一、某些因素对菠萝中菠萝蛋白酶热稳定性的影响(论文文献综述)
丁欣[1](2021)在《季铵盐表面活性剂反胶束液液萃取蛋白质的效能研究》文中指出蛋白质大部分来自于生物(如酵母、黑曲霉、绿脓杆菌等)发酵液或天然产物(如苹果、菠萝、鸡蛋等)提取液,蛋白制品的规模化应用依赖于提取纯化技术。目前所用的反胶束液液萃取技术仍处于实验室研究阶段,微观机理尚待明确,并存在表面活性剂用量高、对蛋白质的装载能力低下、萃取过程中体系易乳化、后萃取后蛋白质的活性有待提高等问题。本论文以季铵盐单链表面活性剂(包括十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB))和季铵盐Gemini表面活性剂(如二溴化-双(二甲基十二烷基)戊二胺(C12-C5-Cu)、二溴化-双(二甲基十二烷基)辛二胺(C12-C8-C12)、二溴化-双(二甲基十二烷基)十二胺(C12-C12-C12)、二溴化-双(二甲基十六烷基)辛二胺(C16-C8-C16)和二溴化-双(二甲基十六烷基)戊二胺(C16-C5-C16))配制反胶束,先以菠萝果浆中的菠萝蛋白酶(BM)为目标蛋白,分别从萃取过程中水相pH值、水相离子强度、表面活性剂结构和浓度、粗酶稀释倍数以及反胶束中溶剂和助溶剂的结构和含量等影响因素入手,阐述季铵盐表面活性剂反胶束液液萃取酶的效能及对蛋白质活性的影响机制。随后改变目标蛋白质,从蛋白质的性质出发,设计、优化季铵盐表面活性剂结构和反胶束组成,提高反胶束的萃取效能,实现不同蛋白质的高效提取,以期为蛋白质分离纯化提供切实、可行的解决思路与方案。论文主要分为以下五个部分:1.以异辛烷为溶剂、正丁醇和正己醇为助溶剂配制季铵盐单链表面活性剂反胶束,从菠萝果浆中提取菠萝蛋白酶。研究结果表明:适当提高表面活性剂浓度、增加pH值、前萃液中添加适量的NaCl、后萃使用KBr均有助于季铵盐单链表面活性剂与菠萝蛋白酶结合。DTAB反胶束萃取后菠萝蛋白酶活性回收率(AR)最高是54%、菠萝蛋白酶纯化倍数(PF)是1.0、蛋白质总萃取效率(EF)是52%。增加疏水链长有助于季铵盐单链表面活性剂反胶束萃取效能的提高。使用CTAB反胶束时,萃取后菠萝蛋白酶的AR、PF和EF分别为82%、1.5和54%。反胶束萃取效能的增大与其中菠萝蛋白酶色氨酸所处微环境的极性降低相关。2.随着季铵盐Gemini表面活性剂间隔基长度的增加(C12-C5-C12→C12-C8-C12,C16-C5-C16→C16-C8-C16),反胶束对菠萝蛋白酶的萃取效能有所提高,但当间隔基团s增加到12后(C12-C12-C12),反胶束萃取效能下降。疏水链长增加后(C12-C5-C12→C16-C5-C16,C12-C8-C12→C16-C8-C16)反胶束萃取效能降低。对于C12-Cs-C12(s=5,8,12)反胶束来说,C12-C8-C12反胶束的萃取效能较佳,纯化后菠萝蛋白酶的AR为107%,PF为1.6:对C16-Cs-C16(s=5,8)反胶束而言,C16-C8-C16反胶束萃取效能最高,萃取后菠萝蛋白酶的AR和PF分别为98%和1.8。3.混合反胶束对菠萝蛋白酶的萃取效能依赖于反胶束组成,2030mg·mL-1C12-C8-C12与1014 mg.ml/1 DTAB复配后,混合反胶束萃取效能优于相应单一表面活性剂反胶束;1.540 mg·mL-1 C16-C8-C16和1030 mg·mL-1CTAB复配后,混合反胶束萃取效能低于相应单一表面活性剂反胶束。20 mg·mL-1 C12-C8-C12/10 mg·mL-1DTAB混合反胶束萃取效能最佳,菠萝蛋白酶AR为98%、PF为1.4、EF为68%。4.以异辛烷作为溶剂时,反胶束略大于以正己烷作为溶剂的反胶束,有助于菠萝蛋白酶的萃取;以正丁醇和正己醇作为助溶剂时,可以使得菠萝蛋白酶在两相间的迁移更加便利。随着Gemini表面活性剂间隔基长度的增加,C12-Cs-C12(s=5,8,12)反胶束前萃取体系的分相得以改善。对DTAB、CTAB、C12-C5-C12、C16-C5-C16、C16-C8-C16、C12-C8-C12/DTAB和C16-C8-C16/CTAB来说,以80%异辛烷、15%正丁醇和5%正己醇配制反胶束最有利于菠萝蛋白酶的纯化。对C12-C8-C12和C12-C12-C12而言,以90%正己烷和10%正己醇配制反胶束可以在更宽的pH范围内实现对菠萝蛋白酶的高效提纯。5.进一步利用季铵盐表面活性剂反胶束提纯模型蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),以及苹果中的多酚氧化酶(PPO),探讨不同蛋白质对反胶束液液萃取效能的影响。对于溶解性较好的蛋白质(如BSA和菠萝蛋白酶)的纯化,C12-C12-C12或C16-C8-C16为最佳表面活性剂;提取疏水性较强的OVA时,C12-C5-C12或C16-C8-C16较为适宜;季铵盐表面活性剂反胶束不适合用以提纯多酚氧化酶。
行云逸[2](2020)在《利用菠萝果肉纤维素构建水凝胶-脂质体复合载药体系及其缓释的研究》文中指出本文以农产品加工废弃物-菠萝果肉渣为原料,提取分离菠萝果肉纤维素,同时利用离子液体1-丁基-3-甲基咪唑氯盐(Bmim Cl)作溶剂制备水凝胶,作为载药体系用于益生菌的包埋,对其进行结构表征及性能研究,为菠萝加工废弃物的高值化利用和益生菌的递送系统提供途径和理论基础。研究内容和结果如下:(1)以菠萝果肉渣为原料,通过热水除杂、漂白处理和碱处理,提取得到菠萝果肉纤维素,对其进行结构表征,并通过响应面实验来考察碱液浓度、碱处理温度和碱处理时间对纤维素提取率的影响。结果显示,分离产物具有纤维素的主要特征,而属于木质素和半纤维素的特征吸收峰几乎完全消失,说明分离产物为高纯度的纤维素;菠萝果肉渣经漂白处理和碱处理后,表面粗糙程度增加,束状结构遭到破坏。响应面实验结果显示,碱液浓度10.10%、碱处理温度50.05℃、碱处理时间4.98 h时,菠萝果肉纤维素得率最高,可达48.67%。(2)以提取得到的菠萝果肉纤维素为原料,利用离子液体Bmim Cl作溶剂制备水凝胶,同时以丙烯酸为改性单体制备p H敏感性水凝胶(pineapple pulp cellulose hydrogel-acrylic acid,PPCH-AA),对其进行结构表征和性能分析,并进行益生菌的吸附,研究载药水凝胶在模拟肠胃p H环境中的缓释性能。实验发现,所制备的p H敏感性水凝胶出现了属于羰基的特征吸收峰,说明丙烯酸成功接枝到纤维素链上;纤维素在制备水凝胶的过程中由I型晶体结构转变为II型;纤维素制备成水凝胶后,原来的束状结构消失,表面光滑,内部呈现多孔结构;与载菌的菠萝果肉纤维素水凝胶相比,载菌PPCH-AA表现出明显的p H敏感性,在模拟肠道p H环境的溶液中的累积释放量为58.01mg/g,释放率可达87.02%。(3)以大豆卵磷脂和胆固醇为原料,采用薄膜水化法制备益生菌脂质体(Pro-lips),以益生菌的包封率为评价指标,通过单因素实验和正交实验,筛选出制备Pro-lips的最佳原料配比和工艺,并以菠萝果肉纤维素水凝胶为载体吸附益生菌脂质体,研究复合载药体系在模拟肠胃p H环境中的缓释性能。结果显示,脂质体的最优制备工艺为:益生菌:卵磷脂:胆固醇的质量比1:12:2、益生菌浓度1.5 mg/m L、水化温度60℃、水化时间2 h;制备的脂质体平均粒径为147.52±9.86 nm(n=3),Zeta电位为-15.33±1.07 m V(n=3);脂质体颗粒近似球状,脂质球之间无粘连和聚集。与载菌水凝胶相比,水凝胶-脂质体复合载药体系具有更好的缓释效果,其中负载脂质体的PPCH-AA表现出明显的p H敏感性,在模拟肠道p H环境的溶液中的累积释放量为49.98 mg/g,累计释放率为74.97%。
陈辉,黄惠华[3](2020)在《改性菠萝皮渣纤维素固定化菠萝蛋白酶研究》文中研究指明为了探究改性纤维素作为固定化酶载体的可行性,在离子液体中用L-丝氨酸对提取的菠萝皮渣纤维素进行均相改性,并将改性菠萝皮渣纤维素用于固定化菠萝蛋白酶。采用傅里叶变换红外光谱仪、热重分析仪以及X射线衍射光谱仪对菠萝皮渣纤维素、改性菠萝皮渣纤维素以及固定化酶进行了表征。结果表明,菠萝皮渣纤维素被成功改性,晶体结构从纤维素Ⅰ型转变为纤维素Ⅱ型;菠萝蛋白酶成功地固定在改性菠萝皮渣纤维素上,且固定化酶较改性菠萝皮渣纤维素的热稳定性得到提升。对酶的固定化工艺和酶学特性进行研究,结果表明,固定化酶的优化制备工艺为菠萝皮渣纤维素与离子液体的质量比为3:100,L-丝氨酸与菠萝皮渣纤维素的质量比为1:1,戊二醛溶液体积分数为1%,交联时间为1.0 h。与游离菠萝蛋白酶相比,固定化菠萝蛋白酶具有更好的温度稳定性和酸环境稳定性。
陈辉,黄惠华[4](2020)在《菠萝皮渣羧甲基纤维素/海藻酸钠复合水凝胶珠固定化菠萝蛋白酶的制备及稳定性研究》文中研究表明本实验以菠萝皮渣羧甲基纤维素、海藻酸钠为原料,制备了菠萝皮渣羧甲基纤维素/海藻酸钠复合水凝胶珠,用于固定化菠萝蛋白酶。采用单因素法分析菠萝皮渣羧甲基纤维素与海藻酸钠的质量比、氯化钙的浓度、菠萝蛋白酶浓度、戊二醛体积分数和交联时间对固定化酶活性的影响。结果表明,固定化酶的优化制备工艺为:菠萝皮渣羧甲基纤维素与海藻酸钠的质量比为2∶3,氯化钙的浓度为1.0%,菠萝蛋白酶浓度为2.0 mg/m L,戊二醛体积分数为1.0%,交联时间为60 min。制备的固定化酶比游离酶具有更好的热稳定性,在80℃环境下放置2.0 h后,固定化酶的相对酶活性为35.1%,而游离菠萝蛋白酶在此条件下几乎失活;在pH为11条件下放置24 h后,游离酶的相对酶活性为43.2%,而固定化酶相对酶活性为85.1%,说明固定化酶比游离酶更耐受碱性环境。另外,固定化酶重复使用7次后,相对酶活性为60.5%,说明制备的固定化酶具有较好的重复使用性能。
张梦园[5](2019)在《干白葡萄酒蛋白质稳定性研究》文中研究表明蛋白质是决定干白葡萄酒稳定性的主要物质。研究蛋白质种类、数量、结构对解决干白葡萄酒中蛋白质的稳定性具有重要的理论意义。本试验以宁夏贺兰山东麓干白葡萄酒为原料,用聚丙烯酰氨凝胶电泳研究干白葡萄酒中蛋白质的种类、含量,结合热稳定试验研究每种蛋白质的稳定性;用拉曼光谱法研究干白葡萄酒沉淀蛋白质二级结构的变化;并利用植物蛋白酶澄清干白葡萄酒,研究其对干白葡萄酒蛋白质稳定性的影响。研究结果如下:1、干白葡萄酒中的蛋白质主要有分子量为22 kDa的类甜蛋白、33 kDa的几丁质酶、65 kDa的糖蛋白,类甜蛋白含量>糖蛋白含量>几丁质酶含量;类甜蛋白和几丁质酶稳定性较差,糖蛋白稳定性较好;2、干白葡萄酒蛋白质稳定的二级结构主要有二硫键、α-螺旋、β-折叠;热稳定检验使沉淀蛋白质二硫键数量显着下降,α-螺旋、β-折叠数量显着下降,苯丙氨酸环的伸缩振动增加;蛋白质大分子发生了解螺旋暴露出更多的肽链残基与其他物质反应,从而导致结构的不稳定;3、蛋白酶对于干白葡萄酒有较好的澄清作用,减少了蛋白质的数量。木瓜蛋白酶澄清葡萄酒的最优条件为添加量100 mg/L在22℃下作用48小时搅拌3次,菠萝蛋白酶澄清葡萄酒的最优条件为添加量3 mg/L在18℃下作用24小时搅拌3次。综上所述,干白葡萄酒中的不稳定蛋白质主要为类甜蛋白,干白葡萄酒蛋白质稳定的二级结构为二硫键、a-螺旋、β-折叠,热稳定检验使二硫键、a-螺旋、β-折叠数量减少而导致蛋白质不稳定,植物蛋白酶可以有效澄清干白葡萄酒提高蛋白质稳定性。
蔡云凤[6](2019)在《双水相浮选体系的设计构建及其在分离纯化菠萝蛋白酶和融合β-葡萄糖苷酶中的应用研究》文中认为酶是一种能够催化特定化学反应的生物催化剂。因其温和的反应条件、对底物的专一性和高效率的催化活性,已在诸多工业领域广泛应用。然而,对植物来源的酶或是微生物来源的酶来说,将其从复杂的体系中分离出来的同时又要防止其结构的改变以及生物活性的丧失,一直是其分离纯化过程中的关键问题。双水相浮选技术作为一种复合型分离技术,具有纯化步骤简易、操作环境温和和易于放大等优点,因而被逐渐引入到对生物制品的分离纯化中。本文以菠萝蛋白酶和融合β-葡萄糖苷酶为例,构建新型的双水相浮选体系对酶进行分离纯化,具体内容如下:(1)设计合成了温敏聚合物L64-IDA-Cu(Ⅱ)作为浮选捕集剂,并利用FT-IR、原子吸收光谱法和透射率实验对其结构和温敏性能进行研究。通过考察一系列离子液体(IL)和盐对菠萝蛋白酶的酶活稳定性影响,构建[Bmim]Br-K2HPO4的离子液体双水相浮选(ILATPF)体系,并以L64-IDA-Cu(Ⅱ)为捕集剂结合ILATPF对菠萝蛋白酶进行分离纯化。通过单因素实验和响应曲面法(RSM)优化得到实验条件:盐浓度,浮选时间,L64-IDA-Cu(Ⅱ)浓度,IL浓度和浮选流速分别为0.50 g/mL,30min,0.30g/L,60%和30mL/min,并得出最佳浮选效果:Ye和Kp值分别达到97.43%和3.45。对于浮选分离后得到的L64-IDA-Cu(Ⅱ)-菠萝蛋白酶复合物以及上相离子液体的混合物,利用L64-IDA-Cu(Ⅱ)的温敏性能,通过两步沉淀去除离子液体和L64-IDA-Cu(Ⅱ)本身,实现最终纯化(得到的菠萝蛋白酶的Ye、Kp和PF值为96.90%、5.97和7.18)。接着将本实验方法与其他纯化方法进行比较,证明本实验方法具有良好的纯化效果。最终通过SDS-PAGE分析,证明纯化的菠萝蛋白酶的纯度优良,并用紫外吸收光谱分析(UV-vis)、FT-IR和圆二色谱(CD)验证纯化过程对菠萝蛋白酶的结构没有造成影响。(2)本实验成功表达了含GB和ELP标签的融合β-葡萄糖苷酶(Glu):Glu-linker-ELP-GB(GLEGB)。通过考察一系列聚合物、盐和表面活性剂对Glu的酶活稳定性影响,构建了 PEG-(NH4)2SO4的ATPF体系。然后利用融合蛋白GLEGB上的GB标签的疏水作用结合ATPF对融合蛋白进行初步纯化。通过单因素实验和RSM优化得到ATPF纯化GLEGB的条件:PEG 2000浓度,BS-12浓度,浮选时间和浮选流速分别为40.00%,1.50%,30 min和30 mL/min,并得到最佳的浮选效果:Ye和PF值分别为172.86%和9.58。然后对于得到的GLEGB和PEG2000的混合液,利用GLEGB上的ELP标签的逆转换循环(ITC)特性去除PEG 2000,得到进一步纯化的GLEGB水溶液(纯化的GLEGB的Ye和PF值达到 124.92%和24.26)。并将ATPF-ITC联用方法用于其他酶(Glu、Glu-linker-ELP(GLE)、Glu-linker-GB(GLG)、Glu-linker-ELP-6His(GLEH))的分离纯化,证明了GB和ELP标签联用的良好纯化效果。最后通过SDS-PAGE分析,证明纯化的GLEGB的纯度良好,并通过UV-vis、FT-IR和CD对购买的Glu和纯化的GLEGB进行比较,验证纯化过程对酶的结构没有造成影响。
郭晶晶[7](2018)在《基于表面活性剂调控菠萝蛋白酶活性的研究》文中认为酶在医药、食品、化工等领域广受关注,有关如何保持酶活性及稳定性的研究具有重要意义。本论文以酪蛋白为底物,研究了商品化菠萝蛋白酶和菠萝水果中菠萝蛋白酶的活性及稳定性,探究了阴离子表面活性剂十六烷基硫酸钠(SDS)、阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)、Gemini表面活性剂二溴化-双(二甲基十二烷基)戊二胺(12-5-12)、二溴化-双(二甲基十二烷基)庚二胺(12-8-12)、二溴化-双(二甲基十二烷基)十二胺(12-12-12)、二溴化-双(二甲基十六烷基)戊二胺(16-5-16)、二溴化-双(二甲基十六烷基)辛二胺(16-8-16)和非离子表面活性剂辛基苯基聚氧乙烯醚(Tx-100)对菠萝蛋白酶活性和稳定性的调控作用,通过荧光光谱和1H NMR研究了表面活性剂和菠萝蛋白酶的相互作用,并在此基础上利用表面活性剂反胶束对菠萝蛋白酶进行了提取。实验结果表明,阳离子和非离子表面活性剂可提高菠萝蛋白酶的活性,阴离子表面活性剂可抑制菠萝蛋白酶的活性。当DTAB浓度达到2mM、CTAB浓度达到0.3 mM后,菠萝果肉中菠萝蛋白酶粗酶活性可以提高20%-30%左右,商品化菠萝蛋白酶活性可以分别提高70%和 50%。当 Gemini 表面活性剂 12-s-12(s=5、8、12)达到 0.1 mM,16-s-16(s=5、8)达到20 μM后,菠萝蛋白酶粗酶活性可分别提高50%和20%左右,商品化菠萝蛋白酶活性可分别提高80%和60%左右。具有较短疏水链的表面活性剂使菠萝蛋白酶对温度、pH、离子强度的耐受性增强,可使菠萝蛋白酶在更宽的反应条件下表现出较高的活性。当Tx-100/16-5-16复配后,菠萝蛋白酶粗酶活性可得到进一步的提升,说明非离子/阳离子表面活性剂存在协同效应。此外,阴离子表面活性剂会降低菠萝蛋白酶的荧光强度,阳离子表面活性剂会提高菠萝蛋白酶的荧光强度,且菠萝蛋白酶荧光强度的降低对应菠萝蛋白酶活性的衰减,菠萝蛋白酶荧光强度的增高对应菠萝蛋白酶活性的增加。1H NMR研究表明随着表面活性剂浓度的增加,阳离子表面活性剂极性头基信号峰的化学位移向低场移动并伴随半峰宽变宽,阴离子表面活性剂头基信号峰的化学位移向高场移动并伴随半峰宽变窄,且表面活性剂疏水链上氢的化学位移均向低场移动。菠萝蛋白酶加入后,表面活性剂的化学位移均向高场移动。菠萝蛋白酶的化学位移也与表面活性剂结构相关,阳离子表面活性剂存在时菠萝蛋白酶的化学位移均向低场移动,半峰宽变宽,阴离子表面活性剂存在时菠萝蛋白酶峰化学位移向高场移动,半峰宽变窄。阳离子表面活性剂与菠萝蛋白酶的化学位移还与温度有关。随着孵育温度的升高,表面活性剂和菠萝蛋白酶的化学位移会进一步向高场移动。说明阳离子表面活性剂与菠萝蛋白酶之间的静电作用和疏水作用使得表面活性剂加入后菠萝蛋白酶的构象更舒展。此外,Gemini表面活性剂反胶束在菠萝蛋白酶提取中也表现出很好的效能。研究结果使用间隔基较长的Gemini表面活性剂时,不仅可以在较宽的表面活性剂浓度范围内对菠萝蛋白酶进行萃取,而且表现出较好的提取效能。12-12-12表面活性剂反胶束对菠萝蛋白酶萃取效能最佳,能使菠萝蛋白酶的活性回收率达到160%,纯化倍数达到3倍、萃取效率达到60%。
戴宏杰[8](2018)在《菠萝皮渣纤维素基水凝胶的制备、表征及其性能研究》文中提出菠萝(Ananas comosus L.Merryl)经鲜食或加工成罐头、果汁等将产生30%50%的皮渣废弃物,其主要由纤维素、半纤维素、木质素和果胶等物质组成。本文从菠萝皮渣中提取纤维素后进行改性并制备不同类型的水凝胶复合材料,对水凝胶的结构、溶胀性能、智能响应特性、吸附亚甲基蓝性能、固定化酶应用等进行研究,以期能为菠萝皮渣在水凝胶材料方面的应用提供理论和技术基础,为农产品废弃物资源的高值化利用提供基础数据。主要研究内容及结果如下:第一部分:离子液体中菠萝皮渣纤维素的改性及水凝胶制备研究在离子液体(1-丁基-3-甲基咪唑氯盐,BmimCl)中对菠萝皮渣纤维素(PPC)进行乙酰化改性并负载乌贼墨制备复合水凝胶。在不加催化剂的情况下,纤维素乙酰化反应在离子液体BmimCl中能够顺利进行,反应后纤维素晶体类型从I型转为II型。乌贼墨均匀分布在水凝胶表面,并能提高水凝胶的热稳定性。当乙酰化反应3 h、反应温度80℃、乙酸酐/AGUPPC摩尔比4:1和乌贼墨添加量20%时制备的水凝胶具有更好的亚甲基蓝吸附性能,吸附量可达到147.41 mg/g,而未添加乌贼墨制备的水凝胶吸附量仅为53.72mg/g。水凝胶对亚甲基蓝的吸附过程遵循准二级动力学模型,属于化学吸附。在离子液体BmimCl中进行PPC接枝丙烯酸反应并负载乌贼墨和高岭土制备成具有pH敏感性特征的复合水凝胶。乌贼墨和高岭土能够在水凝胶中均匀分布,增强水凝胶的热稳定性。水凝胶的溶胀过程符合Schott二阶动力学模型,且具有pH响应特性。添加10%高岭土和20%乌贼墨制备的水凝胶具有较好的吸附亚甲基蓝性能,吸附量为153.85 mg/g,吸附率为95.45%。水凝胶对亚甲基蓝的吸附过程遵循准二级动力学模型,属于化学吸附。第二部分:菠萝皮渣羧甲基纤维素基智能水凝胶制备及溶胀响应特性研究通过接枝聚合反应制备菠萝皮渣羧甲基纤维素(PCMC)/丙烯酸-丙烯酰胺/白土超吸水智能水凝胶。添加白土后水凝胶在蒸馏水中的溶胀率从420.17 g/g增加到515.24 g/g,在0.9%NaCl溶液中的溶胀率从28.03 g/g增加到37.89 g/g。溶胀过程符合Fickian扩散模型和Schott二阶动力学模型。水凝胶的溶胀具有明显的pH、盐和溶剂敏感性。在尿素溶液中具有高溶胀率,可作为化肥缓释剂和保水剂应用到农业领域。以PCMC、明胶(GL)和海藻酸钠(SA)为原料,通过CaCl2和戊二醛双交联制备具有多重智能响应性的天然聚电解质复合水凝胶。随着水凝胶中PCMC比例的增加,水凝胶表面孔状结构增加,溶胀率增加,溶胀过程遵循Fickian扩散模型和Schott二阶动力学模型,溶胀行为具有明显的pH敏感性和盐敏感性特征。施加直流电场后,水凝胶出现一定程度的形变弯曲行为,具有明显的电场敏感性。弯曲程度与电解质NaCl溶液浓度、pH值和电场强度有关,并呈现可逆弯曲行为。制备的水凝胶在药物输送、生物传感器、人工肌肉领域具有一定的应用前景。第三部分:菠萝皮渣羧甲基纤维素基复合水凝胶的制备及应用研究以PCMC和聚乙烯醇(PVA)为基础原料,介孔二氧化硅SBA-15为功能材料,采用冻融循环法制备PCMC/PVA/SBA-15复合水凝胶,并通过物理吸附和戊二醛交联共固定化木瓜蛋白酶。PCMC、PVA和SBA-15可依靠氢键相互作用连接形成交联结构。添加SBA-15可产生致孔效应,添加PCMC后的水凝胶呈现出更均匀、尺寸更大的孔状形态,同时提高水凝胶的热稳定性。水凝胶的制备工艺影响固定化木瓜蛋白酶活力,最优的固定化木瓜蛋白酶条件是:木瓜蛋白酶浓度3 mg/mL、酶溶液pH值6.5、戊二醛浓度0.75%和交联时间1.5 h。固定化后的木瓜蛋白酶具有明显的pH敏感性,同时pH、温度和储存稳定性也得到一定程度的提高。以PCMC、PVA为基本原料,加入无机粒子氧化石墨烯(GO)和皂土(bentonite),通过冻融循环法制备了PCMC/PVA/GO/bentonite复合水凝胶。PVA、PCMC、GO和皂土之间存在氢键作用,GO和皂土能够均匀分散在水凝胶网络中并起到物理交联剂的作用。GO和皂土能够促进水凝胶孔状结构的形成,提高水凝胶的热稳定性和溶胀性。水凝胶的溶胀过程具有pH敏感性,在pH 8.0时具有最大的溶胀率。水凝胶对亚甲基蓝的吸附性能受温度、pH值和染料浓度影响;添加GO和皂土能增强水凝胶的吸附亚甲基蓝性能。水凝胶PVA/PCMC/GO/bentonite使用四次数后仍保持92.76%的吸附量,具有良好的循环使用性能。吸附过程遵循准二级动力学吸附模型和Langmuir等温吸附模型。
王丽[9](2018)在《新型磁性纳米材料的制备及其分离纯化菠萝蛋白酶的研究》文中指出菠萝蛋白酶,具有酯键和酰胺键的特性,其水解能力强,生物活性高,被普遍应用于食品、药品、饲料等多个方面。但是,由于植物细胞结构复杂,含有许多复杂的有机化合物,如酚类、色素、多糖等,对高纯度和高活性菠萝蛋白酶的提取造成影响,因此,研发一种新型的菠萝蛋白酶分离纯化的方法具有重要意义。本论文主要制备了三种磁性纳米材料,通过透射电镜(TEM)、热重分析(TGA)、X-射线衍射(XRD)、磁滞回线(VSM)和傅里叶变换红外(FT-IR)对材料的形貌和性能进行表征,并将其用于分离纯化菠萝蛋白酶,具体内容如下:(1)设计合成了温敏性磁性微球Fe3O4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni2+,对其形貌及结构进行表征。优化了该材料与菠萝蛋白酶之间的吸附条件如温度、pH、时间等参数,得到该磁性微球对菠萝蛋白酶的最佳吸附量为117 mg/g。将达到吸附平衡的Fe3O4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni2+与菠萝蛋白酶混合液在70℃条件下变性10 min,室温条件复性1 h后,菠萝蛋白酶酶活恢复到原来的35%,两个小时后酶活恢复到原来的40%,而游离酶酶活则减少到原来的7%。表明该材料在热环境中有助于减少菠萝蛋白酶的酶活损失。(2)设计合成了可调聚合物壳层的磁性微球Fe3O4@SiO2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni2+,并将其应用于对菠萝蛋白酶的分离纯化。选定NIPAM与AIM单体比例为1:1的吸附剂材料为研究对象,优化了该材料与菠萝蛋白酶之间的吸附条件如温度、pH、时间、吸附比等参数,确定出该材料的最佳吸附量为198.6 mg/g。此外,该材料对菠萝皮粗提液中菠萝蛋白酶的纯化倍数为1.68,酶活回收率达到80%,纯化效果显着。通过SDS-PAGE分析,证明最终从菠萝皮粗提液中纯化出来的酶液,其纯度已经达到了电泳纯。最后,通过洗脱前后酶活数据以及UV-vis,FT-IR和CD分析,证明该纯化方法对菠萝蛋白酶的分子结构没有造成破坏。(3)设计合成了磁性氧化石墨烯复合功能材料GO@Fe3O4@PEI-Cu2+,并对其性能和形貌进行表征,优化了该材料与菠萝蛋白酶之间的吸附条件如温度、pH、时间、吸附比等参数,确定出该材料的最佳吸附量为357.4 mg/g。GO@Fe3O4@PEI-Cu2+经过6次循环利用后,对菠萝蛋白酶的吸附量仍可达221mg/g,证明该材料具有优良的可重复利用性能。通过SDS-PAGE分析,GO@Fe3O4@PEI-Cu2+从菠萝皮粗提液中纯化出来的酶其纯度已经达到了电泳纯。最后,通过UV-vis,FT-IR和CD分析,证明该纯化方法对菠萝蛋白酶的分子结构没有造成破坏。
赵立,周振,贺倩倩,汤超,黄鸣璐,李苗云,陈军,白青云[10](2018)在《超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉嫩化的影响》文中提出采用单因素和响应面设计优化了超声波辅助菠萝蛋白酶嫩化鸭肉的最佳工艺参数,并对嫩化机理进行探讨。得到优化条件为处理温度45℃、pH 7.2、菠萝蛋白酶添加量350 U/g、超声波功率80 W、嫩化时间15 min,在该条件下剪切力的预测值为20.208 N,实测值为21.110 N。相对于未处理的鸭肉,嫩化组鸭肉的pH值、持水力和肌原纤维小片化指数显着增加(P<0.05),剪切力、肌原纤维溶解度和不溶性胶原蛋白的含量显着下降(P<0.05),而色差无明显变化(P>0.05)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示嫩化组鸭肉中大分子蛋白被水解成小分子肽类或氨基酸。透射电镜结果显示嫩化组鸭肉肌原纤维Z线断裂溶解,肌节变形缩短,I带和A带模糊不清,出现了肌原纤维小片化现象。超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉的嫩化具有显着的效果,大大缩短了嫩化时间,使鸭肉更加多汁并富有弹性,鸭肉的品质得到了极大的改善。
二、某些因素对菠萝中菠萝蛋白酶热稳定性的影响(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、某些因素对菠萝中菠萝蛋白酶热稳定性的影响(论文提纲范文)
(1)季铵盐表面活性剂反胶束液液萃取蛋白质的效能研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 蛋白质的简介 |
1.2 蛋白质的分离提纯 |
1.2.1 沉淀法 |
1.2.2 层析法 |
1.2.3 高效液相色谱法 |
1.2.4 萃取法 |
1.3 表面活性剂的简介 |
1.3.1 表面活性剂概述及分类 |
1.3.2 Gemini表面活性剂的特点及应用 |
1.4 表面活性剂和蛋白质的相互作用 |
1.4.1 阴离子型表面活性剂与蛋白质的相互作用 |
1.4.2 阳离子型表面活性剂与蛋白质的相互作用 |
1.4.3 两性表面活性剂与蛋白质的相互作用 |
1.4.4 非离子型表面活性剂与蛋白质的相互作用 |
1.5 反胶束液液萃取蛋白质研究 |
1.5.1 反胶束液液萃取蛋白质的机理 |
1.5.2 反胶束液液萃取的影响因素 |
1.6 本论文的研究意义和主要内容 |
1.6.1 论文的研究意义 |
1.6.2 论文的研究内容 |
1.6.3 论文的创新点 |
第2章 季铵盐单链表面活性剂反胶束液液萃取菠萝蛋白酶 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 实验试剂及仪器 |
2.2.2 实验方法 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 水相pH值对菠萝蛋白酶萃取效能的影响 |
2.3.2 离子强度对菠萝蛋白酶萃取效能的影响 |
2.3.3 表面活性剂浓度对菠萝蛋白酶萃取效能的影响 |
2.3.4 菠萝蛋白酶粗提液的稀释倍数对菠萝蛋白酶萃取效能的影响 |
2.3.5 季铵盐单链表面活性剂和菠萝蛋白酶的相互作用 |
2.4 本章小结 |
第3章 季铵盐Gemini表面活性剂反胶束对菠萝蛋白酶的萃取 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 实验试剂及仪器 |
3.2.2 实验方法 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 C_(12)-C_5-C_(12)反胶束前萃取菠萝蛋白酶 |
3.3.2 C_(12)-C_5-C_(12)反胶束后萃取菠萝蛋白酶 |
3.3.3 间隔基链长对季铵盐Gemini表面活性剂反胶束萃取效能的影响 |
3.3.4 疏水链长对季铵盐Gemini表面活性剂反胶束萃取效能的影响 |
3.3.5 季铵盐Gemini表面活性剂和菠萝蛋白酶的相互作用 |
3.4 本章小结 |
第4章 季铵盐表面活性剂混合反胶束对菠萝蛋白酶的萃取 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 实验试剂及仪器 |
4.2.2 实验方法 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 混合反胶束体系前萃取菠萝蛋白酶 |
4.3.2 混合反胶束体系后萃取菠萝蛋白酶 |
4.3.3 季铵盐表面活性剂混合反胶束体系和菠萝蛋白酶的相互作用 |
4.4 本章小结 |
第5章 溶剂和助溶剂对反胶束提纯菠萝蛋白酶的影响 |
5.1 引言 |
5.2 实验部分 |
5.2.1 实验试剂及仪器 |
5.2.2 实验方法 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 反胶束中溶剂和助溶剂对菠萝蛋白酶前萃取分相情况的影响 |
5.3.2 溶剂和助溶剂对季铵盐单链表面活性剂反胶束萃取效能的影响 |
5.3.3 溶剂和助溶剂对季铵盐Gemini表面活性剂反胶束萃取效能的影响 |
5.3.4 溶剂和助溶剂对季铵盐表面活性剂反胶束混合体系萃取效能的影响 |
5.4 本章小结 |
第6章 季铵盐表面活性剂反胶束对不同蛋白质的萃取 |
6.1 引言 |
6.2 实验部分 |
6.2.1 实验试剂及仪器 |
6.2.2 实验方法 |
6.3 结果与讨论 |
6.3.1 季铵盐表面活性剂反胶束液液萃取牛血清白蛋白和卵清蛋白 |
6.3.2 季铵盐表面活性剂反胶束液液萃取菠萝蛋白酶 |
6.3.3 季铵盐表面活性剂反胶束液液萃取多酚氧化酶 |
6.3.4 蛋白质种季铵盐表面活性剂反胶束萃取蛋白质的影响 |
6.4 本章小结 |
第7章 结语 |
7.1 结论 |
7.2 展望 |
参考文献 |
攻读学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
(2)利用菠萝果肉纤维素构建水凝胶-脂质体复合载药体系及其缓释的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表 |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 菠萝的综合利用现状 |
1.2.1 菠萝简介 |
1.2.2 菠萝加工废弃物的综合利用情况 |
1.3 纤维素的研究现状 |
1.3.1 纤维素的结构 |
1.3.2 纤维素的溶解 |
1.3.3 纤维素改性 |
1.4 水凝胶及其研究现状 |
1.4.1 pH敏感性水凝胶 |
1.4.2 温度敏感性水凝胶 |
1.4.3 磁场敏感性水凝胶 |
1.4.4 电场敏感型水凝胶 |
1.4.5 纤维素水凝胶构建的控制释放系统及其应用 |
1.5 益生菌简介 |
1.6 研究目的和内容 |
1.6.1 研究目的和意义 |
1.6.2 研究内容 |
第二章 菠萝果肉纤维素的分离提取及结构表征 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 材料与试剂 |
2.2.2 仪器与设备 |
2.2.3 纤维素的提取 |
2.2.4 纤维素含量的测定 |
2.2.5 纤维素提取方法的优化 |
2.2.6 纤维素的结构表征 |
2.2.7 数据统计分析 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 单因素实验 |
2.3.2 响应面实验 |
2.3.3 红外光谱分析 |
2.3.4 X射线衍射分析 |
2.3.5 热稳定性分析 |
2.4 本章小结 |
第三章 以菠萝果肉纤维素为主体构建益生菌控释体系的研究 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 材料与试剂 |
3.2.2 仪器与设备 |
3.2.3 水凝胶的制备 |
3.2.4 结构表征 |
3.2.5 水凝胶的性能测定 |
3.2.6 标准蛋白曲线的绘制 |
3.2.7 益生菌含量的测定方法 |
3.2.8 数据统计分析 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 结构表征 |
3.3.2 水凝胶在模拟胃肠环境中的的溶胀性能 |
3.3.3 水凝胶的pH敏感性 |
3.3.4 水凝胶的缓释性能 |
3.4 本章小结 |
第四章 菠萝果肉纤维素水凝胶-脂质体复合载药体系的构建 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 材料与试剂 |
4.2.2 仪器与设备 |
4.2.3 脂质体的制备 |
4.2.4 包封率的测定 |
4.2.5 脂质体制备方法的优化 |
4.2.6 水凝胶-脂质体复合载药体系的制备 |
4.2.7 结构表征 |
4.2.8 水凝胶-脂质体复合载药体系的缓释性能测定 |
4.2.9 数据统计分析 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 制备Pro-lips的单因素比较 |
4.3.2 正交实验结果与分析 |
4.3.3 脂质体形态观察 |
4.3.4 结构表征 |
4.3.5 水凝胶-脂质体复合载药体系的缓释性能 |
4.4 本章小结 |
结论与展望 |
一、结论 |
二、创新点 |
三、展望 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
附件 |
(3)改性菠萝皮渣纤维素固定化菠萝蛋白酶研究(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料与试剂 |
1.2 仪器与设备 |
1.3 实验方法 |
1.3.1 菠萝皮渣纤维素的提取 |
1.3.2 L-丝氨酸改性菠萝皮渣纤维素的制备 |
1.3.3 改性菠萝皮渣纤维素固定化菠萝蛋白酶的制备 |
1.3.4 固定化菠萝蛋白酶制备条件优化 |
1.3.5 菠萝蛋白酶活力的测定 |
1.3.6 结构表征与分析 |
1.3.6. 1 红外光谱分析 |
1.3.6. 2 热稳定性分析 |
1.3.6. 3 X射线衍射分析 |
2 结果与分析 |
2.1 PPC、MPPC、菠萝蛋白酶以及MPPC-Br的表征结果 |
2.1.1 PPC、MPPC、菠萝蛋白酶以及MPPC-Br的结构分析 |
2.1.2 PPC、MPPC及MPPC-Br的热重分析结果 |
2.1.3 PPC、MPPC以及MPPC-Br的XRD分析结果 |
2.2 菠萝蛋白酶固定化条件的优化结果 |
2.2.1 PPC与离子液体[Bmim]Cl的质量比对固定化酶活性的影响 |
2.2.2 L-丝氨酸与PPC质量比对固定化酶活性的影响 |
2.2.3 戊二醛溶液体积分数对固定化酶活性的影响 |
2.2.4 交联时间对固定化酶活性的影响 |
2.3 MPPC-Br的特性分析 |
2.3.1 MPPC-Br的热稳定性 |
2.3.2 MPPC-Br的酸碱稳定性 |
3 结论 |
(4)菠萝皮渣羧甲基纤维素/海藻酸钠复合水凝胶珠固定化菠萝蛋白酶的制备及稳定性研究(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料与仪器 |
1.2 实验方法 |
1.2.1 PCMC的制备 |
1.2.2 固定化菠萝蛋白酶的制备 |
1.2.3 菠萝蛋白酶的活力测定 |
1.2.4 单因素试验 |
1.2.5 固定化酶的稳定性研究 |
1.2.5. 1 热稳定性 |
1.2.5. 2 酸碱稳定性 |
1.2.5. 3 重复使用性 |
1.3 数据处理 |
2 结果与分析 |
2.1 菠萝蛋白酶固定化条件的优化 |
2.1.1 PCMC与SA质量比对固定化酶活性的影响 |
2.1.2 CaCl2溶液浓度对固定化酶活性的影响 |
2.1.3 菠萝蛋白酶浓度对固定化酶活性的影响 |
2.1.4 戊二醛体积分数对固定化酶活性的影响 |
2.1.5 交联时间对固定化酶活性的影响 |
2.2 固定化菠萝蛋白酶的稳定性研究 |
2.2.1 固定化酶和游离酶的热稳定性比较 |
2.2.2 固定化酶和游离酶的酸碱稳定性比较 |
2.2.3 固定化酶的重复使用性 |
3 结论 |
(5)干白葡萄酒蛋白质稳定性研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 干白葡萄酒蛋白质稳定性 |
1.1.1 干白葡萄酒蛋白质稳定性的主要鉴定方法 |
1.1.2 白葡萄酒蛋白质稳定处理 |
1.2 干白葡萄酒中的蛋白质 |
1.2.1 蛋白质来源 |
1.2.2 蛋白质特性 |
1.2.3 干白葡萄酒蛋白质含量 |
1.2.4 蛋白质浑浊 |
1.2.5 病程相关蛋白 |
1.2.6 糖蛋白 |
1.3 蛋白质的分析检测 |
1.3.1 蛋白质提取 |
1.3.2 蛋白质电泳 |
1.3.3 蛋白质定量 |
1.3.4 蛋白质二级结构的分析 |
1.4 植物蛋白酶与干白葡萄酒的蛋白质稳定性 |
1.4.1 植物蛋白酶法提高干白葡萄酒蛋白质稳定性 |
1.5 研究目的与意义 |
1.6 技术路线图 |
第二章 干白葡萄酒蛋白质种类、含量及其稳定性研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验试剂 |
2.1.3 试验仪器与设备 |
2.1.4 干白葡萄酒蛋白质种类与稳定性研究 |
2.1.5 干白葡萄酒蛋白质含量测定 |
2.2 结果与讨论 |
2.2.1 干白葡萄酒蛋白质种类与稳定性研究 |
2.2.2 干白葡萄酒蛋白质含量与稳定性研究 |
第三章 沉淀蛋白质二级结构研究 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 试验试剂 |
3.1.3 试验仪器与设备 |
3.1.4 干白葡萄酒蛋白质沉淀显微观察 |
3.1.5 蛋白质的提取 |
3.1.6 蛋白质二级结构测定 |
3.1.7 拉曼光谱测试 |
3.1.8 数据处理 |
3.2 结果与讨论 |
3.2.1 干白葡萄酒蛋白质显微观察 |
3.2.2 干白葡萄酒沉淀蛋白质二级结构 |
3.2.3 干白葡萄酒沉淀蛋白质二级结构变化 |
3.2.4 干白葡萄酒沉淀蛋白质二级结构定量 |
第四章 植物蛋白酶对干白葡萄酒蛋白质稳定性的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验材料 |
4.1.2 试验试剂 |
4.1.3 试验仪器与设备 |
4.1.4 木瓜蛋白酶澄清干白葡萄酒的方法 |
4.1.5 菠萝蛋白酶澄清干白葡萄酒的方法 |
4.1.6 干白葡萄酒蛋白质稳定性检验 |
4.2 结果与讨论 |
4.2.1 木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶对干白葡萄酒澄清效果的研究 |
4.2.2 植物蛋白酶对干白葡萄酒蛋白质稳定性的影响 |
第五章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
论文发表情况 |
(6)双水相浮选体系的设计构建及其在分离纯化菠萝蛋白酶和融合β-葡萄糖苷酶中的应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 双水相浮选 |
1.1.1 双水相浮选概述 |
1.1.2 双水相浮选特点 |
1.1.3 双水相浮选的基本原理 |
1.1.4 双水相浮选影响参数 |
1.1.5 双水相浮选的研究进展 |
1.2 菠萝蛋白酶 |
1.2.1 菠萝蛋白酶的结构和性质 |
1.2.2 菠萝蛋白酶的分离纯化方法研究进展 |
1.3 β-葡萄糖苷酶 |
1.3.1 β-葡萄糖苷酶的结构和性质 |
1.3.2 β-葡萄糖苷酶的分离纯化方法研究进展 |
1.4 融合蛋白技术 |
1.4.1 融合蛋白技术及连接肽 |
1.4.2 融合标签 |
1.5 课题的选题目的、意义及研究内容 |
1.5.1 选题目的和意义 |
1.5.2 研究内容 |
第二章 基于金属螯合离子液体双水相溶剂浮选体系的构建及分离纯化菠萝蛋白酶的应用研究 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 实验材料、试剂和主要仪器 |
2.2.2 温敏聚合物L64-IDA-Cu(Ⅱ)的制备 |
2.2.3 温敏聚合物L64-IDA-Cu(Ⅱ)的性能鉴定 |
2.2.4 菠萝蛋白酶的稳定性实验 |
2.2.5 基于温敏嵌段聚合物L64-IDA-Cu(Ⅱ)作为捕集剂的ILATPF和两步沉淀对菠萝蛋白酶的分离纯化 |
2.2.6 响应曲面设计 |
2.2.7 菠萝蛋白酶的酶活和蛋白质含量的测定 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 温敏嵌段聚合物L64-IDA-Cu(Ⅱ)的合成与性能研究 |
2.3.2 菠萝蛋白酶的稳定性研究 |
2.3.3 以L64-IDA-Cu(Ⅱ)为捕集剂的ILATPF分离菠萝蛋白酶的条件探究 |
2.3.4 两步沉淀纯化菠萝蛋白酶的条件探究 |
2.3.5 [Bmim]Br和L64-IDA-Cu(Ⅱ)的循环使用 |
2.3.6 菠萝蛋白酶的结构表征 |
2.4 本章小结 |
第三章 聚合物-盐双水相浮选体系的构建及其对融合β-葡萄糖苷酶的分离纯化研究 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 实验材料、试剂和主要仪器 |
3.2.2 融合蛋白GLEGB的诱导表达实验 |
3.2.3 β-葡萄糖苷酶的稳定性研究 |
3.2.4 ATPF结合ITC对融合蛋白GLEGB的分离纯化 |
3.2.5 响应曲面设计 |
3.2.6 β-葡萄糖苷酶的酶活和蛋白含量测定 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 β-葡萄糖苷酶的稳定性研究 |
3.3.2 ATPF-ITC分离纯化融合蛋白GLEGB |
3.3.3 ITC纯化融合蛋白GLEGB的条件探索 |
3.3.4 聚合物PEG 2000的循环使用 |
3.3.5 融合蛋白GLEGB的结构表征 |
3.4 本章小结 |
第四章 结论与创新点 |
4.1 本研究的主要结论 |
4.2 本研究的创新点 |
参考文献 |
致谢 |
硕士期间研究成果 |
附录A:中英文符号及缩写对照表 |
(7)基于表面活性剂调控菠萝蛋白酶活性的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1. 菠萝蛋白酶的研究 |
1.1.1 菠萝蛋白酶的来源和组成 |
1.1.2 菠萝蛋白酶活性的影响因素 |
1.1.3 菠萝蛋白酶的应用 |
1.2 表面活性剂简介 |
1.2.1 表面活性剂概述 |
1.2.2 表面活性剂的特点 |
1.2.3 表面活性剂的应用 |
1.3 表面活性剂与蛋白质相互作用的研究 |
1.3.1 表面活性剂与蛋白质相互作用的研究方法 |
1.3.2 表面活性剂与蛋白质相互作用的影响因素 |
1.4 本文的研究内容和意义 |
参考文献 |
第二章 表面活性剂结构对菠萝蛋白酶活性的影响 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 原料与试剂 |
2.2.2 实验仪器 |
2.2.3 实验方法 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 表面活性剂对菠萝蛋白酶活性的影响 |
2.3.2 表面活性剂复配体系对菠萝蛋白酶活性的影响 |
2.3.3 表面活性剂对菠萝蛋白酶光谱行为的影响 |
2.4 本章小结 |
参考文献 |
第三章 表面活性剂对菠萝蛋白酶稳定性的影响 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 原料与试剂 |
3.2.2 实验仪器 |
3.2.3 实验方法 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 温度对菠萝蛋白酶活性的影响 |
3.3.2 菠萝蛋白酶的热稳定性 |
3.3.3 外界因素对菠萝蛋白酶活性的影响 |
3.3.4 阳离子表面活性剂对菠萝蛋白酶光谱行为的影响 |
3.4 本章小结 |
参考文献 |
第四章 表面活性剂对菠萝蛋白酶提取效能的影响 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 原料与试剂 |
4.2.2 实验仪器 |
4.2.3 实验方法 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 表面活性剂结构和浓度对反胶束萃取的影响 |
4.3.2 反胶束的含水量 |
4.3.3 反胶束对水和蛋白质的增溶量 |
4.4 本章小结 |
参考文献 |
第五章 结论 |
致谢 |
硕士期间发表学术论文 |
(8)菠萝皮渣纤维素基水凝胶的制备、表征及其性能研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表 |
第一章 绪论 |
1.1 农产品加工废弃物的综合利用概括 |
1.2 菠萝加工废弃物的综合利用概括 |
1.2.1 菠萝简介 |
1.2.2 菠萝皮渣的综合利用概述 |
1.2.2.1 菠萝蛋白酶 |
1.2.2.2 生物活性物质领域 |
1.2.2.3 清洁能源生产领域 |
1.2.2.4 材料领域 |
1.2.2.5 饲料领域 |
1.2.2.6 食品领域 |
1.3 纤维素研究进展 |
1.3.1 纤维素结构 |
1.3.2 纤维素溶剂 |
1.3.2.1 无机溶剂体系 |
1.3.2.2 有机溶剂体系 |
1.3.2.3 离子液体体系 |
1.3.3 纤维素改性 |
1.3.3.1 化学改性 |
1.3.3.2 物理改性 |
1.3.3.3 生物改性 |
1.4 水凝胶的研究进展 |
1.4.1 智能水凝胶 |
1.4.1.1 pH敏感性水凝胶 |
1.4.1.2 温度敏感性水凝胶 |
1.4.1.3 电场敏感性水凝胶 |
1.4.1.4 磁场敏感性水凝胶 |
1.4.1.5 盐敏感性水凝胶 |
1.4.1.6 其它智能响应性水凝胶 |
1.4.2 水凝胶的应用 |
1.4.2.1 在医学领域方面的应用 |
1.4.2.2 在污水处理方面的应用 |
1.4.2.3 在农业领域方面的应用 |
1.4.2.4 在固定化酶和催化剂方面的应用 |
1.5 本文研究的内容及意义 |
第二章 离子液体中菠萝皮渣纤维素乙酰化改性及负载乌贼墨水凝胶的制备 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 材料与试剂 |
2.2.2 仪器与设备 |
2.2.3 纤维素的提取 |
2.2.4 乌贼墨的预处理 |
2.2.5 水凝胶的制备方法 |
2.2.6 结构表征 |
2.2.6.1 红外光谱(FTIR)表征 |
2.2.6.2 X射线衍射(XRD)表征 |
2.6.2.3 扫描电镜(SEM)观察 |
2.2.6.4 热稳定性分析(TG-DSC) |
2.2.7 水凝胶吸附亚甲基蓝性能测定 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 FTIR分析 |
2.3.2 XRD分析 |
2.3.3 SEM分析 |
2.3.4 TG-DSC分析 |
2.3.5 吸附亚甲基蓝动力学分析 |
2.4 本章小结 |
第三章 离子液体中菠萝皮渣纤维素接枝丙烯酸及负载乌贼墨和高岭土水凝胶的制备 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 材料与试剂 |
3.2.2 仪器与设备 |
3.2.3 乌贼墨的预处理 |
3.2.4 水凝胶的制备方法 |
3.2.5 结构表征 |
3.2.5.1 FTIR表征 |
3.2.5.2 XRD表征 |
3.2.5.3 SEM表征 |
3.2.5.4 热稳定性分析(TG-DSC) |
3.2.6 水凝胶的溶胀性能测定 |
3.2.7 水凝胶的p H响应性测定 |
3.2.8 水凝胶吸附亚甲基蓝性能测定 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.0 水凝胶形成机制 |
3.3.1 FTIR分析 |
3.3.2 XRD分析 |
3.3.3 SEM分析 |
3.3.4 TG-DSC分析 |
3.3.5 溶胀动力学分析 |
3.3.6 pH敏感性分析 |
3.3.7 吸附亚甲基蓝性能分析 |
3.4 本章小结 |
第四章 菠萝皮渣羧甲基纤维素基超吸水智能水凝胶的制备及溶胀特性研究 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 材料与试剂 |
4.2.2 仪器与设备 |
4.2.3 羧甲基纤维素的制备 |
4.2.4 水凝胶的制备 |
4.2.5 结构表征 |
4.2.5.1 FTIR表征 |
4.2.5.2 XRD表征 |
4.2.5.3 SEM分析 |
4.2.6 水凝胶的溶胀性能测定 |
4.2.7 水凝胶的pH响应性测定 |
4.2.8 水凝胶的盐敏感性测定 |
4.2.9 水凝胶的溶剂敏感性测定 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 水凝胶的形成机制 |
4.3.2 FTIR分析 |
4.3.3 XRD分析 |
4.3.4 SEM分析 |
4.3.5 溶胀性能分析 |
4.3.6 pH敏感性分析 |
4.3.7 盐敏感性分析 |
4.3.8 溶剂敏感性分析 |
4.4 本章小结 |
第五章 菠萝皮渣羧甲基纤维素/海藻酸钠/明胶多重响应复合水凝胶的制备及特性研究 |
5.1 引言 |
5.2 材料与方法 |
5.2.1 材料与试剂 |
5.2.2 仪器与设备 |
5.2.3 水凝胶的制备方法 |
5.2.4 结构表征 |
5.2.4.1 FTIR表征 |
5.2.4.2 XRD表征 |
5.2.4.3 SEM分析 |
5.2.5 溶胀动力学 |
5.2.6 水凝胶的pH响应性测定 |
5.2.7 水凝胶的盐敏感性测定 |
5.2.8 水凝胶的电场敏感性测定 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 FTIR分析 |
5.3.2 XRD分析 |
5.3.3 SEM分析 |
5.3.4 溶胀性能分析 |
5.3.5 盐敏感性分析 |
5.3.6 pH敏感性分析 |
5.3.7 电场敏感性分析 |
5.3.7.1 水凝胶电场敏感性机理 |
5.3.7.2 离子强度对电场弯曲行为的影响 |
5.3.7.3 pH值对电场弯曲行为的影响 |
5.3.7.4 电场强度对电场弯曲行为的影响 |
5.3.7.5 可逆弯曲行为研究 |
5.4 本章小结 |
第六章 菠萝皮渣羧甲基纤维素/聚乙烯醇/SBA-15 复合水凝胶的制备及固定化酶应用 |
6.1 引言 |
6.2 材料与方法 |
6.2.1 材料与试剂 |
6.2.2 仪器与设备 |
6.2.3 水凝胶的制备方法 |
6.2.4 结构表征 |
6.2.4.1 FTIR表征 |
6.2.4.2 XRD表征 |
6.2.4.3 热稳定性分析(TG-DSC) |
6.2.4.4 SEM分析 |
6.2.5 木瓜蛋白酶的固定化 |
6.2.6 木瓜蛋白酶活性测定 |
6.2.7 固定化木瓜蛋白酶的p H敏感性 |
6.2.8 固定化木瓜蛋白酶的温度、p H和储存稳定性 |
6.3 结果与讨论 |
6.3.1 FTIR分析 |
6.3.2 XRD分析 |
6.3.3 TG-DSC分析 |
6.3.4 SEM分析 |
6.3.5 水凝胶制备参数对固定化木瓜蛋白酶活力的影响 |
6.3.6 木瓜蛋白酶固定化条件优化 |
6.3.6.1 酶浓度对固定化酶活力的影响 |
6.3.6.2 p H对固定化酶活力的影响 |
6.3.6.3 戊二醛浓度对固定化酶活力的影响 |
6.3.6.4 交联时间对固定化酶活力的影响 |
6.3.7 固定化木瓜蛋白酶的p H敏感性 |
6.3.8 固定化木瓜蛋白酶的p H和温度稳定性 |
6.3.9 固定化木瓜蛋白酶的储存稳定性 |
6.4 本章小结 |
第七章 菠萝皮渣羧甲基纤维素/聚乙烯醇/氧化石墨烯/皂土水凝胶的制备及吸附亚甲基蓝应用 |
7.1 引言 |
7.2 材料与方法 |
7.2.1 材料与试剂 |
7.2.2 仪器与设备 |
7.2.3 水凝胶的制备方法 |
7.2.4 结构表征 |
7.2.4.1 FTIR表征 |
7.2.4.2 XRD表征 |
7.2.4.3 热稳定性分析(TG-DSC) |
7.2.4.4 SEM分析 |
7.2.5 水凝胶的溶胀和p H敏感性 |
7.2.6 水凝胶对亚甲基蓝吸附测定 |
7.2.6.1 亚甲基蓝吸附动力学 |
7.2.6.2 p H值对吸附性能的影响 |
7.2.6.3 亚甲基蓝溶液浓度对吸附性能的影响 |
7.2.6.4 水凝胶吸附亚甲基蓝的重复使用性能测定 |
7.3 结果与讨论 |
7.3.1 FTIR分析 |
7.3.2 XRD分析 |
7.3.3 SEM分析 |
7.3.4 热稳定性分析 |
7.3.5 溶胀性能和p H敏感性分析 |
7.3.6 水凝胶对亚甲基蓝的吸附性能分析 |
7.3.6.1 在不同温度下的吸附动力学 |
7.3.6.2 p H值对吸附能力的影响 |
7.3.6.3 亚甲基蓝溶液浓度对吸附能力的影响 |
7.3.6.4 水凝胶吸附亚甲基蓝重复使用性能分析 |
7.3.6.5 水凝胶吸附亚甲基效果图 |
7.3.6.6 吸附等温线 |
7.4 本章小结 |
结论与展望 |
参考文献 |
攻读博士期间取得的研究成果 |
致谢 |
附录 |
(9)新型磁性纳米材料的制备及其分离纯化菠萝蛋白酶的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 绪论 |
1.1 菠萝蛋白酶 |
1.1.1 组成性质 |
1.1.2 分离纯化方法研究进展 |
1.1.3 应用 |
1.2 磁性纳米材料 |
1.2.1 磁性纳米粒子简介 |
1.2.2 磁性氧化石墨烯复合材料简介 |
1.3 温敏聚合物 |
1.3.1 温敏聚合物简介 |
1.3.2 温敏聚合物在吸附分离及酶保护方面的应用 |
1.4 本课题研究的目的、意义和内容 |
1.4.1 选题的目的及意义 |
1.4.2 研究内容 |
第二章 温敏型磁性微球对菠萝蛋白酶的分离纯化及酶性能研究 |
2.1 引言 |
2.2 实验试剂及设备 |
2.2.1 主要试剂 |
2.2.2 主要仪器设备 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 磁性微球Fe_3O_4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni~(2+)的制备 |
2.3.2 菠萝蛋白酶的吸附试验 |
2.3.3 等温吸附实验 |
2.3.4 Fe_3O_4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni~(2+)的循环利用试验 |
2.3.5 菠萝蛋白酶酶活力测定 |
2.3.6 吸附剂材料的实际应用 |
2.3.7 材料的表征 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 基于蒸馏沉淀聚合反应制备磁性微球 |
2.4.2 磁性材料的表征结果分析 |
2.4.3 Fe_3O_4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni~(2+)吸附菠萝蛋白酶条件的优化 |
2.4.4 等温吸附模型 |
2.4.5 Fe_3O_4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni~(2+)的循环利用性 |
2.4.6 Fe_3O_4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni~(2+)的热保护作用 |
2.4.7 吸附剂材料的实际应用 |
2.4.8 稳定性研究 |
2.5 小结 |
第三章 可调聚合物壳层磁性纳米材料对菠萝蛋白酶的分离纯化及酶性能研究 |
3.1 引言 |
3.2 实验试剂及设备 |
3.2.1 主要试剂 |
3.2.2 主要仪器设备 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 磁性微球Fe_3O_4@SiO_2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni~(2+)的制备 |
3.3.2 菠萝蛋白酶的吸附试验 |
3.3.3 等温吸附试验 |
3.3.4 Fe_3O_4@SiO_2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni~(2+)的循环利用试验 |
3.3.5 菠萝蛋白酶酶活力测定 |
3.3.6 吸附剂材料的实际应用 |
3.3.7 材料的表征 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 磁性微球Fe_3O_4@SiO_2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni~(2+)结合菠萝蛋白酶 |
3.4.2 磁性材料的表征结果分析 |
3.4.3 Fe_3O_4@SiO_2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni~(2+)吸附菠萝蛋白酶条件优化 |
3.4.4 等温吸附模型 |
3.4.5 Fe_3O_4@SiO_2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni~(2+)的循环利用性 |
3.4.6 Fe_3O_4@SiO_2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni~(2+)的热保护作用 |
3.4.7 Fe_3O_4@SiO_2@P(NIPAM-co-AIM)/Ni~(2+)的实际应用 |
3.4.8 稳定性研究 |
3.5 小结 |
第四章 磁性氧化石墨烯功能复合材料对菠萝蛋白酶的分离纯化及酶性能研究 |
4.1 引言 |
4.2 实验试剂及设备 |
4.2.1 主要试剂 |
4.2.2 主要仪器设备 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 磁性氧化石墨烯功能复合材料GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)的制备 |
4.3.2 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)吸附菠萝蛋白酶 |
4.3.3 等温吸附试验 |
4.3.4 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)的循环利用试验 |
4.3.5 菠萝蛋白酶酶活力测定 |
4.3.6 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)的实际应用 |
4.3.7 材料的表征 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)的制备 |
4.4.2 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)的表征结果分析 |
4.4.3 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)吸附菠萝蛋白酶条件的优化 |
4.4.4 等温吸附模型 |
4.4.5 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)的循环利用性能 |
4.4.6 GO@Fe_3O_4@PEI-Cu~(2+)实际应用 |
4.4.7 稳定性研究 |
4.5 小结 |
第五章 结论及创新点 |
5.1 本研究主要结论 |
5.2 本研究主要创新点 |
参考文献 |
致谢 |
硕士期间科研成果 |
(10)超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉嫩化的影响(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料与试剂 |
1.2 仪器与设备 |
1.3 方法 |
1.3.1 超声波与酶协同作用嫩化鸭肉的工艺优化 |
1.3.1. 1 单因素试验 |
1.3.1. 2 响应面优化试验 |
1.3.2 剪切力的测定 |
1.3.3 超声波与酶协同作用嫩化鸭肉的指标测定 |
1.3.3. 1 p H值测定 |
1.3.3. 2 持水力测定 |
1.3.3. 3 色差测定 |
1.3.3. 4 肌原纤维小片化指数 (myofibril fragmentation index, MFI) 测定 |
1.3.3. 5 肌原纤维的溶解度测定 |
1.3.3. 6 不溶性胶原蛋白含量测定 |
1.3.3. 7 SDS-PAGE分析[17-18] |
1.3.3. 8 透射电镜分析[19] |
1.4 数据分析 |
2.1.2 响应面优化试验结果 |
2.1.2. 1 响应面回归方程及方差分析 |
2.1.2. 2 交互作用影响分析 |
2结果与分析 |
2.1超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉的嫩化工艺结果 |
2.1.1单因素试验结果 |
2.1.1.1温度对鸭肉嫩化效果的影响 |
2.1.1.2嫩化时间对鸭肉嫩化效果的影响 |
2.1.1.3p H值对鸭肉嫩化效果的影响 |
2.1.1.4酶添加量对鸭肉嫩化效果的影响 |
2.1.1.5超声波功率对鸭肉剪切力的影响 |
2.1.3 最佳工艺参数确定及验证实验结果 |
2.2 超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉嫩化的作用机理 |
2.2.1 协同嫩化与对照组理化指标的比较 |
2.2.2 超声波协同嫩化与单一菠萝蛋白酶嫩化的比较 |
2.2.3 SDS-PAGE结果 |
2.2.4 透射电镜结果 |
3 结论 |
四、某些因素对菠萝中菠萝蛋白酶热稳定性的影响(论文参考文献)
- [1]季铵盐表面活性剂反胶束液液萃取蛋白质的效能研究[D]. 丁欣. 扬州大学, 2021
- [2]利用菠萝果肉纤维素构建水凝胶-脂质体复合载药体系及其缓释的研究[D]. 行云逸. 华南理工大学, 2020(02)
- [3]改性菠萝皮渣纤维素固定化菠萝蛋白酶研究[J]. 陈辉,黄惠华. 食品科学技术学报, 2020(02)
- [4]菠萝皮渣羧甲基纤维素/海藻酸钠复合水凝胶珠固定化菠萝蛋白酶的制备及稳定性研究[J]. 陈辉,黄惠华. 食品工业科技, 2020(06)
- [5]干白葡萄酒蛋白质稳定性研究[D]. 张梦园. 宁夏大学, 2019(02)
- [6]双水相浮选体系的设计构建及其在分离纯化菠萝蛋白酶和融合β-葡萄糖苷酶中的应用研究[D]. 蔡云凤. 江苏大学, 2019(03)
- [7]基于表面活性剂调控菠萝蛋白酶活性的研究[D]. 郭晶晶. 扬州大学, 2018(01)
- [8]菠萝皮渣纤维素基水凝胶的制备、表征及其性能研究[D]. 戴宏杰. 华南理工大学, 2018(12)
- [9]新型磁性纳米材料的制备及其分离纯化菠萝蛋白酶的研究[D]. 王丽. 江苏大学, 2018(02)
- [10]超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉嫩化的影响[J]. 赵立,周振,贺倩倩,汤超,黄鸣璐,李苗云,陈军,白青云. 食品科学, 2018(12)