一、汉丹肝乐对免疫性肝纤维化模型大鼠转化生长因子-β_1的影响（论文文献综述）
方惠娴[1]（2018）在《四逆散加味方对免疫诱导肝纤维化大鼠肝组织NOX、PI3K/Akt信号通路的影响》文中研究指明目的肝纤维化是多种慢性肝损伤的修复反应,纤维化是多种慢性肝病共同的病理过程,是肝硬化的早期阶段,其主要临床表现为胁痛、乏力。早期的肝纤维可逆的,失于治疗则会进展为肝硬化甚至肝癌。肝纤维化发生、发展的核心环节是肝星状细胞（HSC）的活化与细胞外基质（ECM）的沉积。肝肝纤维化是全球性的卫生难题,目前临床对该病的治疗多是针对其原发病的病因,如抗病毒、抑制免疫等,缺乏有效的抗纤维化手段。中医药在抗肝纤维化方面具有独到优势,中医药治法在肝纤维化的治疗上扮演了重要角色。四逆散加味方是临床治疗肝纤维化的有效经验方,有临床证据表明该方能够有效改善肝纤维化患者血清学指标。本实验以四逆散加味方为研究对象,验证其对免疫诱导肝纤维化大鼠的治疗效果,研究其对免疫诱导肝纤维化大鼠NOX、PI3K、Akt蛋白表达的影响,阐明其抗肝纤维化的作用机制,为四逆散加味方临床广泛应用提供实验支撑。方法72只雄性SD大鼠适应性饲养1周后,按随机数字表法分为6组:空白组（K）、模型组（M）、四逆散加味方高剂量组（G）、四逆散加味方中剂量组（Z）、四逆散加味方低剂量组（D）、秋水仙素组（Q）,每组12只。除空白组外,其余均采用未灭活猪血清腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,连续8周,第六周即可形成肝纤维化。造模第6周,四逆散高、中、低剂量组,每日分别按生药量15.3、7.65、3.83 g·kg-1给药,秋水仙对照组每日予悬浊液0.09mg·kg-1灌胃,模型组、空白组予等量生理盐水灌胃。给药体积均为10ml·kg-1,连续21天。给药结束后取材,称重比较其肝脏指数变化;生化分析仪分析血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）含量;放射免疫法分析血清透明质酸酶（HA）、层黏连蛋白（LN）、III型前胶原蛋白（PCIII）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）;He染色、Masson染色观察大鼠肝组织病理变化;免疫组化法（S-P）观察NOX4、PI3K、Akt在肝组织的定位表达;蛋白免疫印迹分析（Western blot）NOX4、PI3K、Akt蛋白定量表达。结果1.免疫性肝纤维化的模型评价:与空白组相比,模型组大鼠的肝脏指数明显升高（P<0.01）,模型组大鼠血清ALT、AST均有增加（P<0.01）,模型组大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C的含量均有升高（P<0.01）;HE染色提示模型组大鼠肝索、肝小叶结构紊乱,中央静脉出现偏离或消失,肝细胞有明显的气球样变性,部分组织呈炎性细胞浸润像,纤维结缔组织增生,部分假小叶形成或坏死,部分肝细胞呈胆汁淤积表现;Masson染色结果提示模型组胶原纤维明显增多,并集中在汇管区,面积明显增大（P<0.01）。2.四逆散加味方对肝纤维化的治疗作用:与模型组大鼠相比,四逆散低、中、高剂量治疗组均能有效降低大鼠血清ALT、AST（P<0.01）;各剂量组均能有效降低血清HA、Ⅳ-C水平,四逆散中、高剂量组能够降低血清PCⅢ的含量（P<0.01）;HE染色结果提示随着四逆散加味方药物浓度的增加,肝小叶结构逐渐得到修复,假小叶的数量有明显的不同程度的减少,肝索排列的整齐度呈不同程度的改善,肝细胞的气球样变性有着不同程度的减轻,偶见少量的炎性细胞浸润,较模型组减轻明显,结缔组织增生也有减轻;Masson染色结果提示四逆散低、中、高剂量组胶原纤维明显减少,差异极显着（P<0.01）。3.NOX4、PI3K、Akt蛋白的表达:Wb结果提示,模型组大鼠肝组织中NOX4、PI3K、Akt蛋白的相对表达量较空白组明显增加（P<0.01）,与模型组相比,四逆散低、中、高治疗组均能有效降低大鼠肝组织中NOX4、PI3K、Akt的相对表达量（P<0.01）;免疫组化结果提示NOX、PI3K、Akt主要在细胞浆中表达,阳性表达呈棕褐色。平均光密度值分析提示:模型组NOX4、PI3K、Akt蛋白表达较空白组有增加（P<0.01）,四逆散中、高剂量组能下调NOX4蛋白在细胞质的表达（P<0.01）,四逆散高剂量组下调PI3K蛋白在肝细胞质中的的表达明显（P<0.01）,四逆散低、中、高剂量组均能减少Akt蛋白在细胞质的表达（P<0.01）。结论1.猪血清腹腔注射能够成功诱导免疫性肝纤维化大鼠模型。2.四逆散加味方能够改善免疫性肝纤维化大鼠的肝功,具有缓解肝损伤、降酶、减少肝脏胶原纤维沉积的作用。3.四逆散加味方发挥保肝、抗炎、抗纤维化的机制之一可能是通过下调大鼠肝组织中NOX4、PI3K、Akt的蛋白表达,阻断NOX-PI3K/Akt信号转导通路,从而抑制HSC的活化,促进HSC凋亡以及减少ECM的沉积。
李杉杉[2]（2017）在《蒿鳖养阴软坚方通过Nrf2/γ-GCS信号通路抑制酒精性肝纤维化作用》文中指出目的结合体内实验和体外实验探讨不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对酒精性肝纤维化的作用机制,并探讨其通过激活Nrf2通路诱导下游抗氧化反应蛋白γ-GCS的表达,而抑制酒精性肝纤维化,进一步推动鳖养阴软坚方成功应用于临床,为众多酒精性肝纤维化患者提供更为健康、有效、副作用小的防治药物。本课题组结合体内、外两大实验部分,根据不同提取方案的复方给药后,分析大鼠肝组织中胶原蛋白含量,观察乙醛刺激后的LX-2细胞生长、增殖的情况,研究酒精性肝纤维化大鼠肝组织中以及乙醛刺激后的LX-2细胞中Nrf2/γ-GCS通路中主要蛋白Nrf2、γ-GCS的表达。方法1、从军事科学院购买健康Wistar大鼠体重在200240g的共80只,雌性和雄性各占一半。每日灌胃相应浓度酒精并辅助大鼠皮下注射40%CCL4-花生油以及添加高脂饲料进行酒精性肝纤维化模型造模。将大鼠按体重随机区组分组法分为完全水提低剂量组（2.59g.kg-1.d-1）、完全水提高剂量组（8.2g.kg-1.d-1）、先水后醇95%低剂量组（2.59g.kg-1.d-1）、先水后醇95%高剂量组（8.2g.kg-1.d-1）、水提醇沉低剂量组（2.59g.kg-1.d-1）、水提醇沉高剂量组（8.2g.kg-1.d-1）、粉末组（0.09mg.kg-1.d-1）、阳性药对照组为复方鳖甲软肝片组（0.09mg.kg-1.d-1）、模型对照组（30%乙醇灌胃,每天一次）、正常对照组（正常组蒸馏水1.2ml.g-1.d-1）。方法步骤:模型组大鼠早晨用30%乙醇进行灌胃,间隔6h后灌蒸馏水;各给药组早晨用30%乙醇灌胃,下午按照各自实验分组分别给对应剂量的复方。正常组大鼠全天均灌胃蒸馏水。造模10周后处死大鼠,留取标本。光镜观察肝组织免疫组化Nrf2通路中相关抗氧化蛋白的表达,;盐酸水解法检测实验各组大鼠肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量并以胶原蛋白含量表示;Western Blot方法检测Nrf2通路中Nrf2蛋白和下游抗氧化应激蛋白γ-GCS的表达。2、本实验用不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方和一定浓度的乙醛处理体外培养的LX-2细胞株,并同时以乙醛刺激活化的和正常培养的LX-2细胞组为对照,采用MTT法探讨两种复方提取方案对乙醛活化的LX-2细胞的作用情况以及两种复方提取方案与Nrf2通路阻断剂ATRA合用后乙醛活化的LX-2细胞的增殖情况。采用谷胱甘肽（GSH）试剂盒测定各实验分组内培养细胞中的GSH含量。结果1、肝组织免疫组化结果:模型组和用药组Nrf2和γ-GCS均多数在细胞浆和细胞核中表达,汇管区附近也有所表达,但表达量不及胞浆和胞核,而且给药组Nrf2和和γ-GCS的表达量随剂量增加,即高剂量组下游蛋白的表达量高于低剂量组,给药组下游蛋白表达量明显高于模型组（P<0.01）。2、肝组织胶原蛋白含量结果:粉末组和先水后醇低、高剂量组作用效果相当（P>0.05）;但是二者与完全水提低、高剂量组以及水提醇沉低、高剂量组之间作用效果差异明显,即前者作用效果明显优于后者（P<0.05）;每一种提取方案内部低、高剂量的肝组织胶原蛋白含量也不同,但实际的抑制肝纤维化效果相当（P>0.05）。3、肝组织Western-blot结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织中Nrf2、γ-GCS蛋白显着增高（P<0.01）;与模型组比较,粉末提取方案组以及先水后醇95%高剂量组大鼠肝组织中Nrf2、γ-GCS蛋白表达显着增高（P<0.01）;先水后醇95%高剂量组大鼠肝组织中Nrf2、γ-GCS蛋白表达与粉末组比较无明显差异（P>0.05）。4、LX-2细胞前期MTT法筛选提取方案结果:粉末组和先水后醇组作用效果相差不大（P>0.05）;但是结合细胞内Hyp含量发现二者抑制肝纤维化效果明显优于完全水提组以及水提醇沉组（P<0.05）。5、LX-2细胞后期MTT法结果:单用乙醛的对照组的确可以加快LX-2细胞的增殖速度,同时将不同提取方案的复方按照实验设计给药后可以明显降低LX-2细胞在乙醛刺激后的增殖速度（P<0.05）。确定先水后醇95%方案、粉末提取方案、阳性药物莱菔硫烷（SFN）以及Nrf通路特异性阻断剂ATRA各自与LX-2细胞最佳作用浓度和作用时间以及各组治疗药物与ATRA合用后,活化的LX-2细胞抑制率降低（P<0.05）。6、LX-2细胞各实验分组内培养细胞中的GSH含量结果:先水后醇95%提取方案、粉末提取方案和ATRA联合处理后可降低细胞内的GSH（P<0.05）;当用BSO抑制细胞内的GSH合成后,先水后醇95%提取方案和ATRA联合作用可使细胞内的GSH含量锐减（P<0.05）。结论1、体内实验和体外实验均造模成功。2、粉末组提取方案和先水后醇95%提取方案对体内实验模型以及体外实验模型有治疗作用。3、粉末组提取方案和先水后醇95%提取方案的复方对于大鼠酒精性肝纤维化治疗涉及Nrf2/γ-GCS通路的参与,可能通过上调Nrf2/γ-GCS通路,有效提高抗氧化蛋白γ-GCS活性,从而抑制大鼠酒精性肝纤维化。4、两种提取方案的复方抑制乙醛活化的LX-2细胞增殖涉及Nrf2/γ-GCS通路的参与,可能通过上调Nrf2/γ-GCS通路,有效提高抗氧化蛋白γ-GCS活性,增加细胞内GSH含量,从而抑制活化的LX-2细胞增殖。
李光全[3]（2016）在《苷泰胶囊抗肝纤维化作用及其机制研究》文中研究说明肝纤维化是以肝脏细胞外基质（Extracellular matrix, ECM）)的过量沉积为特征的损伤修复反应。其广泛存在于各种慢性肝病中,是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经可逆阶段,在慢性肝病进一步恶化过程中具有潜在的严重危害性。然而,迄今尚无世界公认的可靠有效的抗肝纤维化药物。在中医药抗肝纤维化日益受到重视的背景下,本研究通过构建的CCl4致大鼠肝纤维化模型,考察了苷泰胶囊抗肝纤维化效果,并初步研究了其作用机制,为苷泰胶囊的临床新用提供了实验依据和理论基础,并为抗肝纤维化药物的进一步研究提供一定参考。主要研究如下：1基于CCl4致肝纤维化动物模型的苷泰胶囊抗肝纤维化药效学研究本研究选择CCl4致大鼠化学损伤性肝纤维化模型,以血清肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase, ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（Aspartate transaminase, AST）的活性,血清肝纤维化指标透明质酸（Hyaluronic acid, HA）、层粘蛋白（Laminin, LN）、Ⅳ型胶原（Collagen Type Ⅳ, CⅣ）和Ⅲ型前胶原（Procollagen Ⅲ, PCⅢ）的含量,结合肝组织中羟脯氨酸（Hydroxyproline, HyP）的含量,肝组织HE染色、天狼星红染色等结果评价苷泰胶囊抗肝纤维化效果。研究发现,苷泰胶囊显着下调了肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、CⅣ和PCⅢ的水平,同时降低了肝组织中HyP的含量。病理检查结果亦显示苷泰胶囊能明显改善肝脏病理损伤程度,减少肝脏中胶原沉积。结果表明,苷泰胶囊能显着地降低CCl4致肝纤维化大鼠血清和肝组织肝纤指标,能有效治疗CCl4诱导的大鼠肝纤维化。2基于NF-κB信号通路的苷泰胶囊抗肝纤维化作用机制研究肝纤维化的发生、发展与肝星状细胞（Hepatic stellate cells, HSCs）的活化和增殖密切相关,而抑制核转录因子-κB （Nuclear transcription factor-KB, NF-κB）的活性可减弱HSCs的活化与增殖,进而促进其凋亡并缓解肝纤维化。因此,本研究首先采用Western blot口免疫组化方法检测α-平滑肌肌动蛋白（a-Smooth muscle actin, α-SMA）的表达,证实了苷泰胶囊对HSCs活性的抑制作用。进-步,通过免疫组化方法评价NF-κB-p65的核转位,并采用RT-PCR检测NF-κB信号通路下游基因肿瘤坏死因子-α （Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α）,白介素-6（Interleukin-6, IL-6）和转化生长因子-β1 （Transforming growth factor-β1, TGF-β1）的表达,揭示了苷泰胶囊对NF-κB信号通路的抑制作用。研究结果表明,苷泰胶囊可通过抑制NF-κB信号通路的活性来抑制HSCs的活化和增殖等作用,进而产生治疗CCl4致大鼠肝纤维化的效果。
李光全,黄奕雪,尹萍,桑秀秀,贺兰芝,王家葵,柏兆方[4]（2016）在《中药复方抗肝纤维化药理作用研究进展》文中研究指明肝纤维化是广泛存在于慢性肝病中以细胞外基质过量沉积为特征的损伤修复反应,在全球具有较高发病率和病死率。在缺乏有效抗肝纤维化西药的同时,许多行之有效的中药复方逐渐得到了认可。本文总结了近年来国内外研究的一些典型中药复方,分别从活血化瘀、补益、清热祛湿和疏肝健脾等4个方面进行综述。旨在方便研究者系统地了解抗肝纤维化中药复方的研究进展,为临床组方以及抗肝纤维化药物的进一步研究提供一定参考。
胡晓霞,王艳,王晋星一[5]（2014）在《汉丹肝乐对大鼠肝纤维化PI3K/Akt信号通路的影响及意义》文中认为目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶（phosphatidylinositol-3 kinase/Akt,PI3K/Akt）信号通路在CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的变化并探讨中药汉丹肝乐对他的影响.方法:选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组、肝纤维化8 wk组及汉丹肝乐治疗组,每组各10只.肝纤维化组及汉丹肝乐治疗组大鼠按0.3 mL/100 g体质量的剂量皮下注射40%CCl4花生油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间为8wk;对照组大鼠皮下注射等量花生油溶液.造模结束后汉丹肝乐治疗组大鼠给予1.0 g/kg的汉丹肝乐灌胃治疗,1次/d,治疗时间为8 wk.HE染色观察肝组织病理学改变;采用免疫组织化学技术及Western blot检测肝组织中PI3K/Akt信号通路中关键分子Akt1、磷酸化Akt1的表达变化,同时应用TUNEL法检测肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSC）凋亡情况.结果:与正常对照组比较,肝纤维化8 wk组大鼠肝组织中Akt1（2.73±0.52 vs 9.60±2.28,P<0.01）、磷酸化Akt1（0.92±0.40 vs 6.51±1.39,P<0.01）的表达均显着增加,差异具有显着性;经汉丹肝乐治疗后,肝组织中Akt1（9.60±2.28 vs 5.36±1.59,P<0.01）、磷酸化Akt1（6.51±1.39 vs 2.08±0.85,P<0.01）的表达均显着下降;同时,TUNEL法检测发现汉丹肝乐组大鼠肝组织中HSC凋亡率显着高于肝纤维化8 wk组（1.07±0.32 vs 4.24±0.86,P<0.01）.结论:PI3K/Akt信号通路在肝纤维化的发生发展过程中发挥重要作用,而汉丹肝乐可通过抑制该信号通路,促进HSC的凋亡来发挥抗肝纤维化的作用.
郝瑞春[6]（2011）在《雄芍汤防治肝纤维化作用及机理研究》文中研究表明肝纤维化（hepatic fibrosis, HF）主要是一种组织病理学概念。HF指肝组织内细胞外基质成分过度增生与异常沉积,导致肝结构或（和）功能异常的病理变化。多数慢性肝炎均可发生肝纤维化,部分肝纤维化进一步发展可形成肝硬化和肝癌,严重影响人类健康和生命。而目前临床上尚无理想的抗HF药物,因此能否延缓、终止HF的进展,甚或逆转HF至正常,具有重大意义。HF的形成涉及诸多因素和环节,单纯应用针对某一环节作用的药物可能难以逆转纤维化进程,研究表明,中药复方有多途径,多靶点抗HF的综合药理作用,着眼于肝纤维化发生发展的多个环节,发掘出疗效较好的抗肝纤维化中药复方是中医药工作者的重要使命。雄芍汤乃导师门九章教授治疗肝纤维化的有效验方,本论文中我们一方面进行了雄芍汤抗大鼠免疫性肝纤维化的作用和机理实验研究,另一方面进行了雄芍汤含药血清对体外培养的人肝星状细胞影响的实验研究,简述如下：目的：从症状体征、肝功、肝纤四项、病理形态学等方面综合评价雄芍汤防治免疫性肝纤维化的疗效,并从肝纤维化发病机制中起关键作用的环节入手明确雄芍汤抗肝纤维化的机理。方法：1.动物实验采用猪血清腹腔注射法制造大鼠肝纤维化模型。设立正常对照组、模型组对照组、扶正化瘀胶囊对照组、雄芍汤预防组和雄芍汤高、低剂量组（以下分别简称正常组、模型组、扶正组、雄预组、雄高组、雄低组）。观察大鼠毛色泽、体重等一般情况；肉眼观察大鼠新鲜肝脏的外观；计算肝重与体重的比值,脾重与体重的比值；常规方法检测大鼠血清肝功能指标：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白蛋白与球蛋白比值（A/G）；同位素放射免疫分析法检测肝纤维化血清标志物：透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原氨端肽（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CIV）的含量；黄嘌呤氧化酶法检测血清SOD活力,TBA法测定血清MDA含量；ELISA法检测大鼠血清MMP-9、IgE、C3的含量；消化法检测肝组织羟脯氨酸含量；HE染色和Masson染色法观察肝组织病理形态学改变；免疫组织化学染色法检测大鼠肝组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、TGF-β1表达；实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测肝组织中TIMP-1mRNA的表达。2.细胞实验采用MTT比色法测定大鼠雄芍汤药物血清对体外培养的人肝星状细胞LX-2增殖的影响；免疫组织化学染色法测LX-2中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、TGF-β1的表达。结果：1.给大鼠腹腔注射猪血清15周后,肝纤维化模型复制成功。2.雄芍汤可以改善免疫性肝纤维化大鼠毛色、进食量和体重等一般情况。3.肝功能指标检测结果：模型组血清AST、ALT、GLB均显着高于正常组（P<0.01）,ALB、A/G均显着低于正常组（P<0.01）；除了雄低组AST与模型组差别不显着外,雄芍汤各治疗组血清AST、ALT、GLB均显着低于模型组（P<0.05或P<0.01）,ALB、A/G均显着高于模型组（P<0.01）,雄预组血清GLB显着低于扶正组（P<0.05）,雄预组和雄高组A/G显着高于扶正组（P<0.05）。4.血清肝纤维化标志物检测结果：模型组血清HA、LN、PCⅢ、CIV均显着高于正常组（P<0.01）,各治疗组血清HA、PCⅢ、LN均显着低于模型组（P<0.05或P<0.01）,其中雄高组血清HA和LN显着低于雄预组,且雄高组血清LN显着低于扶正化瘀（P<0.05）,雄预组血清CIV显着低于模型组（P<0.05,）,而其他治疗组血清CIV与模型组差别不明显。5.肝重指数、脾重指数结果：所有实验组肝重指数均无显着差别；模型组脾重指数明显大于正常组（P<0.01）,雄预组和雄低组脾重指数均明显小于模型组（P<0.01）,雄高组和扶正组脾重指数均与模型组差别不明显。6.肝组织病理观察结果：模型组大鼠肝组织炎症活动度、纤维化半定量计分均显着高于正常组（P<0.01,）；除雄低组外,各治疗组均显着低于模型组（P<0.05或P<0.01）,显着高于正常组（P<0.05或P<0.01）。7.肝组织Hyp检测结果：模型组肝组织Hyp含量显着高于正常组（P<0.01）,各治疗组均显着低于模型组（P<0.05或P<0.01）,雄预组和雄高组均低于扶正组（P<0.05）。8.大鼠血清SOD和MDA含量检测结果：模型组大鼠血清SOD含量显着低于正常组（P<0.01）,MDA含量显着高于正常组（P<0.01）,除扶正组SOD含量与模型组差别不显着外,各治疗组SOD含量均显着高于模型组（P<0.05或P<0.01）,MDA含量均显着低于模型组（P<0.01）,其中雄预组SOD含量显着高于雄低组（P<0.05）,雄低组显着高于雄高组,各治疗组间MDA含量差别不显着。9.大鼠血清IgE、C3的含量检测结果：模型组大鼠血清IgE、补体C3均与正常组差别不显着,雄预组IgE显着高于其他所有组（P<0.05或P<0.01）,雄预组补体C3显着低于正常组和模型组。10.大鼠肝组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、TGF-β1表达免疫组织化学染色结果：模型组大鼠肝组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、TGF-β1含量显着高于正常组（P<0.01）,各治疗组均显着低于模型组（P<0.01）,各治疗组中雄预组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-SMA含量显着低于扶正组（P<0.05或P<0.01）,雄高组Ⅲ型胶原含量也显着低于扶正组（P<0.01）,雄高组和雄预组Ⅲ型胶原、α-SMA含量均显着低于雄低组（P<0.01）雄低组TGF-β1表达显着低于雄高组（P<0.01）。11.大鼠血清MMP-9含量和肝组织TIMP-1mRNA表达检测结果：模型组大鼠血清MMP-9含量显着低于正常组（P<0.05）,肝组织TIMP-1mRNA表达显着高于正常组（P<0.01）；雄预组血清MMP-9含量显着高于模型组（P<0.01）,其他用药组与模型组差别不显着；雄高组肝组织TIMP-1mRNA表达显着低于模型组（P<0.01）,与正常组差别不显着。12.雄芍汤含药血清对LX-2增殖的抑制率结果：20%和10%空白血清组抑制率均低于相应浓度的扶正组和雄芍汤组（P<0.01）,5%空白血清组抑制率与相应浓度的扶正组和雄芍汤组差别不显着；雄芍汤各浓度含药血清组对LX-2增殖的抑制率显着高于相应浓度的扶正含药血清组（P<0.05或P<0.01）。雄芍汤各浓度含药血清组中,20%组和10%组对LX-2增殖的抑制率差别不显着,但均显着高于雄芍汤5%组（P<0.01）。13.含药血清对LX-2中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、TGF-β1的表达影响的免疫组织化学染色结果：雄芍血清组和扶正血清组LX-2中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA和TGF-β1含量显着低于空白血清组（P<0.01）,雄芍血清组和扶正血清组Ⅰ型胶原差别不显着,扶正血清组Ⅲ型胶原、α-SMA含量显着低于雄芍血清组（P<0.05）,雄芍血清组TGF-β1含量显着低于扶正血清组（P<0.01）。结论：1.雄芍汤有确切的抗免疫性肝纤维化疗效,早期预防用药综合疗效较好,其抗肝纤维化的机理与扶正化瘀胶囊不完全相同,且在一定条件下某些方面的抗肝纤维化疗效优于扶正化瘀胶囊。2.雄芍汤抗肝纤维化的作用机理主要有如下几方面2.1保护肝细胞,改善肝功能的作用。2.2既抑制胶原等ECM的合成,又促进其降解。2.3提高肝纤维化大鼠清除氧自由基和抑制脂质过氧化能力2.4调节免疫功能2.5促进MMP生成,抑制TIMP-1mRNA表达,从而促进ECM降解2.6抑制HSC活化和增殖,减少促纤维化细胞因子的生成
张国梁[7]（2011）在《中医药防治肝纤维化研究进展》文中研究说明肝纤维化（hepatic fibrosis）是指肝细胞发生坏死及炎症刺激时,肝脏中胶原蛋白等细胞外基质（ECM）的增生与降解失去平衡,进而导致肝脏内纤维结缔组织异常沉积的病理过程,轻者称为纤维化,重者进而使肝小叶结构改进、假
高湲[8]（2010）在《芪蚣抗纤方活血化瘀法抗大鼠肝纤维化的分子机制研究》文中指出目的:研究芪蚣抗纤方中活血化瘀法抗肝损伤的分子机制,为临床治疗肝损伤以致肝纤维化运用以活血化瘀药为主的治疗原则提供理论依据。方法:用免疫损伤法复制大鼠肝损伤模型。随机分为正常对照组（简称空白组）、模型组、活血低剂量组、活血高剂量组,每组各10只,共4组。除空白组以生理盐水腹腔注射假处理、空白组和模型组每天生理盐水灌胃外,活血高、低剂量组分别用中药灌胃治疗,共8周。观察一般状况及体重变化。实验结束时称脾重,计算脾重指数;测定全血粘度;HE染色观察肝组织病理形态;全自动血生化仪测定肝功能指标ALT、A、G、A/G;酶联免疫吸附法（ELLSA法）测定血清转化生长因子-β1（TGF-β1）含量;免疫组织化学法（SP法）测定TGF-β1、信号转导分子2、3、7（Smad2、Smad3、Smad7）的含量及表达;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定肝组织TGF-β1mRNA表达。结果:1、活血低、高剂量组脾重及脾重指数明显降低（p<0.01）。2、活血高剂量组全血粘度较模型组显着下降（p<0.01）。3、活血低、高剂量组肝细胞变性、坏死及纤维增生程度较模型组明显减轻,并有一定的量效关系。4、活血低、高剂量组肝功能指标较模型组有改善或明显改善（p<0.05或p<0.01）。5、活血低、高剂量组血清及组织TGF-β1、Smad2、Smad3含量及表达较模型组明显降低（p<0.01）,其作用强度有一定的量效关系。6、活血高剂量组TGF-β1mRNA的表达较模型组明显下降（p<0.05）。结论:活血化瘀方具有抗大鼠肝纤维化的作用,其作用可能是通过以下机制实现:①抑制TGF-β1mRNA的表达及降低血清TGF-β1含量;②调控Smad系统;③降低全血粘度,改善肝组织微循环。
熊盛池[9]（2009）在《复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏的保护作用及对TIMP-1和TGF-β1表达的影响》文中指出第一部分复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏的保护作用目的:研究复元胶囊对猪血清所致大鼠肝纤维化的保护作用及其机制。方法:（1）48只雌雄各半SD清洁级大鼠,体重180～200g,鼠龄6～7周,分为正常组,模型组,复元胶囊低、中、高剂量组,阳性对照组（复方鳖甲软肝片水溶液组）6组,每组8只。（2）除正常组外,其余各组用猪血清,0.5ml/只,腹腔注射,每周两次（星期一,星期四）共10周,复制大鼠免疫性肝纤维化模型,同时给予复元胶囊低、中、高剂量组,阳性对照组相应药物干预。（3）观察各组动物的肝组织病理学变化,并检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性,检测血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、IV型胶原（IV-C）及层粘连蛋白（LN）的含量。结果:（1）模型组肝细胞结构排列紊乱,肝脏病理结构改变明显。复元胶囊低剂量组肝细胞结构排列紊乱,但较模型组轻;复元胶囊中、高剂量组,复方鳖甲软肝片水溶液组肝细胞结构排列与正常组比较差异不明显。（2）复元胶囊各组血清中ALT、AST、HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ均较模型组低,特别是复元胶囊高剂量组,差异有统计学意义（P< 0.05）。结论:复元胶囊对猪血清所致大鼠肝纤维化肝脏具有保护作用。第二部分复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏中TIMP-1和TGF-β1表达的影响目的:探讨复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏中TIMP-1和TGF-β1表达的影响方法:（1）48只雌雄各半SD清洁级大鼠,体重180～200g,鼠龄6～7周,分为正常组,模型组,复元胶囊低、中、高剂量组,阳性对照组（复方鳖甲软肝片水溶液组）6组,每组8只。（2）除正常组外,其余各组用猪血清,0.5ml/只,腹腔注射,每周两次（星期一,星期四）共10周,复制大鼠免疫性肝纤维化模型,同时给予复元胶囊低、中、高剂量组,阳性对照组相应药物干预。（3）免疫组化检测基质金属蛋白酶组织抑制因子1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1）及转化生长因子β（1transforming growth factorβ1,TGF-β1）结果:各组TIMP-l平均阳性面积及平均吸光度（A）值,模型组阳性面积和平均吸光度高于其他各组,复元胶囊低剂量组与阳性组比较差异有统计学意义（P<0.05）,复元胶囊中剂量组与阳性组比较无显着差异（P>0.05）,复元胶囊高剂量组与阳性组比较差异有统计学意义（P<0.05）,除复元胶囊高剂量组外各组与正常组比较差异有统计学意义（P<0.05）。各组TGF-β1平均阳性面积及平均吸光度（A）值,模型组阳性面积和平均吸光度高于其他各组,复元胶囊低剂量组与阳性组比较差异有统计学意义（P<0.05）,复元胶囊中剂量组与阳性组比较无显着差异（P>0.05）,复元胶囊高剂量组与阳性组比较差异有统计学意义（P<0.05）,除复元胶囊高剂量组外其它各组与正常组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论:复元胶囊对猪血清所致大鼠肝纤维化肝脏具有保护作用。其机制可能与下调肝组织TIMP-l、TGF-β1表达,减少细胞外基质沉积,减轻肝组织纤维化有关,复元胶囊高剂量组效果更明显,值得进一步研究。
王丽[10]（2009）在《以“浊毒”立论论治肝纤维化的理论初探及实验研究》文中认为肝纤维化（Hepatic fibrosis,HF）是指各种致病因素所引起的肝脏慢性损害和炎症,是多种慢性肝病共同的病理基础,是肝脏细胞外基质（extracellular matrix,ECM）合成和降解失衡、导致其过度沉积的结果,也是慢性肝炎进一步向肝硬化、肝癌发展的重要环节。以往的研究局限于将肝纤维化归为一种被动的静止状态,随着分子生物学研究方法和技术的日新月异,人们在肝星状细胞（hepatic stellate cells, HSC）活化、多种动物模型的建立、细胞因子信号传导通路、基因靶向治疗等方面取得了较大的进展。转化生长因子-β1（transforming growth factor- beta1-1,TGF-β1）、基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibit of metallo -Proteinase,TIMP-1）、ECM成分等已经成为研究的热点。目前研究的抗纤维化药物主要包括细胞保护类、HSC活化抑制类、细胞因子活性类、抑制ECM合成及分泌类、促进ECM降解类、中药单体和复方等。但肝纤维化是一个复杂的病理过程,临床上至今缺乏确切特效的抗纤维化药物与方法。中医药治疗疾病具有多方位、多环节、多靶点的特点,在肝纤维化的预防和治疗方面有其独特的优势。在当前形势下,寻找能够改善HF状态的中药或者中药提取物,并对其相关机制进行探索,不仅有利于中药现代化的研究,也将对HF治疗产生深远的影响。我们通过观察化浊解毒益气方对猪血清诱导的HF大鼠的干预研究,探讨肝纤维化的病理机制,为肝纤维化的治疗提供理论及实验依据。目的:以“浊毒”理论为依据探讨其在肝纤维化治疗中的地位,探讨化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠的影响及其可能的作用机制。主要内容包括以“浊毒”立论论治肝纤维化的理论初探;化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清AST、ALT、ALB、TP和病理形态学的影响;化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原和病理形态学的影响;化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1表达的影响;化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1表达的影响。方法:清洁级Wistar大鼠60只,雄性,体重200220g。适应性喂养一周后随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组（简称西药预防组）、化浊解毒益气方预防组（简称中药预防组）、秋水仙碱治疗组（简称西药治疗组）、化浊解毒益气方治疗组（简称中药治疗组）六组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均采用未灭活的猪血清腹腔注射,每次0.5ml/只,每周两次,连续8周。秋水仙碱预防组和中药预防组于造模的同时给药,每天上午灌胃一次,每次2ml,连续12周。秋水仙碱治疗组和中药治疗组于造模的第8周末给药,每天上午灌胃一次,每次2ml,连续4周。正常对照组给予等量生理盐水。各组分别于造模的第8周末、第12周末处死5只大鼠,腹主动脉取血,分离血清,测定各组大鼠干预后血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨基转移酶（AST）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）水平。其中ALT、AST用赖氏法测定;ALB用溴甲酚绿比色法测定;TP用双缩脲法测定;HA、LN、PCⅢ、CⅣ用放射免疫分析法测定。留取大鼠肝组织,采用苏木精-伊红染色和Masson染色（胶原纤维特殊染色法）观察肝组织病理形态学的变化。采用免疫组化和RT-PCR技术测定肝组织TGF-β1、TIMP-1蛋白和mRNA表达情况。所得数据经过整理,采用SPSS统计软件进行t检验或方差分析。结果:1化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清AST、ALT、ALB、TP和病理形态学的影响1.1化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清AST、ALT、ALB、TP的影响与正常对照组相比,模型组大鼠血清ALT、AST升高,ALB、TP降低,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型对照组相比,第8周末,西药预防组和中药预防组各组大鼠血清ALT、AST下降,TP、ALB升高,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）。12周末,各药物处理组大鼠血清ALT、AST下降,TP、ALB升高,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组,中药治疗组优于西药治疗组（P<0.05）。但是西药处理组之间、中药处理组之间各组大鼠血清指标差异均无统计学意义（P>0.05）。1.2化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝脏病理形态学的影响正常组肝小叶结构完整,肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列,无变性坏死,无纤维组织增生。模型组肝小叶结构严重破坏,肝细胞广泛脂肪变性、坏死伴炎性细胞浸润,纤维组织大量增生,个别动物可见假小叶形成。第8周末,各药物预防组肝小叶结构受损轻,可见肝细胞脂肪变性及炎性细胞浸润,但较模型组显着减轻。胶原纤维增生较模型组减轻,主要散在于肝血窦和disse间隙内,无假小叶形成,中药预防组优于西药预防组。第12周末,各药物干预组肝脏损伤程度均较模型组轻,西药治疗组病理改变与西药预防组相似,中药治疗组病理改变与中药预防组相似。且中药预防组优于西药预防组,中药治疗组优于西药治疗组。2化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原和病理形态学的影响2.1化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原的影响与正常对照组相比,模型组大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原升高,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型对照组相比,第8周末,西药预防组和中药预防组各组大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）。12周末,各药物处理组大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组,中药治疗组优于西药治疗组（P<0.05）。但是西药处理组之间、中药处理组之间各组大鼠血清指标差异均无统计学意义（P>0.05）。2.2化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠病理形态学的影响正常组肝小叶结构完整,肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列,无变性坏死,无纤维组织增生。模型组肝小叶结构严重破坏,肝细胞广泛脂肪变性、坏死伴炎性细胞浸润,绿色纤维组织大量增生,个别动物可见假小叶形成。8周末,各预防组肝小叶结构受损轻,可见肝细胞脂肪变性及炎性细胞浸润,但较模型组显着减轻。胶原纤维增生较模型组减轻,主要散在于肝血窦和disse间隙,无假小叶形成。且中药预防组优于西药预防组。12周末,各药物干预组肝脏损伤程度均较模型组显着减轻,且中药预防组优于西药预防组。中药治疗组优于西药治疗组。3化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1表达的影响3.1化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达的影响。正常组大鼠肝组织见少许TGF-β1阳性表达细胞,模型组大鼠肝组织中表达的阳性细胞比例显着高于正常组,表现为不均匀的黄褐色颗粒状物。与正常对照组相比,模型组大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达增高,差异有统计学意义（P<0.05）。8周末,与模型对照组相比,西药预防组和中药预防组两组大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）。12周末,各药物干预组大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）,中药治疗组优于西药治疗组。但是西药预防组与治疗组之间、中药预防组和治疗组之间各组大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达差异均无统计学意义（P>0.05）。3.2化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1mRNA表达的影响与正常对照组相比,模型组大鼠肝组织TGF-β1mRNA表达增高,差异有统计学意义（P<0.05）。8周末,与模型对照组相比,西药预防组和中药预防组两组大鼠肝组织TGF-β1mRNA表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）。12周末,各药物干预组大鼠肝组织TGF-β1mRNA表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）,中药治疗组优于西药治疗组。但是西药预防组与治疗组之间、中药预防组和治疗组之间各组大鼠肝组织TGF-β1mRNA表达差异均无统计学意义（P>0.05）。4化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1表达的影响4.1化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1蛋白表达的影响正常组大鼠肝组织见少许TIMP-1阳性表达细胞,模型组大鼠肝组织中表达的阳性细胞比例显着高于正常组,表现为不均匀的黄褐色颗粒状物。与正常对照组相比,模型组大鼠肝组织TIMP-1蛋白表达增高,差异有统计学意义（P<0.05）。8周末,与模型对照组相比,西药预防组和中药预防组两组大鼠肝组织TIMP-1蛋白表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）。12周末,各药物干预组大鼠肝组织TIMP-1蛋白表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）,中药治疗组优于西药治疗组。但是西药预防组与治疗组之间、中药预防组和治疗组之间各组大鼠肝组织TIMP-1蛋白表达差异均无统计学意义（P>0.05）。4.2化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1mRNA表达的影响与正常对照组相比,模型组大鼠肝组织TIMP-1mRNA表达增高,差异有统计学意义（P<0.05）。8周末,与模型对照组相比,西药预防组和中药预防组大鼠肝组织TIMP-1mRNA表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）。12周末,各药物干预组大鼠肝组织TIMP-1mRNA表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,且中药预防组优于西药预防组（P<0.05）,中药治疗组优于西药治疗组。但是西药预防组与治疗组之间、中药预防组和治疗组之间各组大鼠肝组织TIMP-1mRNA表达差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:1“浊毒”理论的提出对肝纤维化的中医病因病机分析具有重要意义,在肝纤维化的诊断和治疗中,占有重要的地位。2化浊解毒益气方能有效改善肝纤维化大鼠肝组织病理改变、减轻肝细胞的损伤,减少胶原纤维的生成,从而发挥其抗纤维化的作用。3化浊解毒益气方能显着降低大鼠血清AST、ALT含量,升高TP、ALB含量,减轻肝细胞的损伤,保护肝功能,通过保肝、抗炎而发挥其抗纤维化的作用。4化浊解毒益气方能显着降低大鼠血清HA、LN、PCⅢ型胶原、Ⅳ型胶原含量,减少细胞外基质的生成,从而发挥其抗纤维化的作用。5化浊解毒益气方能显着降低大鼠肝组织TGF-β1蛋白和mRNA的表达,抑制肝星状细胞的活化,通过调控相关细胞因子生物作用,促进细胞外基质的降解。6化浊解毒益气方能显着降低大鼠肝组织TIMP-1蛋白和mRNA的表达,通过调节MMPS和TIMPS的失衡,促进异常合成的细胞外基质的降解,减少细胞外基质的过度沉积。
二、汉丹肝乐对免疫性肝纤维化模型大鼠转化生长因子-β_1的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、汉丹肝乐对免疫性肝纤维化模型大鼠转化生长因子-β_1的影响（论文提纲范文）
（1）四逆散加味方对免疫诱导肝纤维化大鼠肝组织NOX、PI3K/Akt信号通路的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论探讨 |
| 一、中医学对肝纤维化的认识 |
| 二、肝纤维化的发病机制探讨 |
| 三、四逆散加味方的选用 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 引言 |
| 一、实验研究技术路线图 |
| 二、实验材料 |
| 三、实验方法 |
| 四、实验数据处理 |
| 五、实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 第三部分 文献综述 中药通过PI3K/AKT信号通路抗肝纤维的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（2）蒿鳖养阴软坚方通过Nrf2/γ-GCS信号通路抑制酒精性肝纤维化作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 实验材料 |
| 1.1 动物和细胞株 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验试剂及配制 |
| 实验方法 |
| 2.1 体内实验方法 |
| 2.1.1 造模 |
| 2.1.2 分组用药 |
| 2.1.3 处理动物 |
| 2.2 体内实验指标检测 |
| 2.2.1 肝组织免疫组化实验 |
| 2.2.2 肝组织羟脯氨酸含量测定 |
| 2.2.3 Western blot检测大鼠肝组织Nrf2、γ-GCS蛋白的表达 |
| 2.3 体外实验方法 |
| 2.3.1 LX-2 细胞的复苏 |
| 2.3.2 LX-2 细胞的培养与传代 |
| 2.3.3 LX-2 细胞的冻存 |
| 2.4 体外实验指标检测 |
| 2.4.1 LX-2 生长曲线的绘制 |
| 2.4.2 MTT法检测两种提取方案复方对乙醛活化的LX-2 细胞增殖的影响 |
| 2.4.3 不同提取方案复方与ATRA合用对活化的LX-2 细胞谷胱甘肽(GSH)含量的影响 |
| 2.5 统计学方法 |
| 实验结果 |
| 3.1 体内实验结果 |
| 3.1.1 粉末提取方案的蒿鳖养阴软坚方对酒精性肝纤维化模型肝组织中的免疫组化的影响 |
| 3.1.2 不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对酒精性肝纤维化大鼠肝组织胶原蛋白含量的影响 |
| 3.1.3 Western blot方法检测大鼠肝组织中Nrf2蛋白、γ-GCS蛋白的表达 |
| 3.2 体外实验结果 |
| 3.2.1 不同提取方案的复方对LX-2 细胞上清液中Hyp含量和LDH活力的影响 |
| 3.2.2 绘制LX-2 生长曲线 |
| 3.2.3 不同浓度和不同作用时间乙醛对LX-2 活化增殖率的影响 |
| 3.2.4 不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对乙醛活化的LX-2 细胞增殖率影响 |
| 3.2.5 阳性药物莱菔硫烷 (SFN) 对乙醛活化的LX-2 细胞增殖率的影响 |
| 3.2.7 不同提取方案复方与ATRA合用对活化的LX-2 细胞谷胱甘肽(GSH)含量的影响 |
| 讨论 |
| 4.1 乙醇与酒精性肝纤维化模型的关系 |
| 4.1.1 乙醇与大鼠酒精性肝纤维化模型的关系 |
| 4.1.2 乙醛与细胞酒精性肝纤维化模型的关系 |
| 4.2 不同提取方案复方减轻酒精性肝纤维化的作用 |
| 4.2.1 不同提取方案复方对肝组织胶原蛋白含量的影响 |
| 4.3 不同提取方案复方防治酒精性肝纤维化的作用机制探讨 |
| 4.3.1 不同提取方案复方对LX-2 增殖的影响 |
| 4.3.2 与Nrf2通路抑制剂ATRA和Nrf2通路上调剂SFN作用关系比较 |
| 4.4 粉末提取方案的复方对体内、外酒精性肝纤维化模型内Nrf2蛋白以及γ-GCS蛋白表达的作用 |
| 4.4.1 粉末提取方案的复方对大鼠肝组织中的Nrf2蛋白以及 γ-GCS蛋白的影响 |
| 4.4.2 粉末提取方案的复方对乙醛活化的LX-2 细胞内Nrf2蛋白以及 γ-GCS蛋白表达的作用 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 肝纤维化发病机制和相关疗法与Nrf2通路关系 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）苷泰胶囊抗肝纤维化作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 绪论 |
| 1 研究抗肝纤维化药物的紧迫性和现实意义 |
| 2 中药复方抗肝纤维化药理研究进展 |
| 3 本课题的总体研究思路与内容 |
| 3.1 研究目的和意义 |
| 3.2 主要研究内容 |
| 3.3 技术路线图 |
| 第一部分 苷泰胶囊抗肝纤维化药效学研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物与试剂 |
| 1.3 仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 造模与给药 |
| 2.3 样本收集与处理 |
| 2.4 比色法测定大鼠血清AST、ALT的活性 |
| 2.5 ELISA法检测血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ含量 |
| 2.6 碱水解法测定肝组织HyP含量 |
| 2.7 大鼠肝脏组织病理学检查 |
| 2.8 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 苷泰胶囊对肝纤维化大鼠血清AST、ALT活性的影响 |
| 3.2 苷泰胶囊对肝纤维化大鼠血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ含量的影响 |
| 3.3 苷泰胶囊对肝纤维化大鼠肝组织HyP含量的影响 |
| 3.4 苷泰胶囊对肝纤维化大鼠肝脏组织病理学的影响 |
| 4 小结与讨论 |
| 第二部分 苷泰胶囊抗肝纤维化作用机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验试剂 |
| 1.2 仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 Western blot |
| 2.2 免疫组化 |
| 2.3 RT-PCR |
| 2.4 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 苷泰胶囊对肝纤维化大鼠肝脏α-SMA表达的影响 |
| 3.2 苷泰胶囊对肝纤维化大鼠肝脏NF-κB-p65核转位的影响 |
| 3.3 苷泰胶囊对肝纤维化大鼠肝脏TNF-α、IL-6和TGF-β1表达的影响 |
| 4 小结与讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（4）中药复方抗肝纤维化药理作用研究进展（论文提纲范文）
| 1 活血化瘀类 |
| 2 补益类 |
| 3 清热祛湿类 |
| 4 疏肝健脾类 |
| 5 讨论 |
（5）汉丹肝乐对大鼠肝纤维化PI3K/Akt信号通路的影响及意义（论文提纲范文）
| 核心提示: |
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1动物分组及动物模型复制: |
| 1.2.2实验指标的检测: |
| 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组大鼠血清ALT、AST浓度比较 |
| 2.2 肝组织病理学改变 |
| 2.3 免疫组织化学检测肝组织中A k t1、磷酸化Akt1蛋白表达情况 |
| 2.4 Western blot检测肝组织中Akt1、磷酸化Akt1蛋白表达情况 |
| 2.5 TUNEL法检测肝组织中HSC凋亡情况 |
| 3 讨论 |
| 背景资料 |
| 同行评议者 |
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（6）雄芍汤防治肝纤维化作用及机理研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一部分 雄芍汤防治大鼠免疫性肝纤维化的作用及机理实验研究 |
| 实验一 猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化模型的成功复制 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 造模 |
| 2.3 观察指标和方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠一般情况变化 |
| 3.2 大鼠体重变化情况 |
| 3.3 大鼠肝组织形态学观察 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 肝纤维化模型复制方法的选择 |
| 4.2 模型复制相关的问题 |
| 实验二 雄芍汤防治大鼠免疫性肝纤维化的作用及机理实验研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药物及其制备 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 造模 |
| 2.3 给药 |
| 2.4 标本的采集与处理 |
| 2.5 观察指标和方法 |
| 2.6 统计学处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 治疗过程中大鼠一般情况变化 |
| 3.2 大鼠体重变化情况 |
| 3.3 肝重指数、脾重指数检测结果 |
| 3.4 肝功能相关指标检测结果 |
| 3.5 血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C检测结果 |
| 3.6 肝组织形态学观察结果 |
| 3.7 肝组织Hyp检测结果 |
| 3.8 血清SOD、MDA检测结果 |
| 3.9 血清IgE、MMP-9、补体C_3检测结果 |
| 3.10 肝组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫组织化学染色观察结果 |
| 3.11 肝组织α-SMA、TGF-β_1SABC免疫组织化学染色观察结果 |
| 3.12 肝组织TIMP-1mRNA的表达检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 雄芍汤组方理论依据及方解 |
| 4.2 雄芍汤方中诸药的现代药理学研究 |
| 4.3 治疗过程中遇到的问题 |
| 4.4 雄芍汤预防和治疗大鼠肝纤维化的疗效分析 |
| 4.5 雄芍汤预防和治疗大鼠肝纤维化的机理分析 |
| 第二部分 雄芍汤含药血清对体外培养的肝星状细胞影响的实验研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 人肝星状细胞系LX-2 |
| 1.4 主要试剂及耗材 |
| 1.5 主要仪器设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 雄芍颗粒含药血清的制备 |
| 2.2 人肝星状细胞LX-2的常规培养 |
| 2.3 人肝星状细胞LX-2的传代培养 |
| 2.4 人肝星状细胞LX-2的冻存 |
| 2.5 冻存人肝星状细胞LX-2的复苏 |
| 2.6 MTT比色法测定雄芍汤含药血清对LX-2增殖的影响 |
| 2.7 SABC免疫组织化学染色法测LX-2中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、TGF-β1的表达 |
| 2.8 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 含药血清对LX-2增殖的抑制率结果 |
| 3.2 含药血清对LX-2中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、TGF-β1的表达影响结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录一 在读博士期间发表论文、科研情况 |
| 附录二 肝纤维化动物模型制作方法研究进展 |
| 附图 |
（7）中医药防治肝纤维化研究进展（论文提纲范文）
| 临床治疗方面 |
| 1 对传统的治疗原则、方法的认识 |
| 1.1 活血化瘀 |
| 1.2 行水化 |
| 1.3 扶正纠偏 |
| 2 临床治疗 |
| 实验研究 |
| 1 对肝细胞酶学的影响 |
| 2 对星状细胞的影响 |
| 3 对血清肝纤维化标志物的影响 |
| 4 对功能性基因的影响 |
| 5 抗氧化 |
| 6 对淋巴液的影响 |
| 7 对胰岛功能的影响 |
| 8 对细胞因子的影响 |
| 9 对血流动力学的影响 |
（8）芪蚣抗纤方活血化瘀法抗大鼠肝纤维化的分子机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 对透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）及胶原蛋白的影响 |
| 2 抑制HSC增殖,促进凋亡 |
| 3 对基质金属蛋白酶（MMPS）和金属蛋白酶抑制因子（TIMPS）的调节 |
| 4 对氧化和抗氧化的影响 |
| 5 对细胞因子的影响 |
| 6 结语 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
（9）复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏的保护作用及对TIMP-1和TGF-β1表达的影响（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏的保护作用 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏中TIMP-1 和TGF-Β_1表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 全文总结 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（10）以“浊毒”立论论治肝纤维化的理论初探及实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 研究论文以“浊毒”立论论治肝纤维化的理论初探及实验研究 |
| 引言 |
| 第一部分 以“浊毒”立论论治肝纤维化的理论初探 |
| 前言 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清 AST、ALT、ALB、TP 和病理形态学的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ型胶原和病理形态学的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠细胞因子的影响 |
| 实验一 化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1 表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验二 化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1 表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述一 肝纤维化形成机制的研究进展 |
| 综述二 中医药治疗肝纤维化的实验研究进展 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、汉丹肝乐对免疫性肝纤维化模型大鼠转化生长因子-β_1的影响（论文参考文献）
- [1]四逆散加味方对免疫诱导肝纤维化大鼠肝组织NOX、PI3K/Akt信号通路的影响[D]. 方惠娴. 甘肃中医药大学, 2018(01)
- [2]蒿鳖养阴软坚方通过Nrf2/γ-GCS信号通路抑制酒精性肝纤维化作用[D]. 李杉杉. 天津医科大学, 2017(03)
- [3]苷泰胶囊抗肝纤维化作用及其机制研究[D]. 李光全. 成都中医药大学, 2016(05)
- [4]中药复方抗肝纤维化药理作用研究进展[J]. 李光全,黄奕雪,尹萍,桑秀秀,贺兰芝,王家葵,柏兆方. 中药与临床, 2016(02)
- [5]汉丹肝乐对大鼠肝纤维化PI3K/Akt信号通路的影响及意义[J]. 胡晓霞,王艳,王晋星一. 世界华人消化杂志, 2014(14)
- [6]雄芍汤防治肝纤维化作用及机理研究[D]. 郝瑞春. 湖北中医药大学, 2011(05)
- [7]中医药防治肝纤维化研究进展[J]. 张国梁. 中医药临床杂志, 2011(02)
- [8]芪蚣抗纤方活血化瘀法抗大鼠肝纤维化的分子机制研究[D]. 高湲. 长春中医药大学, 2010(04)
- [9]复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏的保护作用及对TIMP-1和TGF-β1表达的影响[D]. 熊盛池. 重庆医科大学, 2009(06)
- [10]以“浊毒”立论论治肝纤维化的理论初探及实验研究[D]. 王丽. 河北医科大学, 2009(10)
标签：转化生长因子-β论文; 肝纤维化指标检查论文; 血清蛋白论文; 细胞生长因子论文; 健康论文;