |
| 2.5 实时定量PCR检测 |
| 2.6 EGF对垂体细胞中UTS1、EGR1、MMP13和TIMP3的调控作用 |
| 2.7 EGF调控差异基因的受体选择性与受体后信号通路 |
| 2.8 Western Blot检测信号通路 |
| 2.9 数据分析 |
| 3 实验结果与分析 |
| 3.1 转录组分析 |
| 3.2 EGF诱导草鱼垂体细胞中关键基因的表达 |
| 3.3 EGF诱导UTS1与EGR1基因表达受体选择性以及受体后信号通路 |
| 3.4 EGF诱导MMP13表达的受体选择性与受体后信号转导 |
| 3.5 MMP13参与EGF诱导UTS1和EGR1的表达 |
| 4 讨论 |
| 第四章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（2）多巴胺激动剂溴隐亭通过促进细胞程序性坏死途径治疗垂体泌乳素腺瘤（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 溴隐亭可显着缩小泌乳素瘤瘤体积并上调瘤体组织中程序性坏死相关蛋白RIP3及MLKL的表达 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 溴隐亭可诱导泌乳素瘤细胞发生RIP3/MLKL介导的程序性坏死 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 PGAM5-CypD通路参与溴隐亭诱导的RIP3/MLKL介导的泌乳素瘤细胞程序性坏死 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 细胞死亡在药物治疗垂体泌乳素腺瘤中的作用 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（3）垂体腺瘤术后复发的危险因素分析及PVT1在垂体腺瘤进展中的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 垂体腺瘤简介 |
| 1.2 垂体腺瘤侵袭与间质转化的关系 |
| 1.3 长非编码RNA PVT1 及其与恶性肿瘤侵袭转移的关系 |
| 第二章 垂体腺瘤术后复发的危险因素分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 临床资料和方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 PVT1 在侵袭性垂体腺瘤组织和垂体腺瘤细胞系中表达水平变化 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 仪器、材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 PVT1 对垂体腺瘤细胞的增殖、成瘤、迁移的作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 仪器、材料与方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 PVT1 对垂体腺瘤细胞β-连环蛋白、c-myc、细胞周期蛋白D1 以及细胞间质转化标志蛋白表达水平的作用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 仪器、材料与方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 神经内镜经鼻蝶手术治疗侵袭性垂体腺瘤的外科进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 垂体腺瘤的基础研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
（4）GH型垂体腺瘤合并心肌病临床疗效探讨及Notch信号通路在GH型垂体腺瘤中的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 GH型垂体腺瘤合并心肌病临床疗效探讨 |
| 引言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 Notch1、Notch3蛋白在GH型垂体腺瘤中的表达及意义 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 Notch信号靶基因Hes1在GH型垂体腺瘤中的表达及意义 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 本研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词表 |
| 攻读博士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（5）肿瘤的致病机理和药物重定位研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文中常用缩写中英文对照表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 复杂疾病理论 |
| 1.1.1 复杂疾病 |
| 1.1.2 肿瘤疾病 |
| 1.2 肿瘤的遗传机制研究 |
| 1.2.1 肿瘤发生的主流理论 |
| 1.2.2 肿瘤基因组学研究 |
| 1.3 第二代DNA测序技术 |
| 1.3.1 边合成边测序法 |
| 1.3.2 外显子捕获技术 |
| 1.4 肿瘤基因组测序研究 |
| 1.4.1 肿瘤全外显子组测序 |
| 1.4.2 肿瘤全基因组测序 |
| 1.5 肿瘤测序数据生物信息分析内容 |
| 1.5.1 短序列比对 |
| 1.5.2 序列比对后矫正 |
| 1.5.3 基因组插入缺失区域的矫正 |
| 1.5.4 序列碱基质量校正 |
| 1.5.5 突变检测 |
| 1.5.6 变异注释 |
| 1.5.7 基因组拷贝数变异检测 |
| 1.5.8 基因组结构变异检测 |
| 1.5.9 肿瘤突变谱分析 |
| 1.5.10 驱动基因突变显着性分析 |
| 1.5.11 驱动通路分析和分子网络构建 |
| 1.5.12 非编码区域的突变检测 |
| 1.5.13 病毒微生物插入基因组分析 |
| 2 垂体瘤全外显子测序及体细胞突变研究 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.1.1 垂体瘤概述 |
| 2.1.2 垂体瘤的遗传学研究 |
| 2.2 研究方法与材料 |
| 2.2.1 垂体瘤样本信息情况 |
| 2.2.2 垂体瘤外显子测序及分析方法 |
| 2.3 研究结果 |
| 2.3.1 垂体瘤显着突变的基因 |
| 2.3.2 垂体瘤体细胞拷贝数改变情况 |
| 2.3.3 垂体瘤突变分子通路分析结果 |
| 2.3.4 垂体瘤药物靶点分析结果 |
| 2.3.5 垂体瘤遗传突变与临床特征的相关性分析结果 |
| 2.4 分析与讨论 |
| 3 胰腺癌全外显子测序及体细胞突变研究 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.1.1 胰腺癌概述 |
| 3.1.2 胰腺癌病因学研究 |
| 3.2 研究方法与材料 |
| 3.2.1 胰腺癌样本 |
| 3.2.2 胰腺癌外显子测序实验方法 |
| 3.2.3 胰腺癌外显子测序数据分析方法 |
| 3.3 研究结果 |
| 3.3.1 胰腺癌突变检测和拷贝数变异分析 |
| 3.3.2 胰腺癌体细胞拷贝数变异检测 |
| 3.3.3 胰腺癌多中心数据显着突变基因分析 |
| 3.3.4 胰腺癌多中心数据通路及蛋白子网络分析 |
| 3.4 分析与讨论 |
| 4 泛肿瘤基因组分析及药物重定位研究 |
| 4.1 研究背景 |
| 4.2 研究方法与材料 |
| 4.2.1 泛肿瘤基因组数据整理 |
| 4.2.2 肿瘤突变数据预处理 |
| 4.2.3 肿瘤显着突变基因筛选 |
| 4.2.4 拷贝数变异和融合基因整理 |
| 4.2.5 肿瘤驱动基因数据库整理 |
| 4.2.6 肿瘤驱动基因收集方法 |
| 4.2.7 药物-靶点相互作用数据和已知抗肿瘤药物的整理 |
| 4.2.8 蛋白-蛋白相互作用数据 |
| 4.2.9 蛋白互作连接紧密度分析 |
| 4.2.10 基于蛋白相互作用的药物重定位计算方法 |
| 4.2.11 重定位药物作用蛋白的KEGG通路富集 |
| 4.2.12 药物抗肿瘤活性测试实验 |
| 4.3 研究结果 |
| 4.3.1 52种肿瘤类型突变概况 |
| 4.3.2 52种肿瘤类型的驱动基因 |
| 4.3.3 52种肿瘤类型中FDA批准药物的直接靶点 |
| 4.3.4 基于蛋白质相互作用网络的肿瘤药物重定位 |
| 4.3.5 52种肿瘤的驱动基因药物重定位 |
| 4.3.6 分析与讨论 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 学术论文和科研成果目录 |
（6）Eps8在宫颈癌发生发展中的作用及其与上皮间质转化的关系研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文缩写对照 |
| 绪论 |
| 第一部分 Eps8、E-cadherin、Vimentin在不同宫颈组织中的表达 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 干扰抑制Eps8的表达对宫颈癌细胞上皮间质转化及体外侵袭转移的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表和待发表论文 |
（7）竹叶黄酮对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 黄酮类化合物的应用研究进展 |
| 1.1 黄酮类化合物的抗氧化作用 |
| 1.2 黄酮类化合物的抗癌作用 |
| 1.3 黄酮类化合物抗心血管疾病和抗骨质琉松作用 |
| 1.4 黄酮类化合物的抗炎和抗菌等作用 |
| 1.5 黄酮类化合物雌激素样与抗雌激素样作用 |
| 1.6 雌激素诱发的生殖毒性 |
| 2 竹叶黄酮生理活性及应用 |
| 2.1 竹叶黄酮在疾病预防及治疗医学方面的应用 |
| 2.2 竹叶黄酮作为多功能食品添加剂的应用 |
| 2.3 竹叶黄酮在制备功能食品方面的应用 |
| 2.4 竹叶黄酮在化妆品制备等方面的应用 |
| 2.5 竹叶黄酮在其他领域的应用 |
| 3 小鼠胚胎干细胞在生殖毒理学中的应用 |
| 3.1 胚胎干细胞 |
| 3.2 胚胎干细胞多能性标志检测 |
| 3.3 胚胎干细胞在毒理学中的应用 |
| 4 大熊猫生殖生物学研究 |
| 4.1 大熊猫的濒危性及其机理研究 |
| 4.2 大熊猫的濒危性及其与微生物的共生关系 |
| 4.3 大熊猫在进化中的食物与生殖能力的关系 |
| 5 本课题的研究目的研究内容 |
| 5.1 研究目的 |
| 5.2 研究内容 |
| 第二章 竹叶黄酮对小鼠胚胎成纤维细胞生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 AOB对MEF细胞增殖的影响 |
| 3.2 MEF细胞总RNA样品质量检测 |
| 3.3 AOB对MEF细胞基因表达的影响 |
| 3.4 qRT-PCR实验检测 |
| 3.5 Western blot验证AOB处理前后MAPK和Wnt信号通路的活化程度 |
| 4 讨论 |
| 4.1 不同浓度AOB对MEF细胞增殖的作用 |
| 4.2 AOB对MEF细胞基因表达的影响 |
| 4.3 AOB对MEF细胞中信号通路的活化作用 |
| 5 小结 |
| 第三章 竹叶黄酮对小鼠胚胎干细胞生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 小鼠胚胎干细胞(mESC)形态观察及干性鉴定 |
| 3.2 倒置显微镜下拟胚体(mEBs)的形态观察 |
| 3.3 拟胚体总RNA样品质量检测 |
| 3.4 AOB对mEBs细胞基因表达的影响 |
| 3.5 qRT-PCR鉴定结果 |
| 3.6 AOB对mEB中信号通路的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 AOB对mESC亚全能性调节关键基因表达的影响 |
| 4.2 AOB对mEB三胚层基因表达的影响 |
| 4.3 AOB对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响 |
| 4.4 AOB对mEB细胞中相关蛋白表达的影响 |
| 5 小结 |
| 第四章 AOB处理下小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因的IPA分析 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 差异基因信息注释 |
| 3.2 差异基因Bioprofiler综合信息分析 |
| 3.3 信号通路分析 |
| 3.4 分子相互作用网络 |
| 4 讨论 |
| 4.1 AOB作用下差异表达基因所导致的下游生物学效应 |
| 4.2 AOB作用下差异表达基因富集的信号通路分析 |
| 5 小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 1 总结 |
| 2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1：缩略词一中英文对照 |
| 附录2：主要试剂配方 |
（8）Eps8与恶性肿瘤增殖、转移和预后的相关研究进展（论文提纲范文）
| Eps8的结构与生理 |
| Eps8的生理功能 |
| Eps8在恶性肿瘤中的研究Eps8在恶性实体肿瘤中的研究 |
| Eps8在恶性血液肿瘤中的研究 |
| 结 语 |
（9）HIF-1α和VEGF在垂体腺瘤中的表达和意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 主要试剂及配方 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 临床标本 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 HE 染色 |
| 2.2.2 免疫组织化学二步法 |
| 2.2.3 阳性结果判定 |
| 2.2.4 统计分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 垂体腺瘤的苏木素-伊红染色的组织学表现 |
| 3.2 HIF-1α和VEGF免疫组织化学染色的组织学改变 |
| 3.3 HIF-1α和VEGF在侵袭性垂体腺瘤与非侵袭性垂体腺瘤的表达与相关性 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
（10）Genistein和Daidzein抑制肝癌细胞HepG2增殖的分子机理研究（论文提纲范文）
| 英文缩略表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1. 大豆异黄酮抗癌功能研究进展 |
| 1.1 大豆异黄酮的结构、组成及特性 |
| 1.2 大豆异黄酮发挥抗癌作用的机制 |
| 2. 细胞DNA 损伤检控点 |
| 3. 端粒酶与肿瘤 |
| 3.1 端粒的结构与功能 |
| 3.2 端粒酶的组成及其在细胞癌变中的作用 |
| 4. 本课题研究的主要内容及其理论意义和实际意义 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 试剂配制 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.3 MTT法检测药物对细胞的增殖抑制率 |
| 2.4 Hoechst33258 染色检测细胞凋亡 |
| 2.5 流式细胞术检测细胞DNA 含量 |
| 2.6 彗星电泳 |
| 2.7 蛋白质浓度测定 |
| 2.8 Western Blot |
| 2.9 端粒酶活性检测 |
| 结果 |
| 1. Gen 和Dai 对HepG2 细胞增殖的影响 |
| 2. Gen 和Dai 对HepG2 细胞周期分布的影响 |
| 3. Gen 和Dai 对HepG2 细胞形态的影响 |
| 4. Gen 和Dai 对HepG2 细胞内Bcl-2 家族蛋白表达的影响 |
| 5. Gen 和Dai 对HepG2 细胞DNA 完整性的影响 |
| 6. Gen 和Dai 对HepG2 细胞DNA 损伤检控点相关蛋白磷酸化水平的影响 |
| 7. Gen 和Dai 与DNA 损伤反应抑制剂Caffeine 联合作用对HepG2细胞周期的影响 |
| 8. Gen 和 Dai 对HepG2 细胞端粒酶活性的影响 |
| 9. Gen和Dai对HepG2细胞内c-myc和hTERT表达量的影响 |
| 10. Gen和Dai对HepG2细胞内Akt磷酸化程度的影响 |
| 讨论 |
| 1. Gen 和Dai 诱导HepG2 细胞凋亡的作用 |
| 2. Gen 和Dai 与DNA 损伤反应 |
| 2.1. Gen 和Dai 都可造成DNA 损伤 |
| 2.2. Gen 和Dai 通过DNA 损伤检控点信号通路对细胞周期产生影响 |
| 3. Gen 和Dai 与端粒酶活性调控 |
| 3.1. Gen和Dai都可减少c-myc的表达而抑制hTERT转录 |
| 3.2. Gen 和Dai 都可通过抑制Akt 磷酸化来降低端粒酶活性 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、EGF,Genistein对垂体瘤细胞膜PI转换的影响（论文参考文献）
- [1]胰岛素样生长因子与表皮生长因子在草鱼垂体中的功能研究[D]. 胡琼瑶. 华中农业大学, 2021
- [2]多巴胺激动剂溴隐亭通过促进细胞程序性坏死途径治疗垂体泌乳素腺瘤[D]. 张顺立. 中国人民解放军陆军军医大学, 2021(01)
- [3]垂体腺瘤术后复发的危险因素分析及PVT1在垂体腺瘤进展中的实验研究[D]. 张溢华. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [4]GH型垂体腺瘤合并心肌病临床疗效探讨及Notch信号通路在GH型垂体腺瘤中的作用研究[D]. 周和平. 苏州大学, 2018(04)
- [5]肿瘤的致病机理和药物重定位研究[D]. 宋智健. 上海交通大学, 2017(05)
- [6]Eps8在宫颈癌发生发展中的作用及其与上皮间质转化的关系研究[D]. 李倩. 上海交通大学, 2016(03)
- [7]竹叶黄酮对小鼠生殖及胚胎发育功能相关基因表达的影响[D]. 于冯. 浙江大学, 2016(02)
- [8]Eps8与恶性肿瘤增殖、转移和预后的相关研究进展[J]. 孙婧,金卢阳,王慧莹,周婧倩,刘以俊,何颖芝,李玉华. 中国实验血液学杂志, 2013(02)
- [9]HIF-1α和VEGF在垂体腺瘤中的表达和意义[D]. 敖红敏. 南昌大学, 2009(03)
- [10]Genistein和Daidzein抑制肝癌细胞HepG2增殖的分子机理研究[D]. 李程. 厦门大学, 2007(07)